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(a) 서열번호 2의 아미노산 서열로 특정되는 민들레 유래 또는 서열번호 6의 아미노산 서열로 특정되는 고무나무 유래 천연고무 합성 효소인 시스-프레닐트랜스퍼라제를 암호화하는 유전자를 발현시킬 수 있는 발현벡터와 서열번호 4의 아미노산 서열로 특정되는 대장균 유래의 UDP 피로인산 신타아제를 암호화하는 유전자를 발현시킬 수 있는 발현벡터를 제작하는 단계, (b) 상기 발현벡터를 숙주 미생물인 대장균에 형질전환시키는 단계, (c) 상기 형질전환된 숙주 미생물인 대장균을 배양하는 단계, 및 (d) 그 배양된 형질전환 숙주 미생물인 대장균으로부터 천연고무를 분리하는 단계를 포함하는 재조합 미생물을 이용한 천연고무의 생산 방법
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제1항에 있어서,상기 (a) 단계에서 서열번호 8의 아미노산 서열로 특정되는 대장균 유래 이소펜테닐2인산 이소머라아제를 암호화하는 유전자를 발현시킬 수 있는 발현벡터를 제작하는 단계가 추가로 수행되고,상기 (b) 단계에서 상기 이소펜테닐2인산 이소머라아제 발현벡터를 숙주 미생물에 함께 형질전환시키는 단계가 추가로 수행되는 것을 특징으로 하는 재조합 미생물을 이용한 천연고무의 생산 방법
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제1항에 있어서,상기 발현벡터는 플라스미드, 코스미드, 파지미드, 파지 및 바이러스 중 하나인 것을 특징으로 하는 재조합 미생물을 이용한 천연고무의 생산 방법
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제1항에 있어서,상기 발현벡터는 플라스미드인 것을 특징으로 하는 재조합 미생물을 이용한 천연고무의 생산 방법
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제1항에 있어서,상기 발현벡터는 조절서열이 상기 유전자들에 작동 가능하게 연결된 것을 특징으로 하는 재조합 미생물을 이용한 천연고무의 생산 방법
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제1항에 있어서,상기 유전자들이 T7A1, T7A2, T7A3, λpL, λpR, lac, lacUV5, trp, tac, trc, phoA, rrnB 및 1PL 중에서 선택된 프로모터에 의해서 조절되는 것을 특징을 하는 재조합 미생물을 이용한 천연고무의 생산 방법
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7
제1항에 있어서,상기 발현벡터는 선별마커 유전자를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 재조합 미생물을 이용한 천연고무의 생산 방법
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제1항에 있어서,상기 숙주 미생물인 대장균은 대장균 W3110, 대장균 BL21, 대장균 BL21(DE3), 대장균 DH1, 대장균 DH4I, 대장균 DH5, 대장균 DH5I, 대장균 DH5IF', 대장균 DH5IMCR, 대장균 DH10B, 대장균 DHIOB/p3, 대장균 DH1 IS, 대장균 C600, 대장균 HB101, 대장균 JM101, 대장균 JM105, 대장균 JM109, 대장균 JM110, 대장균 K38, 대장균 RR1, 대장균 Y1088, 대장균 Y1089, 대장균 CSH18, 대장균 ER1451, 대장균 ER1647, 대장균 NovaBlue, 대장균 DH5α, 대장균 K12 RV308, 대장균 K12 C600, 대장균 K-12, 대장균 MG1655, 대장균 HB101, 및 대장균 XL1-blue로 구성된 군에서 선택된 균주인 것을 특징으로 하는 재조합 미생물을 이용한 천연고무의 생산 방법
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제1항에 있어서,상기 숙주 미생물인 대장균은 대장균 XL1-blue 균주인 것을 특징으로 하는 재조합 미생물을 이용한 천연고무의 생산 방법
