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방사형으로 뻗은 K 개의 팔(arm)을 갖는 RNA 나노구조체로서,K는 3 또는 4이고, 각 팔은 스템(stem) 및 루프(loop)로 구성되고, 1) 각 팔의 스템은 코어(core) 및 RNAi 서열(RNAi sequence)로 구성되고, ⅰ
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제1항에 있어서, 상기 각 팔의 스템에 포함된 RNAi 서열은 센스 서열의 5′-말단이 루프 방향으로 향하거나 또는 안티센스 서열의 5′-말단이 루프 방향으로 향하는 RNA 나노구조체
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제1항에 있어서, 상기 각 팔의 루프가 개방된 경우 RNAi 서열의 3′ 말단에 2 nt 길이의 단일가닥 RNA(오버행(overhang)을 갖는 RNA 나노구조체
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제1항에 있어서, 상기 각 팔의 스템에 포함된 코어는 G(구아닌)-C(시토신) 콘텐츠(G-C contents)가 50% 이상인 RNA 나노구조체
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제6항에 있어서, 상기 1단계는 a) 원형 DNA 주형가닥의 루프가 될 부분을 사이에 두고 양 쪽에 임의의 유전자에 대한 센스 서열과 상기 유전자에 대한 안티센스 서열이 각각 존재하고, 센스 서열과 안티센스 서열 말단에 각각 원형 DNA 주형가닥에서 코어가 될 부분이 존재하는 K 개의 DNA 주형가닥을 준비하는 단계;b) 상기 K 개의 DNA 주형가닥을 혼성화하여 서로 상보적인 서열 간에 서로 결합되도록 함으로써 K 개의 닉(nick)을 갖는 DNA 주형가닥을 제조하는 단계; 및c) 상기 K 개의 닉을 갖는 DNA 주형가닥에 DNA 리가아제(DNA ligase)를 처리하여 원형 DNA 주형가닥을 제조하는 단계를 포함하는, 방법
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제6항에 있어서, 상기 4 단계에서 상기 DNA 헬퍼는 2 - 30 nt 길이로 적어도 4개의 비변형된 부분을 포함하는 3'-말단, 5'말단 또는 중간부분의 뉴클레오티드가 2′-O-메틸화된 것인 방법
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제6항에 있어서, 상기 2 단계에서 상기 RNA 폴리머라아제는 T7-RNA 폴리머라아제인 방법
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제6항에 있어서, 상기 2 단계에서 RNA 폴리머라제와 함께 프라이머를 처리하여 RCT에 의하여 증폭 RNA 산물을 얻고, 여기에서 상기 프라이머는 8-30 nt 길이의 DNA 주형가닥의 루프에 상보적인 12-30 nt 길이의 핵산 서열로 구성된 방법
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제6항에 있어서, 상기 1 단계에서 원형 DNA 주형가닥 중 1 이상의 루프는 RNA 폴리머라제가 인식하는 RNA 폴리머라제 프로모터(promoter) 서열을 포함하는 방법
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