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교류 전위 변조 마이크로플루이딕 채널을 이용한 압타머 선별 방법(Selecting method of aptamer using AC potential modulated microfluidic channel)

  • 기술번호 : KST2018000353
  • 담당센터 : 부산기술혁신센터
  • 전화번호 : 051-606-6561
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 교류 전위 변조 마이크로플루이딕 채널을 이용한 압타머 선별 방법에 관한 것으로서, 상기 방법은 작용기를 가지는 전기전도성 고분자 막으로 개질된 탄소 기반의 마이크로플루이딕 채널 내벽에 공유결합을 통해 안정하게 선별하고자 하는 표적물질을 고정함으로써 기존의 셀렉스 과정을 획기적으로 간소화할 수 있으며, 또한 채널에 교류 전위를 가함으로써 랜덤 DNA 라이브러리의 유체 흐름이 특정 파동을 가지는 난류 형태로 이동하면서 표적물질과 압타머의 반응성을 향상시켜 매우 빠르고 간편하게 압타머를 선별할 수 있다.
Int. CL G01N 35/08 (2016.08.03) B01L 3/00 (2016.08.03) C12N 15/10 (2016.08.03) G01N 33/543 (2016.08.03)
CPC G01N 35/08(2013.01) G01N 35/08(2013.01) G01N 35/08(2013.01) G01N 35/08(2013.01) G01N 35/08(2013.01) G01N 35/08(2013.01) G01N 35/08(2013.01) G01N 35/08(2013.01) G01N 35/08(2013.01) G01N 35/08(2013.01) G01N 35/08(2013.01)
출원번호/일자 1020160084123 (2016.07.04)
출원인 부산대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2018-0004503 (2018.01.12) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 발송처리완료
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2016.07.04)
심사청구항수 17

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 부산대학교 산학협력단 대한민국 부산광역시 금정구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 심윤보 대한민국 부산광역시 연제구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인태백 대한민국 서울 금천구 가산디지털*로 *** 이노플렉스 *차 ***호

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 부산대학교 산학협력단 부산광역시 금정구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2016.07.04 수리 (Accepted) 1-1-2016-0644743-87
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2016.09.12 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2016.11.10 수리 (Accepted) 9-1-2016-0047295-95
4 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2017.01.09 수리 (Accepted) 4-1-2017-5004005-98
5 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2017.01.10 수리 (Accepted) 4-1-2017-5004797-18
6 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2017.12.20 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0894567-70
7 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2018.01.29 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2018-0100015-22
8 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2018.01.29 수리 (Accepted) 1-1-2018-0100016-78
9 등록결정서
Decision to grant
2018.06.27 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0437008-63
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번호 청구항
