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(a) 표적 미생물의 유전자에 특이적으로 혼성화되고, 제1 표지물질이 결합된 제1 프라이머 및 제2 표지물질 이 결합된 제2 프라이머 를 제조하는 단계;(b) 상기 제1 프라이머 및 제2 프라이머를 이용하여 중합효소연쇄반응(Polymerase chain reaction, PCR)을 수행하는 단계; 및(c) 상기 중합효소연쇄반응에 의해 증폭된 핵산서열에 특이적으로 결합하는 프로브(probe)를 이용하여 면역분석법(immunoassay)을 수행하는 단계;를 포함하는 미생물 검출 방법
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제1항에 있어서, 상기 (b) 단계 이후, 상기 (c) 단계 이전에 상기 중합효소연쇄반응 결과물에 상기 제1 프라이머의 안티센스 올리고머, 상기 제2 프라이머의 안티센스 올리고머, 또는 S1 핵산가수분해효소(S1 nuclease)를 반응시키는 단계;를 더 포함하는 미생물 검출 방법
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제1항에 있어서,상기 (a) 단계에서 상기 제1 프라이머 및 상기 제2 프라이머는 3’ 말단, 5' 말단 또는 소정의 위치에 표지물질이 결합된 미생물 검출 방법
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제1항에 있어서,상기 (a) 단계에서 상기 표지물질은 비오틴(biotin), 디곡시게닌(digoxigenin), 디니트로페놀(dinitrophenol), 아미노아세틸플루오렌(aminoacetylfluorene), 설포네이트, FITC(Fluorescein isothiocyanate), 로다민(rhodamine), 아미노메틸쿠아민(aminomethylcoumarin), FAM(Carboxyl fluorescein-aminohexyl-amidite), TAMRA(Tetramethyl-6-Carboxyrhodamine) 및 시아닌(Cyanine)으로 이루어진 군에서 하나 이상 선택된 미생물 검출 방법
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제1항에 있어서, 상기 (c) 단계에서 상기 프로브 는 상기 제1 표지물질과 특이적으로 결합하는 반응물질, 및 발색입자를 포함하는 미생물 검출 방법
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제5항에 있어서, 상기 발색입자는 라텍스 입자, 금 입자, 유색 폴리스티렌 미세입자, 효소, 형광성 염료, 전도성 고분자 및 자성입자로 이루어진 군으로부터 하나 이상 선택되는 미생물 검출 방법
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제1항에 있어서, 상기 (c) 단계는 상기 중합효소연쇄반응 결과물을 상기 제1 표지물질과 특이적으로 결합하는 프로브 및 항-제2 표지물질 항체가 고정된 반응막(test membrane)에 확산시키는 단계; 및 상기 프로브의 발색 반응을 통해 미생물의 존부를 판단하는 단계;를 포함하는 미생물 검출 방법
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표적 미생물의 유전자에 특이적으로 혼성화되고, 제1 표지물질이 결합된 제1 프라이머 및 제2 표지물질이 결합된 제2 프라이머를 포함하는 제1 용액; 및미생물 시료를 적하하는 검체패드(sample pad), 프로브를 포함하는 축합패드(conjugation pad), 및 검사선(test line)이 형성된 반응막(test membrane)이 순차적으로 배열된 진단 스트립;을 포함하는 미생물 검출 키트
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제8항에 있어서, 상기 제1 프라이머의 안티센스 올리고머, 상기 제2 프라이머의 안티센스 올리고머, 또는 S1 핵산가수분해효소(S1 nuclease)를 포함하는 제2 용액을 더 포함하는 미생물 검출 키트
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10
제8항에 있어서, 상기 프로브는 상기 제1 표지물질과 특이적으로 결합하는 반응물질, 및 발색입자를 포함하는 미생물 검출 키트
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제10항에 있어서, 상기 발색입자는 라텍스 입자, 금 입자, 유색 폴리스티렌 미세입자, 효소, 형광성 염료, 전도성 고분자 및 자성입자로 이루어진 군으로부터 하나 이상 선택되는 미생물 검출 키트
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제8항에 있어서, 상기 검사선은 항-제2 표지물질 항체가 고정화된 미생물 검출 키트
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제8항에 있어서, 상기 반응막(test membrane)은 상기 제1 표지물질 및 상기 제2 표지물질과 특이적으로 반응하지 않는 제2 항체가 고정화된 대조선(control line)을 더 포함하는 미생물 검출 키트
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