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산란 강도, 국소 표면 플라즈몬 공명 및 표면 증강 라만 산란을 이용한 단일 분자에서의 RNA 스플라이싱을 검지하는 광학 현미경(Optical Microscopy for RNA Splicing on Single Molecules Using Scattering Intensity, Localized Surface Plasmon Resonance and Surface-Enhanced Raman Scattering)

  • 기술번호 : KST2017007960
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 단일 분자에서의 RNA 스플라이싱을 검지하는 광학 현미경에 관한 것으로, 보다 상세하게는 산란 강도, 국소 표면 플라즈몬 공명 및 표면 증강 라만 산란을 검출함으로써, 단일 분자에서의 RNA 스플라이싱을 검지하는 광학 현미경에 관한 것이다. 본 발명에 따른 단일 입자에서의 RNA 스플라이싱을 검지할 수 있는 광학 현미경은 높은 감도, 시간 단축 및 저비용으로 인해, RNA 스플라이싱 스크리닝용 약물과 마이크로 RNA의 결합과 같은 여러 스플라이싱을 연구하는 플랫폼으로 유용하다.
Int. CL G02B 21/36 (2016.01.05) G02B 21/08 (2016.01.05)
CPC G02B 21/361(2013.01) G02B 21/361(2013.01) G02B 21/361(2013.01) G02B 21/361(2013.01) G02B 21/361(2013.01) G02B 21/361(2013.01) G02B 21/361(2013.01) G02B 21/361(2013.01) G02B 21/361(2013.01) G02B 21/361(2013.01) G02B 21/361(2013.01)
출원번호/일자 1020150159320 (2015.11.13)
출원인 고려대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2017-0056132 (2017.05.23) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2015.11.13)
심사청구항수 26

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 고려대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 성북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 심상준 대한민국 서울특별시 강남구
2 원훙안 베트남 서울특별시 성북구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 장제환 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)
2 이처영 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 고려대학교 산학협력단 서울특별시 성북구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2015.11.13 수리 (Accepted) 1-1-2015-1105973-17
2 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2016.10.31 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0782859-13
3 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2016.12.08 수리 (Accepted) 1-1-2016-1203885-19
4 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2016.12.08 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2016-1203886-54
5 등록결정서
Decision to grant
2017.05.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0376744-49
6 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.10.10 수리 (Accepted) 4-1-2019-5210941-09
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
다음을 포함하는 단일분자에서 RNA 스플라이싱 검지용 광학 현미경:(a) 암시야 콘덴서; (b) 스펙트럼 그래프용 분광기; (c) 신호처리용 CCD 카메라; (d) 레일리 산란용 할로겐 또는 제논의 백색 광원; (e) 표면 증강 라만 산란(SERS) 신호 검출용 레이저 소스; 및 (f) RNA 스플라이싱 분석용 반응 챔버
2 2
제1항에 있어서, 상기 반응 챔버는 전령 RNA 전구체 포획을 위한 비오틴-DNA 프로브가 수직 방향으로 고정된 스트렙타비딘 분자가 코팅되어 있는 것을 특징으로 하는 단일분자에서 RNA 스플라이싱 검지용 광학 현미경
3 3
제1항에 있어서, 상기 반응 챔버는 표면 증강 라만 산란(SERS) 신호 검출용 플라즈몬 나노입자-프로브 혼합물을 함유하는 것을 특징으로 하는 단일분자에서 RNA 스플라이싱 검지용 광학 현미경
4 4
제3항에 있어서, 상기 플라즈몬 나노입자는 금, 은, 백금 및 구리 나노입자로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 단일분자에서 RNA 스플라이싱 검지용 광학 현미경
5 5
제4항에 있어서, 상기 플라즈몬 나노입자는 안정제를 추가로 함유하는 것을 특징으로 하는 단일분자에서 RNA 스플라이싱 검지용 광학 현미경
6 6
