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i) 요오드화물(iodide) 수송체를 발현하는 공여체 세포 및 요오드화물 센서 형광 단백질을 발현하는 수용체 세포를 제조하는 단계;ii) 상기 단계 i)에서 제조한 공여체 세포 및 수용체 세포를 혼합하여 공동 배양하는 단계;iii) 상기 단계 ii)에서 공동배양한 배양액을 제거하고 요오드화물을 포함하지 않는 완충용액을 배양 플레이트에 첨가하는 단계;iv) 상기 단계 iii)에서 첨가한 배양 플레이트에 요오드화물을 포함하는 완충용액을 첨가하는 단계;v) 상기 단계 iv)의 첨가 시점으로부터 배양 플레이트의 형광 강도를 측정하는 단계;vi) 상기 단계 v)에서 측정한 형광 강도의 감소를 요오드화물 센서 형광 단백질의 소광(quenching) 비율로서 계산하는 단계; 및vii) 상기 단계 vi)에서 계산한 소광 비율이 증가하면 세포 내 갭정션 활성이 증가하는 것으로 판단하는 단계;를 포함하는 세포 간 갭정션(gap junction) 활성 측정 방법
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제 1항에 있어서, 상기 단계 i)의 요오드화물 수송체는 SLC26A4 단백질이고, 요오드화물 센서 형광 단백질은 YFP(yellow fluorescent protein)의 H148Q/I152L 치환 변이 단백질인 것을 특징으로 하는, 세포 간 갭정션 활성 측정 방법
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제 1항에 있어서, 상기 단계 i)의 공여체 세포 및 수용체 세포는 커넥신(connexin) 단백질을 발현하는 세포인 것을 특징으로 하는, 세포 간 갭정션 활성 측정 방법
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제 3항에 있어서, 상기 커넥신 단백질의 발현하는 세포는 신경교종 세포주(glioma cell) 또는 골육종 세포주(osteosarcoma)인 것을 특징으로 하는, 세포 간 갭정션 활성 측정 방법
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제 1항에 있어서, 상기 단계 ii)의 혼합은 공여체 세포 및 수용체 세포를 2:1 내지 5:1의 비율로 혼합하는 것을 특징으로 하는, 세포 간 갭정션 활성 측정 방법
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제 1항에 있어서, 상기 단계 iv)의 완충용액은 요오드화물을 100 내지 150 mM 농도로 포함하는 것을 특징으로 하는, 세포 간 갭정션 활성 측정 방법
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제 1항에 있어서, 상기 단계 v)의 측정은 4 내지 20초 동안 수행하는 것을 특징으로 하는, 세포 간 갭정션 활성 측정 방법
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요오드화물(iodide) 수송체를 발현하는 공여체 세포 및 요오드화물 센서 형광 단백질을 발현하는 수용체 세포를 포함하는, 세포 간 갭정션 활성 측정용 키트
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제 8항에 있어서, 상기 요오드화물 수송체는 SLC26A4 단백질이며; 및 상기 요오드화물 센서 형광 단백질은 YFP의 H148Q/I152L 치환 변이 단백질인 것을 특징으로 하는, 세포 간 갭정션 활성 측정용 키트
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제 8항에 있어서, 상기 공여체 세포 및 수용체 세포는 커넥신 단백질을 발현하는 세포인 것을 특징으로 하는, 세포 간 갭정션 활성 측정용 키트
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제 10항에 있어서, 상기 커넥신 단백질의 발현하는 세포는 신경교종 세포주 또는 골육종 세포주인 것을 특징으로 하는, 세포 간 갭정션 활성 측정용 키트
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i) 요오드화물 수송체를 발현하는 공여체 세포 및 요오드화물 센서 형광 단백질을 발현하는 수용체 세포를 제조하는 단계;ii) 상기 단계 i)에서 제조한 공여체 세포 및 수용체 세포를 혼합하여 공동 배양하는 단계;iii) 상기 단계 ii)에서 공동배양한 배양액을 제거하여, 요오드화물을 포함하지 않고 피검 약물을 포함하는 완충용액을 배양 플레이트에 첨가하여 배양하는 단계;iv) 상기 단계 iii)에서 배양한 배양 플레이트에 요오드화물을 포함하는 완충용액을 첨가하는 단계;v) 상기 단계 iv)의 첨가 시점으로부터 배양 플레이트의 형광 강도를 측정하는 단계;vi) 상기 단계 v)에서 측정한 형광 강도의 감소를 요오드화물 센서 형광 단백질의 소광 비율로서 계산하는 단계; 및vii) 상기 단계 vi)에서 계산한 소광 비율을 미처리 대조군과 비교하는 단계;를 포함하는, 갭정션 활성 조절제 스크리닝 방법
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제 12항에 있어서, 상기 단계 vii)에서 비교한 결과, 소광 비율을 증가시키면 피검물질을 갭활성 유도물질로 판단하고, 소광 비율을 감소시키면 피검물질을 갭활성 억제물질로 판단하는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는, 갭정션 활성 조절제 스크리닝 방법
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