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(a) 서열번호 2의 아미노산 서열로 특정되는 민들레 유래 또는 서열번호 6의 아미노산 서열로 특정되는 고무나무 유래 천연고무 합성 효소인 시스-프레닐트랜스퍼라제를 암호화하는 유전자와 서열번호 4의 아미노산 서열로 특정되는 대장균 유래 UDP 피로인산 신타아제를 암호화하는 유전자를 발현시킬 수 있는 발현벡터를 제작하는 단계, (b) 상기 발현벡터를 숙주 미생물인 대장균에 형질전환시키는 단계, (c) 상기 형질전환된 숙주 미생물인 대장균을 배양하는 단계, 및 (d) 그 배양된 형질전환 숙주 미생물인 대장균으로부터 천연고무를 분리하는 단계를 포함하는 재조합 미생물을 이용한 천연고무의 생산 방법
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제10항에 있어서,상기 발현벡터는 서열번호 8의 아미노산 서열로 특정되는 대장균 유래 이소펜테닐2인산 이소머라아제를 암호화하는 유전자를 추가로 발현시킬 수 있는 발현벡터인 것을 특징으로 하는 재조합 미생물을 이용한 천연고무의 생산 방법
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제10항에 있어서,상기 숙주 미생물인 대장균은 대장균 W3110, 대장균 BL21, 대장균 BL21(DE3), 대장균 DH1, 대장균 DH4I, 대장균 DH5, 대장균 DH5I, 대장균 DH5IF', 대장균 DH5IMCR, 대장균 DH10B, 대장균 DHIOB/p3, 대장균 DH1 IS, 대장균 C600, 대장균 HB101, 대장균 JM101, 대장균 JM105, 대장균 JM109, 대장균 JM110, 대장균 K38, 대장균 RR1, 대장균 Y1088, 대장균 Y1089, 대장균 CSH18, 대장균 ER1451, 대장균 ER1647, 대장균 NovaBlue, 대장균 DH5α, 대장균 K12 RV308, 대장균 K12 C600, 대장균 K-12, 대장균 MG1655, 대장균 HB101, 및 대장균 XL1-blue로 구성된 군에서 선택된 균주인 것을 특징으로 하는 재조합 미생물을 이용한 천연고무의 생산 방법
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(i) 서열번호 2의 아미노산 서열로 특정되는 민들레 유래 또는 서열번호 6의 아미노산 서열로 특정되는 고무나무 유래 천연고무 합성 효소인 시스-프레닐트랜스퍼라제를 암호화하는 유전자와 (ii) 서열번호 4로 특정되는 대장균 유래 천연고무 전구체 합성 효소인 UDP 피로인산 신타아제를 암호화하는 유전자가 발현되도록, 상기 시스-프레닐트랜스퍼라제 유전자 및 상기 UDP 피로인산 신타아제 유전자로 형질전환된 재조합 미생물인 대장균
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제13항에 있어서,상기 재조합 미생물인 대장균은 서열번호 8의 아미노산 서열로 특정되는 대장균 유래 이소펜테닐2인산 이소머라아제를 암호화하는 유전자가 추가로 발현되도록 그 유전자로 추가로 형질전환된 재조합 미생물인 대장균
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제13항에 있어서,상기 재조합 미생물인 대장균은 대장균 W3110, 대장균 BL21, 대장균 BL21(DE3), 대장균 DH1, 대장균 DH4I, 대장균 DH5, 대장균 DH5I, 대장균 DH5IF', 대장균 DH5IMCR, 대장균 DH10B, 대장균 DHIOB/p3, 대장균 DH1 IS, 대장균 C600, 대장균 HB101, 대장균 JM101, 대장균 JM105, 대장균 JM109, 대장균 JM110, 대장균 K38, 대장균 RR1, 대장균 Y1088, 대장균 Y1089, 대장균 CSH18, 대장균 ER1451, 대장균 ER1647, 대장균 NovaBlue, 대장균 DH5α, 대장균 K12 RV308, 대장균 K12 C600, 대장균 K-12, 대장균 MG1655, 대장균 HB101, 및 대장균 XL1-blue로 구성된 군에서 선택된 균주인 것을 특징으로 하는 재조합 미생물인 대장균
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