제5항에 있어서, 상기 플라즈몬 나노입자와 안정제는 티올기가 직접 결합하는 것을 특징으로 하는 단일분자에서 RNA 스플라이싱 검지용 광학 현미경
7 7
제5항에 있어서, 상기 안정제는 티올폴리에틸렌글리콜(PEG), 폴리에틸렌글리콜(PEG) 유도체, 티올올리고에틸렌글리콜, 세틸트리메틸암모늄브로마이드 및 폴리스티렌술폰산으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 단일분자에서 RNA 스플라이싱 검지용 광학 현미경
8 8
제3항에 있어서, 상기 플라즈몬 나노입자-프로브는 RNA 스플라이싱 후, 1~80nm의 공간 분리를 갖는 것을 특징으로 하는 단일분자에서 RNA 스플라이싱 검지용 광학 현미경
9 9
제3항에 있어서, 상기 플라즈몬 나노입자-프로브는 전령 RNA 전구체 분자의 수에 따라 2~100개 이상의 나노입자를 포함하는 것을 특징으로 하는 단일분자에서 RNA 스플라이싱 검지용 광학 현미경
10 10
제1항에 있어서, 상기 RNA 스플라이싱 분석은 나노입자 결합 패턴을 포함하는 레일리 산란의 국소 표면 플라즈몬 공명 방법, 적어도 하나 이상의 나노입자와의 일차원 결합 패턴을 포함하는 산란 강도의 방법 및 전자기 표면 증강 패턴을 형성하는 표면 증강 라만 산란(SERS)-태그 프로브와 나노입자 결합의 표면 증강 라만 산란(SERS) 방법으로 구성된 군에서 선택되는 방법으로 수행하는 것을 특징으로 하는 단일분자에서 RNA 스플라이싱 검지용 광학 현미경
11 11
제10항에 있어서, 상기 패턴들은 전령 RNA 전구체 분자의 인트론 수에 따른 나노입자를 포함하는 프로브의 결합 패턴인 것을 특징으로 하는 단일분자에서 RNA 스플라이싱 검지용 광학 현미경
12 12
제10항에 있어서, 상기 표면 증강 라만 산란(SERS)-태그 프로브는 라만 다이(Raman dye)가 태그된 것을 특징으로 하는 단일분자에서 RNA 스플라이싱 검지용 광학 현미경
13 13
제12항에 있어서, 상기 라만 다이(Raman dye)는 시아닌-3(Cyanine-3), 시아닌-5(Cyanine-5), 시아닌-5
14 14
제10항에 있어서, 상기 레일리 산란의 국소 표면 플라즈몬 공명, 산란 강도 및 표면 증강 라만 산란(SERS)은 챔버의 고체상 또는 용액상에서 발생하는 것을 특징으로 하는 단일분자에서 RNA 스플라이싱 검지용 광학 현미경
15 15
다음 단계를 포함하는 RNA 스플라이싱의 검출 및 모니터링 방법:(a) 표적 유전자를 발현 벡터에 클로닝하고 세포, 조직 또는 인간을 제외한 생체 내로 벡터를 형질전환시켜, 재조합 표적 전령 RNA 전구체의 전사체를 생성하는 단계;(b) 플라즈몬 프로브 또는 표면 증강 라만 산란(SERS)-태그 프로브를 상기 재조합 표적 전령 RNA 전구체의 전사체와 반응시키거나, 직접 세포, 조직 또는 인간을 제외한 생체 내로 도입시켜, 상기 플라즈몬 프로브 또는 표면 증강 라만 산란(SERS)-태그 프로브를 전령 RNA 전구체의 엑손/인트론 및 인트론/엑손의 경계에 부착시키는 단계; 및(c) 제1항의 광학 현미경을 통해 산란 강도, 레일리 산란의 국소 표면 플라즈몬 공명 및 표면 증강 라만 산란을 측정하여, RNA 스플라이싱을 검출하는 단계
16 16
제15항에 있어서, 상기 (b) 단계는 인-비트로(in vitro) 또는 인-비보(in vivo)에서 수행하는 것을 특징으로 하는 RNA 스플라이싱의 검출 및 모니터링 방법
17 17
제15항에 있어서, 상기 표면 증강 라만 산란(SERS)-태그 프로브는 라만 다이(Raman dye)가 태그된 것을 특징으로 하는 RNA 스플라이싱의 검출 및 모니터링 방법
18 18
제17항에 있어서, 상기 라만 다이(Raman dye)는 시아닌-3(Cyanine-3), 시아닌-5(Cyanine-5), 시아닌-5
19 19
제15항에 있어서, 상기 플라즈몬 프로브는 RNA 분자에 병렬로 결합하는 것을 특징으로 하는 RNA 스플라이싱의 검출 및 모니터링 방법
20 20
제19항에 있어서, 상기 플라즈몬 프로브는 표적 유전자 전령 RNA 전구체 서열과 50~100%의 상동성을 갖는 것을 특징으로 하는 RNA 스플라이싱의 검출 및 모니터링 방법
21 21
제15항에 있어서, 상기 전령 RNA 전구체는 전령 RNA 전구체, 마이크로 RNA 전구체, hnRNA, rRNA, tRNA 및 viral RNA로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 RNA 스플라이싱의 검출 및 모니터링 방법
22 22
제15항에 있어서, 상기 RNA 스플라이싱은 엑손 옆에 적어도 하나 이상의 인트론을 함유하고 있는 전령 RNA 전구체 분자 또는 프리-마이크로 RNA에서 인트론이 제거되는 것을 특징으로 하는 RNA 스플라이싱의 검출 및 모니터링 방법
23 23
제22항에 있어서, 상기 인트론의 제거는 스플라이세오솜(spliceosom)의 절단 메커니즘에 의해 수행되는 것을 특징으로 하는 RNA 스플라이싱의 검출 및 모니터링 방법
24 24
제15항에 있어서, 상기 세포는 원핵세포, 진핵세포, 정상세포 및 암세포로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 RNA 스플라이싱의 검출 및 모니터링 방법
25 25
제15항에 있어서, 상기 RNA 스플라이싱은 나노입자를 이용한 전령 RNA 전구체의 동력학 모니터링에 의해 수행되는 것을 특징으로 하는 RNA 스플라이싱의 검출 및 모니터링 방법
26 26
제25항에 있어서, 상기 나노입자는 금, 은, 백금 및 구리로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 RNA 스플라이싱의 검출 및 모니터링 방법
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