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a) 건조감자유세포를 개별 감자유세포로 분산시키는 단계; b) 감자유세포 분산물을 반응용액과 알파글루칸합성효소를 혼합하여 효소반응시키는 단계; c) 알파글루칸합성효소 처리된 효소반응 혼합물로부터 알파글루칸으로 코팅된 감자유세포를 회수하는 단계; 및d) 상기 c) 단계에 의해 얻어진 코팅된 감자유세포들을 건조하여 난소화성 건조감자유세포 소재를 제조하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는,효소적 알파글루칸 코팅에 의한 난소화성 건조감자유세포 소재의 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 a) 단계는, a-1) 건조감자유세포에 정제수를 가하여 수화시키는 단계; 및 a-2) 상기 a-1) 단계에서 수화시킨 건조감자유세포를 진탕 또는 교반하여 개발 감자유세포로 분리하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는,효소적 알파글루칸 코팅에 의한 난소화성 건조감자유세포 소재의 제조방법
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제2항에 있어서, 상기 a-1) 단계는, 건조감자유세포의 중량대비 5 - 15배의 정제수를 가하여 상온에서 10 - 30분간 수화시키고, 상기 a-2) 단계는, 상기 a-1) 단계에서 수화시킨 건조감자유세포를 효소반응온도에서 10 - 60분 동안 100 - 200 stroke/min으로 진탕하거나, 50-150rpm의 속도로 교반하여 개별 감자유세포로 분리하는 것을 특징으로 하는, 효소적 알파글루칸 코팅에 의한 난소화성 건조감자유세포 소재의 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 b) 단계는, b-1) 자당 용액을 제조하여 개별 감자유세포 분산물에 자당 용액을 가하는 단계; b-2) pH 7
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제4항에 있어서, 상기 b-1) 단계는, 2M의 자당 용액을 제조하여, 상기 a) 단계에서 제조된 개별 감자유세포 분산물에 0
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제4항에 있어서, 상기 b-2) 단계는, 500mM 트리스-염산 완충용액을 제조하여 pH 7
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제4항에 있어서,상기 b-3) 단계는, 상기 b-2) 단계에서 제조된 개별 감자유세포, 자당 용액과 트리스-염산 완충용액의 혼합물 내의 감자유세포의 농도가 2
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제4항에 있어서,상기 b-4) 단계는, 상기 b-3) 단계에서 제조된 반응혼합물을 알파글루칸합성효소의 최적 반응온도 33 - 37℃로 가열한 후 나이세리아 폴리사카리아의 배양액으로부터 얻은 알파글루칸합성효소 용액을 반응혼합물에 알파글루칸합성효소가 30 - 3,000U이 되도록 가한 후 33 - 37℃에서 50 - 150rpm으로 교반하면서 24 - 72시간 동안 효소반응을 시키는 것을 특징으로 하는, 효소적 알파글루칸 코팅에 의한 난소화성 건조감자유세포 소재의 제조방법
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제8항에 있어서, 상기 c) 단계는, c-1) 상기 b-4) 단계에서 알파글루칸합성효소 처리된 감자유세포 혼합물들을 140메쉬 표준체망을 통과시켜 알파글루칸으로 코팅된 감자유세포를 회수하는 단계; 및c-2) 상기 c-1) 단계에서 회수된 알파글루칸 코팅 감자유세포를 세척하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 효소적 알파글루칸 코팅에 의한 난소화성 건조감자유세포 소재의 제조방법
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제9항에 있어서, 상기 c-2) 단계는, 상기 c-1) 단계에서 140메쉬 표준체망을 이용하여 회수한 알파글루칸 코팅 감자유세포를 표준체망 위에서 흐르는 물을 이용하여 10분 동안 세척하여 깨진 감자유세포 세포막 파편들, 감자전분, 알파글루칸을 제거하여 알파글루칸 코팅 감자유세포를 얻는 1차 세척단계; 및상기 세척 단계에서 얻은 알파글루칸 코팅 감자유세포를 비이커로 옮겨 알파글루칸 코팅 감자유세포의 중량대비 5배의 정제수를 가하고, 10분간 교반한 후 5분간 정치시켜 상등액을 제거하는 2차 세척단계를 더 포함하는 것을 특징으로 ㅎ하는, 효소적 알파글루칸 코팅에 의한 난소화성 건조감자유세포 소재의 제조방법
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제10항에 있어서, 상기 c-2) 단계는,1차 세척단계와 2차 세척단계를 2-5회 반복하여 알파글루칸합성효소반응의 부산물인 올리고당, 과당 및 포도당 잔류물을 제거하는 것을 특징으로 하는, 효소적 알파글루칸 코팅에 의한 난소화성 건조감자유세포 소재의 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 d) 단계는, 상기 c) 단계로부터 얻어진 알파글루칸 코팅 감자유세포들의 중량대비 3배의 무수에탄올에서 10분간 탈수한 후 140메쉬 표준체망으로 회수하여 45℃의 열풍건조기에서 수분함량 8 - 12%로 건조하는 것을 특징으로 하는, 효소적 알파글루칸 코팅에 의한 난소화성 건조감자유세포 소재의 제조방법
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제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 효소적 알파글루칸 코팅에 의한 난소화성 건조감자유세포 소재의 제조방법으로 제조된 것을 특징으로 하는, 효소적 알파글루칸 코팅에 의한 난소화성 건조감자유세포 소재
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