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리파아제 (lipase) 활성을 가지는, 수탁번호 KCTC18455P의 캔디다 뷰티리 (Candida butyri) 균주
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서열번호 5, 서열번호 8, 서열번호 10 및 서열번호 92로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열을 가지는, 리파아제
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제3항에 있어서, 상기 리파아제는 서열번호 13, 서열번호 16, 서열번호 18 및 서열번호 93으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 뉴클레오티드 서열로 코딩되는, 리파아제
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제3항 또는 제4항의 리파아제 (lipase)를 코딩하는 핵산 및 단백질 분비 융합 인자 (Translational fusion partner, TFP)를 코딩하는 핵산을 포함하는, 리파아제 분비 발현 카세트
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제5항에 있어서, 상기 단백질 분비 융합 인자는,서열번호 38의 TFP 1, 서열번호 39의 TFP 2, 서열번호 40의 TFP 3, 서열번호 41의 TFP 4, 서열번호 42의 TFP 5, 서열번호 43의 TFP 6, 서열번호 44의 TFP 7, 서열번호 45의 TFP 8, 서열번호 46의 TFP 9, 서열번호 47의 TFP 10, 서열번호 48의 TFP 11, 서열번호 49의 TFP 12, 서열번호 50의 TFP 13, 서열번호 51의 TFP 14, 서열번호 52의 TFP 15, 서열번호 53의 TFP 16, 서열번호 54의 TFP 17, 서열번호 55의 TFP 18, 서열번호 56의 TFP 19, 서열번호 57의 TFP 20, 서열번호 58의 TFP 21, 서열번호 59의 TFP 22, 서열번호 60의 TFP 23, 및 서열번호 61의 TFP 24로 이루어진 군에서 선택되는, 리파아제 분비 발현 카세트
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제5항에 있어서, 상기 리파아제는 서열번호 5의 아마노산 서열을 가지며, 서열번호 48의 TFP 11, 서열번호 50의 TFP 13, 서열번호 56의 TFP 19 또는 서열번호 60의 TFP 23과 연결된 것인, 리파아제 분비 발현 카세트
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제5항에 있어서, 상기 리파아제는 서열번호 8의 아미노산 서열을 가지며, 서열번호 45의 TFP 8, 서열번호 46의 TFP 9, 서열번호 50의 TFP 13 또는 서열번호 56의 TFP 19와 연결된 것인, 리파아제 분비 발현 카세트
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제5항에 있어서, 상기 리파아제는 서열번호 10의 아미노산 서열을 가지며, 서열번호 41의 TFP 4, 서열번호 45의 TFP 8, 서열번호 50의 TFP 13, 서열번호 57의 TFP 20, 서열번호 58의 TFP 21, 서열번호 59의 TFP 22, 서열번호 60의 TFP 23 또는 서열번호 61의 TFP 24와 연결된 것인, 리파아제 분비 발현 카세트
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제5항에 있어서, 상기 리파아제는 서열번호 92의 아미노산 서열을 가지며, 서열번호 45의 TFP 8, 서열번호 46의 TFP 9, 서열번호 50의 TFP 13 또는 서열번호 56의 TFP 19와 연결된 것인, 리파아제 분비 발현 카세트
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제5항에 있어서, 상기 리파아제를 코딩하는 핵산 및 단백질 분비 융합 인자를 코딩하는 핵산은 링커 (linker)로 서로 연결된 것인, 리파아제 분비 발현 카세트
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제11항에 있어서, 상기 링커는 프로테아제 인식 서열 또는 친화성 태그를 코딩하는 핵산을 포함하는 것인, 리파아제 분비 발현 카세트
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제5항에 있어서, 상기 분비 발현 카세트는 리파아제의 카르복시 말단 또는 아미노 말단에 연결되는 친화성 태그를 코딩하는 핵산을 추가로 포함하는 것인, 리파아제 분비 발현 카세트
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제13항에 있어서, 상기 친화성 태그는 GST, MBP, NusA, 티오레독신 (thioredoxin), 유비퀴틴, FLAG, BAP, HIS, STREP, CBP, CBD, 및 S-태그로 이루어진 그룹에서 선택되는 것인, 리파아제 분비 발현 카세트
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제5항의 리파아제 (lipase) 분비 발현 카세트를 포함하는, 벡터
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제3항 또는 제4항의 리파아제 (lipase)를 포함하거나, 또는 상기 리파아제를 코딩하는 핵산 및 단백질 분비 융합 인자를 코딩하는 핵산을 포함하는 리파아제 분비 발현 카세트를 함유하는, 형질전환 미생물
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제16항에 있어서, 상기 형질전환 미생물은 효모인 것인, 형질전환 미생물
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제17항에 있어서, 상기 효모는 캔디다 (Candida), 디베리오마이세스 (Debaryomyces), 한세눌라 (Hansenula), 클루이베로마이세스 (Kluyveromyces), 피키아 (Pichia), 스키조사카로마이세스 (Schizosaccharomyces), 야로이야 (Yarrowia), 사카로마이세스 (Saccharomyces), 슈완니오마이세스 (Schwanniomyces) 및 아르술라 (Arxula) 속으로 이루어진 그룹에서 선택되는 것인, 형질전환 미생물
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제17항에 있어서, 상기 효모는 캔디다 뷰티리 (Candida butyri), 캔디다 유틸리스 (Candida utilis), 캔디다 보이디니 (Candida boidinii), 캔디다 알비칸스 (Candida albicans), 클루이베로마이세스 락티스 (Kluyveromyces lactis), 피키아 파스토리스 (Pichia pastoris), 피키아 스티피티스 (Pichia stipitis), 스키조사카로마이세스 폼베 (Schizosaccharomyces pombe), 사카로마이시스 세레비지에 (Saccharomyces cerevisiae), 한세눌라 폴리모르파 (Hansenula polymorpha), 야로이야 리폴리티카 (Yarrowia lipolytica), 슈완니오마이세스 옥시덴탈리스 (Schwanniomyces occidentalis) 및 아르술라 아데니니보란스 (Arxula adeninivorans)로 이루어진 그룹에서 선택되는 것인, 형질전환 미생물
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(i) 제16항의 형질전환 미생물을 배양하는 단계; 및(ii) 상기 배양된 미생물 또는 이의 배양 상등액으로부터 리파아제 (lipase)를 회수하는 단계를 포함하는, 리파아제의 제조방법
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제3항 또는 제4항의 리파아제 (lipase)를 유지 및 알콜과 반응시키는 단계를 포함하는, 바이오디젤의 제조방법
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