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고소애 단백질체 분석 방법 및 이를 이용한 항균활성 펩타이드의 탐색 방법(method for analysis of mealworm proteome and method for screening of antimicrobial peptides using the same)

  • 기술번호 : KST2017016437
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 고소애(갈색거저리) 단백질체 분석 방법 및 이를 이용한 항균활성 펩타이드(AMPs)의 탐색 방법에 관한 것이다. 더욱 상세하게 본 발명에서는 갈색거저리의 애벌레, 번데기, 성충의 풍부한 단백질원으로부터 유래된 인공 및 천연 펩타이드로부터 생리활성기능을 탐색하고, 특히 항균활성을 가지는 항균 펩타이드(antimicrobial peptides, AMPs)를 예측하여 대량으로 확보하고 그 기능성을 확인하는 방법에 관한 것이다.
Int. CL G01N 33/68 (2016.05.12) A61K 38/17 (2016.05.12) A23L 1/305 (2016.05.12)
CPC G01N 33/6848(2013.01) G01N 33/6848(2013.01) G01N 33/6848(2013.01) G01N 33/6848(2013.01) G01N 33/6848(2013.01)
출원번호/일자 1020160045752 (2016.04.14)
출원인 경남과학기술대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2017-0118295 (2017.10.25) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2016.10.17)
심사청구항수 8

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 경남과학기술대학교 산학협력단 대한민국 경상남도 진주

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김삼웅 대한민국 경상남도 진주
2 김일석 대한민국 경상남도 진주
3 양미라 대한민국 경상남도 진주
4 방우영 대한민국 인천광역시 서구
5 김철욱 대한민국 경상남도 진주
6 김태완 대한민국 경상남도 진주
7 김윤근 대한민국 경상남도 산청군
8 윤철호 대한민국 경상남도 산청군
9 하영술 대한민국 경상남도 진주시
10 윤한극 대한민국 경상남도 산청군
11 송현식 대한민국 전라남도 곡성군
12 이병진 대한민국 경상남도 진주시 강남로

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인이지 대한민국 서울특별시 금천구 가산디지털*로 ***(가산동, KCC웰츠밸리) ***-***

