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숙주세포의 내인성 증폭 가능 유전자의 mRNA의 3'-UTR을 표적으로 하여 상기 내인성 증폭 가능 유전자의 발현을 감소시키는 RNA 간섭을 위한 유전자 절편; 및 목적 단백질의 유전자를 클로닝할 수 있는 클로닝 자리와 외인성 증폭 가능 유전자를 포함하는 유전자 컨스트럭트;를 포함하고,상기 내인성 증폭 가능 유전자와 상기 외인성 증폭 가능 유전자는 동일한 유전자이며,상기 증폭 가능 유전자는 디히드로엽산 환원효소(dihydrofolate reductase, DHFR)이고,상기 RNA 간섭을 위한 유전자 절편은 서열번호 2의 염기 서열을 포함하는 짧은 헤어핀 RNA(short-hairpin RNA, shRNA)인, 목적 단백질 생산을 위한 발현 벡터
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청구항 1에 있어서,상기 RNA 간섭을 위한 유전자 절편은 증폭 가능 유전자의 mRNA의 3'-UTR에 상보적인 염기 서열인 발현 벡터
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청구항 1에 있어서,상기 유전자 컨스트럭트에는 상기 클로닝 자리와 상기 외인성 증폭 가능 유전자 사이에 내부 리보솜 유입 자리(IRES), 2A 펩티드를 암호화하는 염기 서열, 및 외인성 증폭 가능 유전자의 발현을 개시할 수 있는 프로모터로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나가 포함되어 있는 발현 벡터
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청구항 5에 있어서,상기 외인성 증폭 가능 유전자의 발현을 개시할 수 있는 프로모터는 시미안 바이러스 40 초기 프로모터, 마우스 유선암 바이러스 LTR 프로모터, 사이토메갈로바이러스 Pol-II 프로모터, 헤르페스 티미딘 키나제 프로모터 및 포스포글리세레이트 키나제 I(PGK) 프로모터로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 프로모터인 발현 벡터
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청구항 1에 있어서,상기 숙주세포는 포유동물 세포인 발현 벡터
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청구항 7에 있어서,상기 포유동물 세포는 COS 세포, CHO 세포, VERO 세포, MDCK 세포, WI38 세포, V79 세포, B14AF28-G3 세포, BHK 세포, HaK 세포, NS0 세포, SP2/0-Ag14 세포, HeLa 세포, HEK293 세포 및 PER
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청구항 1, 3 및 5 내지 청구항 8 중 어느 한 항의 발현 벡터를 포함하는 형질전환체
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청구항 1의 발현 벡터의 유전자 컨스트럭트 중 클로닝 자리에 목적 단백질의 유전자를 클로닝하는 단계;상기 목적 단백질의 유전자가 클로닝된 발현 벡터를 숙주세포에 도입하는 단계; 상기 발현 벡터가 도입된 숙주세포를 배양하는 단계; 및상기 배양 중인 숙주세포에 증폭 가능 유전자에 의하여 발현되는 단백질에 대한 억제제를 처리하는 단계;를 포함하는 목적 단백질의 과발현 방법
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청구항 10에 있어서,숙주세포는 COS 세포, CHO 세포, VERO 세포, MDCK 세포, WI38 세포, V79 세포, B14AF28-G3 세포, BHK 세포, HaK 세포, NS0 세포, SP2/0-Ag14 세포, HeLa 세포, HEK293 세포 및 PER
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청구항 10에 있어서,상기 증폭 가능 유전자에 의해 발현되는 단백질에 대한 억제제는 메토트렉세이트(methotrexate, MTX)인 목적 단백질의 과발현 방법
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