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금 나노입자를 이용한 단백질 응집의 예측 방법 및 이를 이용한 신속한 약물 스크리닝 방법(Methods for colorimetric determination of protein aggregation and its application to ultrafast drug screening using gold nanoparticles)

  • 기술번호 : KST2017018333
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 금 나노입자를 이용한 단백질 응집의 예측 방법 및 이를 이용한 신속한 약물 스크리닝 방법에 관한 것으로, 구체적으로 금 나노입자를 탐침(프로브)으로 사용하여 치매의 원인 단백질인 아밀로이드 베타 펩타이드 (Amyloid β (1-40), Amyloid β (1-42)) 및 루게릭병의 원인 단백질인 SOD1(superoxide dismutase1)의 산성 조건에서 단백질 응집과정을 확인한 결과, 금 나노입자가 첨가되지 않은 대조군에 비해 단량체(monomer)로부터 성숙된 단백질 응집체로의 성장 단계를 금 나노입자 용액의 색변화(분홍색→ 자주색→ 보라색 또는 남색)를 통해 초고속으로 실시간 확인이 가능하였고, 고온 조건 및 화학 물질 첨가 등의 다양한 단백질 응집 형성 조건에서도 적용이 가능하였으며, 또한 아밀로이드 베타 펩타이드의 응집을 직접 또는 간접적으로 저해하는 효과가 있다고 알려진 10가지 후보 약물을 선정하여 단백질 응집 저해제 스크리닝을 진행해 본 결과, 예방제 또는 치료제로써 단백질 응집 저해 효과가 있는 약물을 육안으로 빠르게 선별해 낼 수 있어, 본 발명의 방법은 고가의 장비 없이 단백질 응집 구조 및 정도를 초고속으로 실시간 육안 모니터링할 수 있으므로 단백질 구조를 분석하는데 소요되는 시간과 비용을 절감하여, 기존의 단백질 구조 분석 방법에 대한 대안적 활용이 가능한 방법으로써, 단백질 응집의 키네틱(kinetic) 및 메커니즘(mechanism) 연구와 같은 분자 생물학적 및 생화학적 연구에 적용 가능할 뿐만 아니라 단백질 구조 변성 질환을 일으키는 단백질 응집을 저해할 수 있는 신약 후보 물질을 대량으로, 초고속 스크리닝을 가능하게 하여 약물개발 연구에 유용하게 사용될 수 있다.
Int. CL G01N 33/58 (2016.06.29) G01N 33/68 (2016.06.29) G01N 33/52 (2016.06.29) G01N 33/50 (2016.06.29)
CPC G01N 33/587(2013.01) G01N 33/587(2013.01) G01N 33/587(2013.01) G01N 33/587(2013.01) G01N 33/587(2013.01) G01N 33/587(2013.01)
출원번호/일자 1020160064591 (2016.05.26)
출원인 서울시립대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2017-0133622 (2017.12.06) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2016.05.26)
심사청구항수 9

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 서울시립대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 동대문구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 최인희 대한민국 서울특별시 동작구
2 김혜영 대한민국 서울특별시 도봉구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이원희 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 서울시립대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 동대문구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2016.05.26 수리 (Accepted) 1-1-2016-0506165-04
2 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2017.01.17 수리 (Accepted) 4-1-2017-5009116-18
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2017.06.12 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2017.08.09 수리 (Accepted) 9-1-2017-0025998-03
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2017.08.22 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0584207-11
