1 |
1
다음과 같은 특성을 포함하는, 자궁 유래 성체줄기세포:(a) CD29, CD44, CD71, CD90 및 CD120a 에 대하여 양성의 면역학적 특성을 나타내고, CD31, CD34 및 CD45 에 대하여 음성의 면역학적 특성을 나타냄; 및(b) 중배엽 유래 세포로 분화하는 능력을 가짐
|
2 |
2
제 1항에 있어서,상기 자궁 유래 성체줄기세포는 산모의 자궁 경부, 자궁 내막 또는 질에서 분리된 세포로부터 유래된 중간엽 줄기세포인 것인, 자궁 유래 성체줄기세포
|
3 |
3
제 1항에 있어서,상기 중배엽 유래 세포는 지방세포, 골세포 또는 연골세포인, 자궁 유래 성체줄기세포
|
4 |
4
(a) 자궁으로부터 샘플을 수득하는 단계;(b) 상기 수득된 샘플을 FBS(Fatal bovine serum), 항생제 및 L-Glutamine로 조성된 Low glucose DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle’s medium) 배지에서 배양하는 단계;(c) 상기 배양한 샘플을 원심분리하여 세포 펠렛을 확보하는 단계; 및(d) FBS, 항생제 및 L-glutamine이 포함된 RPMI 1640 배지에서 상기 (c) 단계에서 확보된 세포 펠렛을 재현탁한 후, 재현탁한 세포를 시딩(seeding)하는 단계; 를 포함하는 자궁 유래 성체줄기세포 분리방법
|
5 |
5
제 4항에 있어서,(e) 상기 시딩된 세포를 배양한 후, FBS(Fatal bovine serum), 항생제, L-Glutamine, 성장인자 및 비타민을 포함하는 DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle’s medium) 배지로 트랜스퍼하여 배양하는 단계를 더 포함하는, 자궁 유래 성체줄기세포 분리방법
|
6 |
6
제 4항에 있어서,상기 (b) 단계의 Low glucose DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle’s medium) 배지는 10% FBS(Fatal bovine serum), 2% 페니실린/스트랩토마이신/암포테라신 및 1% L-Glutamine로 조성된 것인, 자궁 유래 성체줄기세포 분리방법
|
7 |
7
제 4항에 있어서,상기 (d) 단계의 RPMI 1640 배지는 10% FBS, 2% 페니실린/스트랩토마이신/암포테라신 및 1% L-glutamine로 조성된 것인, 자궁 유래 성체줄기세포 분리방법
|
8 |
8
제 5항에 있어서,상기 (e) 단계의 Low glucose DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle’s medium) 배지는 10% FBS(Fatal bovine serum), 2% 페니실린/스트랩토마이신/암포테라신, 1% L-Glutamine, 20ng/ml bFGF 및 50ug/ml Vitamin C로 조성된 것인, 자궁 유래 성체줄기세포 분리방법
|
9 |
9
제1항 또는 제2항의 자궁 경부 유래 성체줄기세포를 지방세포 분화 유도 배지에서 5 내지 10일간 배양하는 단계를 포함하는, 자궁 유래 성체줄기세포로부터 지방세포로 분화시키는 방법
|
10 |
10
제 9항에 있어서, 상기 지방세포 분화 유도 배지는 10% FBS, 덱사메타손, 인슐린, 3-이소부틸-1-메틸잔틴, 바이오틴 및 판토테네이트로 조성된 Low glucose DMEM 배지인 것인, 자궁 유래 성체줄기세포로부터 지방세포로 분화시키는 방법
|
11 |
11
제1항 또는 제2항의 자궁 유래 성체줄기세포를 골세포 분화 유도 배지에서 10 내지 20일간 배양하는 단계를 포함하는, 자궁 유래 성체줄기세포로부터 골세포로 분화시키는 방법
|
12 |
12
제 11항에 있어서, 상기 골세포 분화 유도 배지는 10% FBS, 덱사메타손 및 베타-글라이세로포스페이트로 조성된 Low glucose DMEM 배지인 것인, 자궁 유래 성체줄기세포로부터 골세포로 분화시키는 방법
|
13 |
13
제1항 또는 제2항의 자궁 유래 성체줄기세포를 연골세포 분화 유도 배지에서 15 내지 25일간 배양하는 단계를 포함하는, 자궁 유래 성체줄기세포로부터 연골세포로 분화시키는 방법
|
14 |
14
제 13항에 있어서, 상기 연골세포 분화 유도 배지는 ITS premix, 덱사메타손 및 TGF-β로 조성된 High glucose DMEM 배지인 것인, 자궁 유래 성체줄기세포로부터 연골세포로 분화시키는 방법
|