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인간 세포 내 DNA 복구 절제 조각, 체크포인트 신호 및 세포사멸의 통합적 분석방법(Method for integrated analysis of DNA excision repair products, checkpoint signaling and apoptosis in human cells)

  • 기술번호 : KST2017018885
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 세포 내 DNA 회복 과정에서 발생되는 DNA 조각 및 세포사멸의 동시적 검출 방법에 관한 것으로 상세하게는 바이오틴으로 라벨링(labelling)된 DNA 조각을 정량적으로 검출하는 것과 동시에 DNA 손상에 따른 세포의 반응 및 이에 따른 신호와 세포사멸을 검출할 수 있는 향상된 효과가 있다. 또한, 종래의 방사성동위원소를 사용한 검출방법에 비해 특정 손상 특이적 항체 활용에 제한되지 않고 넓은 범위에서 활용이 가능하며, 보다 높은 민감도의 정량 분석이 가능할 것으로 기대된다.
Int. CL C12Q 1/68 (2016.06.30)
CPC C12Q 1/68(2013.01) C12Q 1/68(2013.01) C12Q 1/68(2013.01) C12Q 1/68(2013.01) C12Q 1/68(2013.01) C12Q 1/68(2013.01) C12Q 1/68(2013.01) C12Q 1/68(2013.01) C12Q 1/68(2013.01)
출원번호/일자 1020160075503 (2016.06.17)
출원인 한국표준과학연구원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2017-0142295 (2017.12.28) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 공개
심사진행상태 수리
심판사항 심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호 1020180083680;
심사청구여부/일자 Y (2016.06.17)
심사청구항수 7

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국표준과학연구원 대한민국 대전 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 송지명 대한민국 대구광역시 수성구
2 최준혁 대한민국 대전광역시 유성구
3 이진희 대한민국 대구광역시 수성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인 플러스 대한민국 대전광역시 서구 한밭대로 ***번지 (둔산동, 사학연금회관) **층