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2017.10.11 수리 (Accepted) 1-1-2017-0997371-19
7 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2017.10.11 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2017-0996894-18
8 최후의견제출통지서
Notification of reason for final refusal
2018.02.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0137763-57
9 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2018.04.05 보정승인 (Acceptance of amendment) 1-1-2018-0339740-43
10 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2018.04.05 수리 (Accepted) 1-1-2018-0339734-79
11 등록결정서
Decision to grant
2018.08.31 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0592537-40
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.09.10 수리 (Accepted) 4-1-2019-5191631-69
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번호 청구항
1 1
1) 금 나노입자를, Amyloid β (1-40) 및 Amyloid β (1-42) 단백질 단량체를 포함하는 제1 단백질 용액, Amyloid β (1-40) 단백질 단량체를 포함하는 제2 단백질 용액, 및 Amyloid β (1-42) 단백질 단량체를 포함하는 제3 단백질 용액에 각각 혼합하여 나노입자를 둘러싼 단백질 올리고머를 형성하는 단계;2) 상기 단계 1)의 혼합 용액 각각에 후보 약물을 처리하고, 단백질 올리고머의 응집을 유도하는 단계; 및3) 후보 약물을 처리하지 않은 용액에 비해 약물을 처리한 용액의 색 변화를 비교하는 단계를 포함하는 치매의 치료물질 스크리닝 방법
2 2
제 1항에 있어서, 상기 금 나노입자는 직경이 5 내지 100 nm인 구형 금 나노입자인 것을 특징으로 하는 치매의 치료물질 스크리닝 방법
3 3
제 1항에 있어서, 상기 금 나노입자는 510 nm 내지 530 nm 에서 최대 흡광 피크를 가지는 것을 특징으로 하는 치매의 치료물질 스크리닝 방법
4 4
삭제
5 5
제 1항에 있어서, 상기 금 나노입자와 단백질 용액의 혼합은 금 나노 입자의 몰 수에 대한 단백질의 몰 수의 비가 100 내지 2000인 것을 특징으로 하는 치매의 치료물질 스크리닝 방법
6 6
제 1항에 있어서, 상기 단백질 응집은 온도 또는 pH의 변화, 또는 중금속 또는 화학물질의 첨가로 인해 유도되는 것을 특징으로 하는 치매의 치료물질 스크리닝 방법
7 7
제 1항에 있어서, 상기 단백질 올리고머의 응집은 올리고머(oligomer), 중간체(intermediate), 무정형(amorphous) 응집체 또는 가는 섬유형(fibril) 응집체로 진행되는 것을 특징으로 하는 치매의 치료물질 스크리닝 방법
8 8
제 1항에 있어서, 상기 색 변화는 단백질의 응집 정도가 올리고머인 경우에는 분홍색(pink), 중간체인 경우는 자주색(purple), 무정형인 경우는 보라색(violet), 또는 가는 섬유형인 경우는 남색(deep-blue)을 나타내는 것을 특징으로 하는 치매의 치료물질 스크리닝 방법
9 9
제 1항에 있어서, 상기 색 변화는 금 나노입자 고유의 피크(intrinsic peak)인 520 nm에서의 흡광도에 대한 단백질 응집의 지표 피크(indicator peak)인 650 nm에서의 흡광도의 비율인 상대적 흡광도(relative absorbance)를 통해 계산되는 것을 특징으로 하는 치매의 치료물질 스크리닝 방법
10 10
삭제
11 11
1) Amyloid β (1-40) 및 Amyloid β (1-42) 단백질 단량체를 포함하는 제1 단백질 용액, Amyloid β (1-40) 단백질 단량체를 포함하는 제2 단백질 용액, 및 Amyloid β (1-42) 단백질 단량체를 포함하는 제3 단백질 용액 각각을, 후보 약물과 혼합하는 단계;2) 단계 1)의 혼합 용액 각각에 금 나노입자를 처리하고, 단백질 단량체의 응집을 유도하는 단계; 및3) 후보 약물을 처리하지 않은 용액에 비해 약물을 처리한 용액의 색 변화를 비교하는 단계를 포함하는 치매의 예방물질 스크리닝 방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 미래창조과학부 서울시립대학교 산학협력단 신진연구지원사업 새로운 물 기반 식각 방식을 이용한 계층적인 계면 구조체의 비전통적 형성 및 나노바이오광학기반 분자 검출과 손쉬운 표면 코팅기술에의 응용