1 1
마이크로플루이딕 채널 내벽을 전기전도성 고분자 막으로 개질하며, 상기 고분자 막에 표적물질을 공유결합을 통해 고정시키며, 교류 전위를 가하여 DNA 라이브러리를 포함한 유체를 흘려주어 표적물질과의 반응을 유도하는 반응 채널; 및 작동전극, 보조전극 및 기준전극으로 구성되며, 표적물질과 반응하는 압타머를 전기화학적으로 선별하는 검출 채널을 포함하는, 교류 전위 변조를 이용한 마이크로플루이딕 디바이스
2 2
청구항 1에 있어서, 상기 마이크로플루이딕 채널은 탄소 기반 마이크로플루이딕 채널인 것을 특징으로 하는, 교류 전위 변조를 이용한 마이크로플루이딕 디바이스
3 3
청구항 1에 있어서, 상기 전기전도성 고분자는 폴리-2,2:5,5-터싸이오펜-3-벤조산(poly-{2,2:5,5-terthiophene-3-benzoic acid}; pTTBA’), 폴리-5,2-5,2-터싸이오펜-3-카르복실산(poly-{5,2-5,2-terthiophene-3-carboxylic acid}; ‘pTTCA’), 폴리-{4'-([2,2':5',2''-터싸이오펜]-3')-[1,1'-비페닐]-4-카르복실산(poly-{4'-([2,2':5',2''-terthiophen]-3'-yl)-[1,1'-biphenyl]-4-carboxylic acid; 'TTBPA'), 및 폴리-{4-(2,5-디(터싸이오펜-2)-1H-피롤-1)벤조산(poly-{4-(2,5-di(thiophen-2-yl)-1H-pyrrol-1-yl)benzoic acid; 'DTPBA')로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는, 교류 전위 변조를 이용한 마이크로플루이딕 디바이스
4 4
청구항 1에 있어서, 상기 표적물질은 PvLDH(plasmodium vivax lactate dehydrogenase), PfLDH(plasmodium falciparum lactate dehydrogenase), PmLDH(plasmodium malariae lactate dehydrogenase) 및 PoLDH(plasmodium ovale lactate dehydrogenase)로 이루어진 군에서 선택된 말라리아 바이오마커, 아밀로이드-베타 또는 타우단백질에서 선택된 알츠하이머 바이오마커, 후천성 면역결핍 증후군 바이오마커, 알파-시누클레인(α-synuclein), LRRK2(Leucine-rich repeat kinase 2), PINK1(PTEN-induced putative kinase 1) 또는 PARK7(Parkinson disease protein 7)에서 선택된 파킨슨병 바이오마커, CRP(,IL-6(interleukin-6),IL-8(interleukin-8),MCP-1()또는 IP-10(IFN-γ-Inducible Protein 10)에서 선택된 심혈관질환 바이오마커, Ras 단백질, 프로테인 카이네이즈, C-Myc, N-Myc, C-erb B2 또는 Her2에서 선택된 암질환 바이오마커, 유전병 바이오마커, 및 EM48, BDNF( 또는 α-튜불린(α-tubulin)에서 선택된 헌팅턴무도병 바이오마커로 이루어진 군에서 선택된 것을 특징으로 하는, 교류 전위 변조를 이용한 마이크로플루이딕 디바이스
5 5
전기전도성 단량체와 카본이 균일하게 혼합된 잉크를 준비하는 단계; 및상기 준비된 잉크를 기판 상에 스크린 프린팅하여 탄소 기반의 마이크로플루이딕 채널을 형성시킨 후 커버를 접합하는 단계;를 포함하는, 교류 전위 변조를 이용한 청구항 1에 따른 마이크로플루이딕 디바이스 제조방법
6 6
청구항 5에 있어서,상기 전기전도성 단량체는,2,2:5,5-터싸이오펜-3-벤조산(2,2:5,5-terthiophene-3-benzoic acid; ‘TTBA’), 5,2-5,2-터싸이오펜-3-카르복실산(5,2-5,2-terthiophene-3-carboxylic acid; ‘TTCA’), 4'-([2,2':5',2''-터싸이오펜]-3')-[1,1'-비페닐]-4-카르복실산(4'-([2,2':5',2''-terthiophen]-3'-yl)-[1,1'-biphenyl]-4-carboxylic acid; 'TTBPA'), 및 4-(2,5-디(터싸이오펜-2)-1H-피롤-1)벤조산(4-(2,5-di(thiophen-2-yl)-1H-pyrrol-1-yl)benzoic acid; 'DTPBA')로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는, 교류 전위 변조를 이용한 마이크로플루이딕 디바이스 제조방법
7 7
청구항 5에 있어서,상기 잉크는,1 내지 5 중량%의 전기전도성 단량체와 잔부의 카본이 포함된 것을 특징으로 하는, 교류 전위 변조를 이용한 마이크로플루이딕 디바이스 제조방법
8 8
청구항 5에 있어서,상기 스크린 프린팅은,3 내지 7회 수행하는 것을 특징으로 하는, 교류 전위 변조를 이용한 마이크로플루이딕 디바이스 제조방법