최종권리자

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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2016.06.17 수리 (Accepted) 1-1-2016-0583191-19
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2016.08.10 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2016.10.10 수리 (Accepted) 9-1-2016-0042877-96
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2017.10.19 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0725183-22
5 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2017.12.15 수리 (Accepted) 1-1-2017-1250731-12
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2017.12.15 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2017-1250725-48
7 거절결정서
Decision to Refuse a Patent
2018.04.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0286648-65
8 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2018.05.24 수리 (Accepted) 1-1-2018-0508356-33
9 [명세서등 보정]보정서(재심사)
Amendment to Description, etc(Reexamination)
2018.05.24 보정승인 (Acceptance of amendment) 1-1-2018-0508363-53
10 거절결정서
Decision to Refuse a Patent
2018.06.28 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0439184-26
11 [분할출원]특허출원서
[Divisional Application] Patent Application
2018.07.18 수리 (Accepted) 1-1-2018-0711457-53
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2018.12.27 수리 (Accepted) 4-1-2018-5266627-88
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2018.12.27 수리 (Accepted) 4-1-2018-5266645-00
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2018.12.27 수리 (Accepted) 4-1-2018-5266640-72
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번호 청구항
1 1
(a) 세포에 제노톡신(genotoxin)을 처리하는 단계;(b) DNA 단편을 추출하는 단계;(c) (b) 단계의 추출물을 두 개의 그룹으로 나누어 첫 번째 그룹에는 RNase(ribonuclease)와 단백질 분해 효소(protease)를 처리하고 두 번째 그룹은 면역탁본(immunoblot)을 처리하는 단계;(d) (c) 단계의 첫 번째 그룹에서 얻은 DNA의 말단에 바이오틴(biotin)을 라벨링하는 단계;(e) (d) 단계의 DNA를 전기영동하는 단계;(f) (e) 단계에서 분리한 DNA를 멤브레인(membrane)에 트랜스퍼(transfer)하는 단계;(g) 자외선 크로스-링킹(cross-linking)을 통해 (f) 단계에서 얻은 DNA를 고정화(immobilization)하는 단계;(h) (g)단계의 DNA에 스트렙타비딘-HRP(streptavidin-horseradish peroxidase)를 결합시키는 단계;(i) (h) 단계에서 얻은 물질을 HRP 화학발광(chemiluminescence) 방법으로 검출하는 단계;(j) (c) 단계의 두 번째 그룹에서 얻은 단백질을 전기영동하는 단계;(k) (j) 단계에서 분리한 단백질을 멤브레인(membrane)에 트랜스퍼(transfer)하는 단계; (l) (k) 단계의 멤브레인에 스트렙타비딘-HRP(streptavidin-horseradish peroxidase)가 연결된 복합체를 결합시키는 단계; 및(m) (l) 단계에서 얻은 물질을 HRP 화학발광(chemiluminescence) 방법으로 검출하는 단계; 를 포함하는 것을 특징으로 하는 핵산 절제 회복 시스템에서 절제된 올리고뉴클레오티드, 체크포인트 신호와 세포사멸의 동시적 검출방법
2 2
제 1항에 있어서,상기 제노톡신은 자외선(UV), BDPE, 시스플라틴, 블레오마이신 또는 미토마이신 C인 것을 특징으로 하는 검출방법
3 3
제 1항에 있어서,상기 (c) 단계의 RNase는 RNase A, RNase H, RNase I, RNase P, RNase PhyM, RNase T1, RNase T2, RNase U2, RNase V1, RNase V, PNPase(polynucleotide phosphorylase), RNase PH, RNase II, RNase R, RNase D, RNase T, oligoribonuclease, Exoribonuclease I 및 Exoribonuclease II으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 또는 둘 이상인 것을 특징으로 하는 검출방법
4 4
제 3항에 있어서,상기 RNase는 RNase A 및 RNase T1인 것을 특징으로 하는 검출방법
5 5
제 1항에 있어서,상기 (c) 단계의 단백질 분해 효소는 세린(serine) 프로테아제(protease), 스레오닌(threonine) 프로테아제, 시스테인(cysteine) 프로테아제, 아스파르테이트(aspartate) 프로테아제, 글루탐산(glutamic acid) 프로테아제 또는 메탈로프로테아제(metalloprotease)인 것을 특징으로 하는 검출방법
6 6
제 5항에 있어서,상기 단백질 분해 효소는 세린 프로테아제인 것을 특징으로 하는 검출방법
7 7
제 6항에 있어서,상기 세린 프로테아제는 프로테이나제 K(proteinase K)인 것을 특징으로 하는 검출방법
8 8
제 1항에 있어서,상기 (d)단계의 라벨링은 바이오틴-11-UTP 또는 바이오틴-11-dUTP인 것을 특징으로 하는 검출방법
9 9
제 1항에 있어서,상기 (l)단계의 항체는 p-ATR, ATR, p-ATRIP, ERCC5/XPG, XPG(8H7), RPA70, RPA(Ab-2)(34-19), RPA32(4E4), p-RPA32(S33), p-Ch1(S317), p-Chk1(S345)(133D3), Chk1(G-4), p-Chk2(T68), Chk2(1C12), p-p53(S15), p-p53(S20), p53, p53(FL-393), p53(DO-1), TFⅡH p89(S-19), XPA(FL-273), XPA(B-1) 또는 GAPDH인 것을 특징으로 하는 검출방법
10 10
제 9항에 있어서,상기항체는 Chk1, P-Chk1(Ser345), Chk2, P-Chk2(Thr68), Cleaved PARP(Asp214), GAPDH인 것을 특징으로 하는 검출방법
지정국 정보가 없습니다
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1 KR1020180086170 KR 대한민국 FAMILY

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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 미래창조과학부 한국표준과학연구원 기관고유사업 2-1-1 바이오임상 측정표준 확립 총괄