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3차원 스페로이드 배양을 통한 기능 강화 선조직 유래 선줄기세포의 분리 방법(Method for isolating enhanced glandular stem cells from gland tissue through three dimensional spheroid culture)

  • 기술번호 : KST2018002969
  • 담당센터 : 서울서부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-6124-6930
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 3차원 스페로이드 배양을 통한 기능 강화 선조직 유래 선줄기세포의 분리 방법에 관한 것으로, 상세하게는 인간 선(gland) 조직에서 채취한 조직 샘플을 용해 후 3차원 스페로이드 세포배양을 통해 선줄기세포를 분리하는 방법이다. 또한, 본 발명은 분리된 선줄기세포 또는 선조직 혼합 세포주를 마이크로패턴화 된 나노섬유 스케폴드에서 배양하여, 3차원 스페로이드 배양을 통한 기능 강화된 선줄기세포 배양 방법을 제공한다. 더욱 구체적으로는, 스페로이드가 형성되는 나노섬유 기반의 마이크로 영역과 세포의 부착이 일어나지 않는 하이드로젤 기반의 마이크로 영역으로 구성된 스케폴드 상에서 직경 200μm 크기의 3차원 스페로이드 형태의 세포 클러스터를 형성하는 선 세포, 바람직하게는 타액선줄기세포를 배양함으로써, 기능이 강화된 우수한 줄기세포 클러스터를 분리하고 배양해내는 방법에 관한 것이다. 장점은 일반적인 2차원적 세포 분리 및 배양 단계를 거치지 않고 기능이 우수한 선줄기세포의 분리 및 대량 균등 배양을 가능하게 하는 방법에 대한 것이다.
Int. CL C12N 5/071 (2017.12.20) C12N 5/00 (2017.12.20) A61K 35/24 (2017.12.20) A61K 35/22 (2017.12.20) A61K 35/407 (2017.12.20) A61K 35/39 (2017.12.20)
CPC
출원번호/일자 1020170172257 (2017.12.14)
출원인 연세대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2018-0027398 (2018.03.14) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자 10-2016-0113754 (2016.09.05)
관련 출원번호 1020160113754
심사청구여부/일자 Y (2017.12.14)
심사청구항수 7

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 연세대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 서대문구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 임재열 인천광역시 연수구
2 고원건 서울특별시 서초구
3 신현수 인천광역시 서구
4 최정석 서울특별시 마포구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인태백 대한민국 서울 금천구 가산디지털*로 *** 이노플렉스 *차 ***호

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 연세대학교 산학협력단 서울특별시 서대문구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [분할출원]특허출원서
[Divisional Application] Patent Application
2017.12.14 수리 (Accepted) 1-1-2017-1247802-95
2 [출원인변경]권리관계변경신고서
[Change of Applicant] Report on Change of Proprietary Status
2017.12.19 수리 (Accepted) 1-1-2017-1265832-76
3 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2018.01.08 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0016899-08
4 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2018.02.23 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2018-0189473-27
5 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2018.02.23 수리 (Accepted) 1-1-2018-0189474-73
6 등록결정서
Decision to grant
2018.07.23 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0498366-56
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번호 청구항
1 1
(1) 분리된 선조직에 콜라게나아제 타입 1 용액을 첨가하여 상기 선조직을 용해하는 단계;(2) 상기 용해된 선조직을 바닥은 나노섬유 기반의 마이크로 영역, 벽은 세포의 부착이 일어나지 않는 하이드로젤 기반의 마이크로 영역으로 정사각면체 형태의 패터닝으로 구성된 마이크로패턴화 된 나노섬유 스케폴드에서 3차원 스페로이드 배양하는 단계; 및(3) 상기 배양물로부터 선줄기세포를 분리하는 단계를 포함하는 3차원 스페로이드 배양을 통한 선조직 유래 선줄기세포의 분리방법
2 2
삭제
3 3
제1항에 있어서, 상기 마이크로패턴화 된 나노섬유 스케폴드는 100 내지 500 ㎛의 정사각형을 바닥으로 하고, 높이 150 내지 300 ㎛의 벽으로 이루어진 마이크로웰 형태의 3차원 배양용 스캐폴드인 것을 특징으로 하는 3차원 스페로이드 배양을 통한 선조직 유래 선줄기세포의 분리방법
4 4
제3항에 있어서, 상기 마이크로패턴화 된 나노섬유 스케폴드는 200 ㎛×200 ㎛의 정사각형을 바닥으로 하고, 높이 150 내지 300 ㎛의 벽으로 이루어진 마이크로웰 형태인 것을 특징으로 하는 3차원 스페로이드 배양을 통한 선조직 유래 선줄기세포의 분리방법
5 5
제1항에 있어서, 상기 선조직은 타액선, 췌장, 신장 및 간으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 조직인 것을 특징으로 하는 3차원 스페로이드 배양을 통한 선조직 유래 선줄기세포의 분리방법
6 6
제1항에 있어서, 상기 선줄기세포는 줄기세포성 마커인 Lgr5, CD90, CD29, OCT4, Nanog 및 SOX2의 발현이 증가된 것을 특징으로 하는 3차원 스페로이드 배양을 통한 선조직 유래 선줄기세포의 분리방법
7 7
제1항에 있어서, 상기 선줄기세포는 자가복제능을 가지며, 연골세포, 지방세포, 골세포, 선세포 또는 간세포 분화능을 가지는 것을 특징으로 하는 3차원 스페로이드 배양을 통한 선조직 유래 선줄기세포의 분리방법
8 8
제1항, 제3항 내지 제7항 중 어느 한 항의 방법에 따라 분리된 선조직 유래 선줄기세포 또는 이들의 배양액을 유효성분으로 포함하는 선조직 손상 치료용 세포치료제
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1 KR101907534 KR 대한민국 FAMILY

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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 미래창조과학부 연세대학교 산학협력단 원천기술개발사업/ 바이오·의료기술개발사업 (줄기세포 연구사업) LGR5 타액선 성체줄기세포의 3D 스페로이드 형성 및 Wnt signal 강화를 통한 줄기세포 기능 촉진 기술 개발