9 9
전기전도성 단량체와 카본이 균일하게 혼합된 잉크를 준비하는 단계(제1단계);상기 준비된 잉크를 기판 상에 스크린 프린팅하여 탄소 기반의 마이크로플루이딕 채널을 형성시키는 단계(제2단계);상기 마이크로플루이딕 채널 내벽에 포함된 전기전도성 단량체를 순환 전류-전압법으로 전해중합하여 전기전도성 고분자 막을 형성한 후 형성된 고분자 막의 작용기를 활성화시키는 단계(제3단계);상기 작용기가 활성화된 전기전도성 고분자 막 상에 선별하고자 하는 DNA와 결합하는 표적물질을 고정시키는 단계(제4단계);상기 표적물질이 고정된 마이크로플루이딕 채널 내부에 랜덤 DNA 라이브러리를 주입하고 교류 전위를 인가하여 표적물질과 랜덤 DNA 라이브러리 간의 반응을 유도시키는 단계(제5단계);상기 반응 후 표적물질과 선택적으로 반응한 특정 DNA를 선별하여 압타머 후보군을 수집하는 단계(제6단계); 및 상기 표적물질로 개질 되지 않은 마이크로플루이딕 채널에 교류 전위를 인가하여 압타머 후보군의 분자량에 따라 전기화학적 방법으로 분리하는 단계(제7단계);를 포함하는, 교류 전위 변조 마이크로플루이딕 채널을 이용한 압타머 선별방법
10 10
청구항 9에 있어서,상기 전기전도성 단량체는,2,2:5,5-터싸이오펜-3-벤조산(2,2:5,5-terthiophene-3-benzoic acid; ‘TTBA’), 5,2-5,2-터싸이오펜-3-카르복실산(5,2-5,2-terthiophene-3-carboxylic acid; ‘TTCA’), 4'-([2,2':5',2''-터싸이오펜]-3')-[1,1'-비페닐]-4-카르복실산(4'-([2,2':5',2''-terthiophen]-3'-yl)-[1,1'-biphenyl]-4-carboxylic acid; 'TTBPA'), 및 4-(2,5-디(터싸이오펜-2)-1H-피롤-1)벤조산(4-(2,5-di(thiophen-2-yl)-1H-pyrrol-1-yl)benzoic acid; 'DTPBA')로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는, 교류 전위 변조 마이크로플루이딕 채널을 이용한 압타머 선별방법
11 11
청구항 9에 있어서,상기 잉크는,1 내지 5 중량%의 전기전도성 단량체와 잔부의 카본이 포함된 것을 특징으로 하는, 교류 전위 변조 마이크로플루이딕 채널을 이용한 압타머 선별방법
12 12
청구항 9에 있어서,상기 제3단계는,순환 전류-전압법으로 0
13 13
청구항 9에 있어서,상기 작용기는,카르복실기 또는 아민기 중 어느 하나인 것을 특징으로 하는, 교류 전위 변조 마이크로플루이딕 채널을 이용한 압타머 선별방법
14 14
청구항 9에 있어서,상기 표적물질은 PvLDH(plasmodium vivax lactate dehydrogenase), PfLDH(plasmodium falciparum lactate dehydrogenase), PmLDH(plasmodium malariae lactate dehydrogenase) 및 PoLDH(plasmodium ovale lactate dehydrogenase)로 이루어진 군에서 선택된 말라리아 바이오마커, 아밀로이드-베타 또는 타우단백질에서 선택된 알츠하이머 바이오마커, 후천성 면역결핍 증후군 바이오마커, 알파-시누클레인(α-synuclein), LRRK2(Leucine-rich repeat kinase 2), PINK1(PTEN-induced putative kinase 1) 또는 PARK7(Parkinson disease protein 7)에서 선택된 파킨슨병 바이오마커, CRP(,IL-6(interleukin-6),IL-8(interleukin-8),MCP-1()또는 IP-10(IFN-γ-Inducible Protein 10)에서 선택된 심혈관질환 바이오마커, Ras 단백질, 프로테인 카이네이즈, C-Myc, N-Myc, C-erb B2 또는 Her2에서 선택된 암질환 바이오마커, 유전병 바이오마커, 및 EM48, BDNF( 또는 α-튜불린(α-tubulin)에서 선택된 헌팅턴무도병 바이오마커로 이루어진 군에서 선택된 것을 특징으로 하는, 교류 전위 변조 마이크로플루이딕 채널을 이용한 압타머 선별방법
15 15
청구항 9에 있어서,상기 제4단계는,상기 작용기가 활성화된 전기전도성 고분자 막 상에 표적물질을 8 내지 12시간 동안 반응시켜 고정시키는 것을 특징으로 하는, 교류 전위 변조 마이크로플루이딕 채널을 이용한 압타머 선별방법
16 16
청구항 9에 있어서,상기 제5단계는,상기 표적물질이 고정된 마이크로플루이딕 채널 내부에 랜덤 DNA 라이브러리를 20 내지 40분 동안 주입하고 pH 6
17 17
청구항 9에 있어서,상기 제5단계는,0
18 18
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1 미래창조과학부 부산대학교 산학협력단 중견연구자지원사업(도약연구지원사업-전략) 전위변조 마이크로채널의 개발 및 전기화학적 분리분석법 연구