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 경남과학기술대학교 산학협력단 경상남도 진주
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2016.04.14 수리 (Accepted) 1-1-2016-0358230-91
2 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2016.06.21 수리 (Accepted) 4-1-2016-5082864-52
3 [심사청구]심사청구(우선심사신청)서
[Request for Examination] Request for Examination (Request for Preferential Examination)
2016.10.17 수리 (Accepted) 1-1-2016-1004744-12
4 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2017.08.10 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
5 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2017.10.13 수리 (Accepted) 9-1-2017-0033024-02
6 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2017.11.16 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0797809-26
7 [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Agent] Report on Agent (Representative)
2018.01.16 수리 (Accepted) 1-1-2018-0050817-15
8 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2018.01.16 1-1-2018-0050848-20
9 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2018.01.16 수리 (Accepted) 1-1-2018-0050839-19
10 면담 결과 기록서
2018.02.12 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2018-0023829-55
11 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2018.02.19 수리 (Accepted) 1-1-2018-0173523-04
12 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2018.02.19 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2018-0173545-08
13 보정의취하간주안내문
2018.02.21 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2018-0027927-93
14 심사처리보류(연기)보고서
Report of Deferment (Postponement) of Processing of Examination
2018.06.28 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2018-0084063-52
15 등록결정서
Decision to grant
2018.08.24 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0577592-44
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
갈색거저리 시료를 균질화하는 단계;상기 균질화된 시료를 고형분을 제거하기 위해 원심분리하는 단계;상기 원심분리된 상등액을 초여과(ultrafiltration)하여 폴리펩타이드를 수득하는 단계;상기 수득된 폴리펩타이드를 단백질 분해효소로 분해하는 단계; 및상기 분해된 폴리펩타이드를 LC-MS/MS로 분리하여 분석하는 단계를 포함하는 갈색거저리의 단백질체 분석 방법으로,상기 분리된 펩타이드 분석 결과는 다음 중에 적어도 하나를 포함하는, 갈색거저리의 단백질체 분석 방법:상기 갈색거저리의 성체, 번데기 및 애벌레의 모든 형태에서 분석된 단백질은 아르기닌 키나아제 이소폼 X1(arginine kinase isoform X1) 및 프럭토스 비스포스페이트 알도라아제 이소폼 X2(fructose-bisphosphate aldolase isoform X2)에서 선택됨;갈색거저리의 성체 및 애벌레에서 분석된 단백질은 LOC100142319(GenScript, CloneID:OTg04832), ATP 신타아제 서브유닛 알파(ATP synthase subunitalpha,mitochondrial), 시토크롬 c-2(cytochrome c-2), 트로포미오신-2 이소폼 X16(tropomyosin-2 isoform X16), 히트쇽 70kDa 프로테인 코그네이트 2(heat shock 70 kDa protein cognate 2), 아데닐레이트 키나아제 이소엔자임 1-라이크 이소폼 X2(adenylate kinase isoenzyme 1-like isoform X2), 아데닐레이트 키나아제 이소엔자임 1-라이크 이소폼 X1(adenylate kinase isoenzyme 1-like isoform X1), 및 트로포닌 C 이소폼 2(troponin C, isoform 2)에서 선택됨;상기 갈색거저리의 성체 및 번데기에서 분석된 단백질은 프럭토스 비스포스페이트 알도라아제 이소폼 X1(fructose-bisphosphate aldolase isoform X1)임
2 2
제1항에 있어서,상기 초여과하여 수득된 폴리펩타이드는 10kDa 이하의 저분자량이고,상기 단백질 분해효소는 트립신이고, 상기 LC-MS/MS 분석시 트립신으로 분해된 펩타이드는 카바아미도메틸레이션(cabamidomethylation) 및 메티오닌 산화를 참조하여 분석된 방법
3 3
제1항에 있어서,상기 분리된 펩타이드 분석 결과, 갈색거저리 유래 단백질의 개수는 펩타이드 수준(peptide level)에서 150 ~ 200개이고, 단백질 수준에서 10 ~ 25개인 방법
4 4
삭제
5 5
제1항에 있어서, 상기 분리된 펩타이드 분석 결과는 다음 중에 적어도 하나를 포함하는 방법:갈색거저리의 성체, 번데기 및 애벌레에서 분석된 단백질은 51종류임;갈색거저리의 성체, 번데기 및 애벌레의 모든 형태에서 분석된 단백질은 2종류임;갈색거저리의 성체 및 애벌레에서 분석된 단백질은 11종류임;갈색거저리의 성체 및 번데기에서 분석된 단백질은 1종류임;갈색거저리의 애벌레 및 번데기에서 분석된 단백질은 8종류임;갈색거저리의 성체에서만 분석된 단백질은 15종류임;갈색거저리의 애벌레에서만 분석된 단백질은 8종류임; 및갈색거저리의 번데기에서만 분석된 단백질은 6종류임
6 6
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7 7
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8 8
삭제
9 9
제1항에 있어서,상기 갈색거저리의 애벌레 및 번데기에서 분석된 단백질은 케모센서리 프로테인 11 프리커서(chemosensory protein 11 precursor), 글루타치온 S-트랜스퍼라아제(glutathione S-transferase), LOC100142328(NCBI, Gene ID:100142328), 히트쇽 프로테인 18a(heat shock protein 18a), 글루코시다제 2 서브유닛 베타(glucosidase 2 subunit beta), 케모센서리 프로테인 10 프리커서(chemosensory protein 10 precursor), 및 글루타메이트 리셉터 이오노트로픽 카이네이트 2(glutamate receptor ionotropic, kainate 2)에서 선택되는 방법
10 10
제1항에 있어서,상기 갈색거저리의 성체에서만 분석된 단백질은 액틴 릴레이트 프로테인 1(actin related protein 1), 트로포닌 I 이소폼 X11(troponin I isoform X11), 트로포닌 T 스케리탈 머슬 이소폼 X1(troponin T skeletal muscleisoformX1), 시트레이트 신타아제 2(citrate synthase 2, mitochondrial), 말레이트 디히드로게나아제(malate dehydrogenase, mitochondrial), 미토콘드리얼-프로세싱 펩티다아제 서브유닛 베타(mitochondrial-processing peptidase subunitbeta),WD 리피트-컨테이닝 프로테인 78(WD repeat-containing protein 78), 미오신 레귤러토리 라이트 체인 2(myosin regulatory light chain 2), 로-덴서티 리포프로테인 리셉터-릴레이티드 프로테인 4 이소폼 X1(low-density lipoprotein receptor-related protein 4 isoform X1), 리포프로테인 리셉터-릴레이티드 프로테인 4 이소폼 X2(protein receptor-related protein 4 isoform X2), 미오신 헤비 체인 머슬 이소폼 X4(myosin heavy chain, muscleisoformX4), Y-박스 팩터 호몰로그 이소폼 X1(Y-box factor homolog isoform X1), 및 14-3-3 프로테인 엡실론(14-3-3 protein epsilon)에서 선택되는 방법
11 11
제1항에 있어서,상기 갈색거저리 애벌레에서만 분석된 단백질은 트로포닌 T 이소폼 X2(troponin T isoform X2), 아르기닌 키나아제 이소폼 X2(arginine kinase isoform X2), 미오신 헤비 체인 머슬 이소폼 X29(myosin heavy chain, muscleisoformX29), 트로포미오신-2 이소폼 X17(tropomyosin-2, isoforms X17), 알파-케토글루타레이트-디펜던트 디옥시게아제 alkB 호몰로그 6(alpha-ketoglutarate-dependent dioxygenase alkB homolog 6), LOC660354(NCBI, Gene ID:660354) 및 LOC657439(NCBI, Gene ID: 657439)에서 선택되는 방법
12 12
제1항에 있어서,상기 갈색거저리의 번데기에서만 분석된 단백질은 헥사머린 3 프리커서(hexamerin 3 precursor), LOC663390 이소폼 X1(LOC663390 isoform X1), 에놀라아제-포스페이트 E1(enolase-phosphate E1), 구아닌 뉴클레오타이드-바인딩 프로테인 G 서브유닛 알파(guanine nucleotide-binding proteinG(s) subunit alpha), 안지오텐신 컨버팅 엔자임-라이크(angiotensin-converting enzyme-like) 및 아미노아실라아제-1(aminoacylase-1)에서 선택되는 방법
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 교육부 경남과학기술대학교 중점연구소지원사업 녹색성장을 위한 한국양돈의 친환경성 기술개발과 산업화