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레반 과당전이효소 (levan fructotransferase)를 코딩하는 핵산, 및 세포 외로 단백질을 분비시키는 단백질 분비 융합 인자 (Translational fusion partner, TFP)를 코딩하는 핵산을 포함하는, 레반 과당전이효소 분비 발현 카세트로서,상기 단백질 분비 융합 인자는 서열번호 17의 TFP9, 서열번호 21의 TFP13 또는 서열번호 27의 TFP19인, 분비 발현 카세트
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제1항에 있어서, 상기 레반 과당전이효소는 아쓰로박터 우레아파시엔스 (Arthrobacter ureafaciens) 유래인 것인, 분비 발현 카세트
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제1항에 있어서, 상기 레반 과당전이효소는 서열번호 8의 아미노산 서열로 이루어진 것인, 분비 발현 카세트
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삭제
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제1항에 있어서, 상기 레반 과당전이효소를 코딩하는 핵산 및 단백질 분비 융합 인자를 코딩하는 핵산은 링커로 서로 연결된 것인, 분비 발현 카세트
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제6항에 있어서, 상기 링커는 프로테아제 인식 서열 또는 친화성 태그를 포함하는 것인, 분비 발현 카세트
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제1항에 있어서, 상기 레반 과당전이효소는 친화성 태그를 추가로 포함하는 것인, 분비 발현 카세트
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제8항에 있어서, 상기 친화성 태그는 GST, MBP, NusA, 티오레독신 (thioredoxin), 유비퀴틴, FLAG, BAP, HIS, STREP, CBP, CBD, 및 S-태그로 이루어진 그룹에서 선택되는 것인, 분비 발현 카세트
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제1항 내지 제3항 및 제6항 내지 제9항 중 어느 한 항의 레반 과당전이효소 분비 발현 카세트를 포함하는, 벡터
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레반 과당전이효소 (levan fructotransferase)를 코딩하는 핵산, 및 세포 외로 단백질을 분비시키는 단백질 분비 융합 인자(Translational fusion partner, TFP)를 코딩하는 핵산을 포함하는, 레반 과당전이효소 분비 발현 카세트를 함유하는, 재조합 미생물로서,상기 단백질 분비 융합 인자는 서열번호 17의 TFP9, 서열번호 21의 TFP13 또는 서열번호 27의 TFP19인, 재조합 미생물
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제11항에 있어서, 상기 재조합 미생물은 효모인 것인, 미생물
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제12항에 있어서, 상기 효모는 캔디다 (Candida), 디베리오마이세스 (Debaryomyces), 한세눌라 (Hansenula), 클루이베로마이세스 (Kluyveromyces), 피키아 (Pichia), 스키조사카로마이세스 (Schizosaccharomyces), 야로이야 (Yarrowia), 사카로마이시스 (Saccharomyces), 슈완니오마이세스 (Schwanniomyces) 및 아르술라 (Arxula) 속으로 이루어진 그룹에서 선택되는 것인, 미생물
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제12항에 있어서, 상기 효모는 캔디다 유틸리스 (Candida utilis), 캔디다 보이디니 (Candida boidinii), 캔디다 알비칸스 (Candida albicans), 클루이베로마이세스 락티스 (Kluyveromyces lactis), 피키아 파스토리스 (Pichia pastoris), 피키아 스티피티스 (Pichia stipitis), 스키조사카로마이세스 폼베 (Schizosaccharomyces pombe), 사카로마이시스 세레비지에 (Saccharomyces cerevisiae), 한세눌라 폴리모르파 (Hansenula polymorpha), 야로이야 리폴리티카 (Yarrowia lipolytica), 슈완니오마이세스 옥시덴탈리스 (Schwanniomyces occidentalis) 및 아르술라 아데니니보란스 (Arxula adeninivorans)로 이루어진 그룹에서 선택되는 것인, 미생물
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(i) 제11항의 재조합 미생물을 배양하는 단계; 및(ii) 상기 배양된 미생물 또는 이의 배양 상등액으로부터 레반 과당전이효소를 회수하는 단계를 포함하는, 레반 과당전이효소 (levan fructotransferase)의 제조방법
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제11항의 재조합 미생물 또는 제15항의 방법으로 제조된 레반 과당전이효소를 레반과 반응시키는 단계를 포함하는, 디프럭토스 언하이드리드 IV (difructose anhydride IV)의 제조방법
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제16항에 있어서, 상기 반응은 pH 3
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제16항에 있어서, 상기 반응은 1 ℃ 내지 70 ℃에서 수행되는 것인, 제조방법
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제16항에 있어서,상기 레반과 반응시키는 단계는 재조합 미생물을 레반을 포함하는 배지에서 발효시키는 것을 포함하는 것인, 디프럭토스 언하이드리드 IV의 제조방법
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