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브로민화 이티듐(ethidium bromide)이 비표지적으로 도입된 핵산 및 버퍼를 포함하는 기준용액을 준비하고, 제1주입구 및 제2주입구가 구비된 미세유체칩의 제1주입구에 기준용액과 혼합되지 않는 주입유를 주입하면서 제2주입구에 상기 기준용액을 주입하여 미세액적을 형성하고, 기준 형광강도를 측정하는 단계(단계 1);단계 1에서 준비한 기준용액에 핵산가수분해효소를 포함한 시료를 첨가하여 시료용액을 준비하고, 제1주입구 및 제2주입구가 구비된 미세유체칩의 제1주입구에 시료용액과 혼합되지 않는 주입유를 주입하면서 제2주입구에 상기 시료용액을 주입하여 미세액적을 형성하고, 시료 형광강도를 측정하는 단계(단계 2); 및단계 1에서 측정한 기준 형광강도와 단계 2에서 측정한 시료 형광강도를 상대적으로 비교한 수치를 산출하는 단계(단계 3);를 포함하는 상대적 형광강도를 통한 미세액적 내 핵산가수분해효소의 활성 측정방법
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브로민화 이티듐(ethidium bromide)이 비표지적으로 도입된 핵산 및 버퍼를 포함하는 기준용액을 준비하고, 제1주입구 및 제2주입구가 구비된 미세유체칩의 제1주입구에 기준용액과 혼합되지 않는 주입유를 주입하면서 제2주입구에 상기 기준용액을 주입하여 미세액적을 형성하고, 기준 형광편광도를 측정하는 단계(단계 1);단계 1에서 준비한 기준용액에 핵산가수분해효소를 포함한 시료를 첨가하여 시료용액을 준비하고, 제1주입구 및 제2주입구가 구비된 미세유체칩의 제1주입구에 시료용액과 혼합되지 않는 주입유를 주입하면서 제2주입구에 상기 시료용액을 주입하여 미세액적을 형성하고, 시료 형광편광도를 측정하는 단계(단계 2);단계 1에서 측정한 기준 형광편광도와 단계 2에서 측정한 시료 형광편광도를 상대적으로 비교한 수치를 산출하는 단계(단계 3);를 포함하는 상대적 형광편광도를 통한 미세액적 내 핵산가수분해효소의 활성 측정방법
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제1항 또는 제2항에 있어서,상기 단계 2의 제2주입구에 시료용액을 투입하는 방법은,제2주입구에 기준용액 및 핵산가수분해효소를 포함한 시료를 미리 혼합하여 준비한 시료용액을 투입하거나,제2주입구의 입구에 Y형 튜브를 연통하여, 상기 Y형 튜브 각각의 입구에 기준용액 및 핵산가수분해효소를 포함한 시료를 동시에 주입하여 혼합된 시료용액을 투입하는 것을 특징으로 하는 측정방법
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제1항 또는 제2항에 있어서,상기 단계 1 및 단계 2의 미세유체칩은 각각 따로 준비하거나,상기 단계 1의 측정이 끝난 다음 제2주입구에 기준용액 대신 시료용액을 투입하여 하나의 미세유체칩을 사용하는 것을 특징으로 하는 측정방법
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제1항 또는 제2항에 있어서,상기 핵산은 리보핵산 또는 디옥시리보핵산인 것을 특징으로 하는 측정방법
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제1항 또는 제2항에 있어서,상기 핵산가수분해효소는 리보핵산말단가수분해효소, 리보핵산내부가수분해효소, 디옥시리보핵산말단가수분해효소 또는 디옥시리보핵산내부가수분해효소인 것을 특징으로 하는 측정방법
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제1항 또는 제2항에 있어서,상기 브로민화 이티듐(ethidium bromide)이 비표지적으로 도입된 핵산은 브로민화 이티듐이 핵산에 화학적 결합 또는 컨쥬게이션을 형성하는 것이 아니라, 핵산의 염기서열 사이에 물리적으로 끼어들어가는 것을 특징으로 하는 측정방법
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제1항 또는 제2항의 측정방법을 이용한 핵산가수분해효소 저해제의 활성을 측정하는 방법
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제1항 또는 제2항의 측정방법을 이용하여, 환자로부터 채취한 눈물, 혈액, 타액, 소변 또는 조직 시료로부터 핵산가수분해효소의 활성을 측정하고, 이를 정상인의 핵산가수분해효소 활성 수치와 비교하여 질병을 진단하는 방법
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제9항에 있어서,상기 질병은 심근경색(acute myocardial infarction), 심근허혈(transient myocardial ischemia), 혈전증(thrombosis), 낭성 섬유증(cystic fibrosis), 자가면역질환(autoimmune diseases), 사구체신염(glomerular nephritis), 관절염(arthritis), 발진(anthema), 구강암(oral cancer), 유방암(breast cancer), 위암(stomach cancer), 자궁암(ovarian cancer), 갑상선암(thyroid cancer), 폐암(lung cancer), 간암(liver cancer), 췌장암(pancreatic cancer) 또는 림프종(lymphoma)인 것을 특징으로 하는 방법
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미세유체칩(110);상기 미세유체칩의 하면에 위치되는 대물렌즈(120);광원(130);상기 광원 다음에 위치하는 여기필터(140);상기 여기필터를 통과한 광원에서 색을 선별하여, 상기 대물렌즈를 거쳐 미세유체칩에 형성된 미세액적으로 전달하는 색선별거울(150);미세유체칩에 형성된 미세액적에서 발생하는 형광을 전달하는 방출필터(160);상기 방출필터를 통과한 형광을 검출기로 반사하는 거울(170); 및검출기(180);를 포함하는 상대적 형광강도를 통한 미세액적 내 핵산가수분해효소의 활성 측정장치
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미세유체칩(210);상기 미세유체칩의 하면에 위치되는 대물렌즈(220);광원(230);상기 광원 다음에 위치하는 편광필터(240);상기 편광필터 다음에 위치하는 여기필터(250);상기 여기필터를 통과한 광원에서 색을 선별하여, 상기 대물렌즈를 거쳐 미세유체칩에 형성된 미세액적으로 전달하는 색선별거울(260);미세유체칩에 형성된 미세액적에서 발생하는 형광을 전달하는 방출필터(270);상기 방출필터를 통과한 형광을 편광분할기로 반사하는 거울(280);상기 거울을 통해 전달된 형광을 편광 분할하는 편광분할기(290);상기 편광분할기를 통해 전달된 형광편광에서 수직면을 선별하여 검출기로 전달하는 수직면선별기(291);상기 편광분할기를 통해 전달된 형광편광에서 수평면을 선별하여 검출기로 전달하는 수평면선별기(292); 및검출기(293);를 포함하는 상대적 형광편광도를 통한 미세액적 내 핵산가수분해효소의 활성 측정장치
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