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항균 펩타이드를 포함하는 불용성 융합단백질 및 이를 이용한 항균 펩타이드의 제조 방법(METHOD FOR PRODUCING ANTIMICROBIAL PEPTIDE USING INSOLUBLE FUSION PROTEIN CONTAINING ANTIMICROBIAL PEPTIDE)

  • 기술번호 : KST2017012788
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 항균 펩타이드의 제조방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 항균 펩타이드 유전자를 대장균 내에서 불용성으로 발현되는 녹색형광단백질 유전자와 융합시켜 대장균에 도입 및 발현시킨 후 녹색형광단백질을 제거하고 항균 펩타이드를 수득하는 과정을 통하여 항균 펩타이드를 대량으로 제조하는 방법을 포함한다.상기와 같은 본 발명에 따르면, 제조공정이 간단하고 경제적이며 생산 수율이 높은 항균 펩타이드의 제조방법을 제공함으로써, 다중약물내성 미생물이 급증하고 있어, 이들 내성 균주를 퇴치할 수 있는 새로운 작용 메커니즘을 가지는 항생제의 개발이 시급한 제약 및 사료 산업에 기존의 항생제를 대체할 천연 항생제를 제공하는 효과가 있다.또한 본 발명에 따르면, 기존의 시안화브롬을 이용하는 대신 산처리를 통해 아미노산을 절단하는 방법을 이용함으로써 불용성 단백질로부터 목적 단백질을 정제하는 데 있어 비용을 절감하고 공정의 위험성을 낮추며 더욱 신속하게 진행할 수 있는 효과가 있다.
Int. CL C07K 14/195 (2016.03.04) C07K 14/37 (2016.03.04) C12N 15/62 (2016.03.04) C12N 15/70 (2016.03.04)
CPC C07K 14/195(2013.01) C07K 14/195(2013.01) C07K 14/195(2013.01) C07K 14/195(2013.01) C07K 14/195(2013.01)
출원번호/일자 1020160009970 (2016.01.27)
출원인 건국대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2017-0089583 (2017.08.04) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2016.01.27)
심사청구항수 15

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 건국대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 광진구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 박찬규 대한민국 서울특별시 노원구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 김정수 대한민국 서울시 송파구 올림픽로 ***(방이동) *층(이수국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 건국대학교 산학협력단 서울특별시 광진구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2016.01.27 수리 (Accepted) 1-1-2016-0089704-98
2 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2017.04.28 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0306324-13
3 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2017.06.27 수리 (Accepted) 1-1-2017-0614663-19
4 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2017.07.13 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2017-0669659-14
5 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2017.07.13 수리 (Accepted) 1-1-2017-0669658-68
6 등록결정서
Decision to grant		 2017.11.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0824840-66
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번호 청구항
1 1
산처리를 통해 절단되어 활성화될 수 있는 항균 펩타이드(Antimicrobial peptide, AMP)로서, 연속적으로 배열되며, 상기 항균 펩타이드의 N-말단, C-말단 또는 이들의 연결부에 Asp-Pro 아미노산 서열이 연결되는 항균 펩타이드가, 메티오닌이 결실되고 76번째 및 204번째 아스파트산(D76, D204) 위치가 세린(Ser, S)으로 치환된 녹색형광단백질(Green Fluorescent protein, GFP)의 아미노산 서열 172번과 173번 사이에 삽입되어 결합된 불용성 융합단백질
2 2
제 1 항에 있어서,상기 산처리가 HCl을 투입하여 수행되는 것을 특징으로 하는 불용성 융합단백질
3 3
삭제
4 4
제 1 항에 있어서,상기 연속적으로 배열된 항균 펩타이드가 3카피(copies)로 존재하는 것을 특징으로 하는 불용성 융합단백질
5 5
제 1 항에 있어서,상기 Asp-Pro 아미노산 서열이 산처리를 통해 절단되는 것을 특징으로 하는 불용성 융합단백질
6 6
서열번호 24로 기재되는 아미노산 서열을 포함하는 불용성 융합단백질
7 7
제 6 항의 불용성 융합단백질을 암호화하는, 서열번호 21로 기재되는 염기서열을 포함하는 유전자
8 8
제7항의 유전자를 포함하는 재조합 발현벡터
9 9
제8항의 재조합 발현벡터를 숙주세포에 도입한 형질전환체
10 10
제 9 항에 있어서,상기 숙주세포가 대장균인 것을 특징으로 하는 형질전환체
11 11
(1) 서열번호 21로 기재되는 염기서열로 재조합된 형질전환체를 배양액에서 배양하는 단계;(2) 상기 배양액으로부터 형질전환체를 회수하는 단계;(3) 형질전환체로부터 단백질을 수득하는 단계; 및(4) 상기 단백질을 산처리하여 항균 펩타이드를 분리하는 단계를 포함하는 항균 펩타이드의 제조 방법
12 12
제 11 항에 있어서,상기 단백질이 응집체(inclusion bodies) 형태로 발현되는 것을 특징으로 하는 제조 방법
13 13
제 11 항에 있어서,상기 항균 펩타이드가 연속적으로 배열되며, 상기 항균 펩타이드들의 N-말단, C-말단 또는 이들의 연결부에 Asp-Pro 아미노산 서열이 연결되는 것을 특징으로 하는 제조 방법
14 14
제 13 항에 있어서,상기 Asp-Pro 아미노산 서열이 산처리를 통해 절단되는 것을 특징으로 하는 제조 방법
15 15
제 14 항에 있어서,상기 산처리가 HCl을 투입하여 수행되는 것을 특징으로 하는 제조 방법
16 16
제 13 항에 있어서,상기 연속적으로 배열된 항균 펩타이드가 3카피로 존재하는 것을 특징으로 하는 제조 방법
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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 CN108779152 CN 중국 FAMILY
2 EP03409685 EP 유럽특허청(EPO) FAMILY
3 WO2017131279 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 CN108779152 CN 중국 DOCDBFAMILY
2 EP3409685 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
3 EP3409685 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
4 WO2017131279 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 농림축산식품부 건국대학교 산학협력단 가축질병대응기술개발 가축의 유해미생물 제어를 위한 항미생물 펩타이드 개발
2 농촌진흥청 건국대학교 산학협력단 국책기술개발 알츠하이머 질환모델 돼지의 후성유전체 연구