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서열번호 5의 염기 서열로 이루어진 인간 유래 파라옥소나제 1(PON1) 유전자 및 서열번호 6의 염기 서열로 이루어진 인간 IgG-Fc(human immunoglobuline G-Fc, hFc) 유전자가 결합하여 이루어진 PON1-hFc 유전자 포함하는 것을 특징으로 하는 재조합 발현벡터
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제1항에 있어서,상기 재조합 발현벡터는 상기 PON1-hFc 유전자 서열의 업스트림에 황산구리(CuSO4)에 의해 활성이 유도되는 서열번호 2의 염기 서열을 가지는 메탈로싸이오닌 프로모터(metallothionein promoter) 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 재조합 발현벡터
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제1항에 있어서,상기 재조합 발현벡터는 도 1에 기재된 pMTa-hygro-PON1-hFc 벡터로 서열번호 1로 표시되는 염기 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 재조합 발현벡터
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제1항에 있어서,상기 파라옥소나제 1(PON1) 유전자는 서열번호 13으로 표시되는 파라옥소나제 1의 16번 내지 355번 아미노산 서열을 코딩하는 염기 서열인 것을 특징으로 하는 재조합 발현벡터
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제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 재조합 발현벡터로 형질전환되어 PON1-hFc 융합 단백질을 발현하는 것을 특징으로 초파리 S2 세포주
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(a) 초파리 S2 세포주를 목적 단백질의 발현을 위한 숙주로 하고, 서열번호 5의 염기 서열로 이루어진 인간 유래 파라옥소나제 1(PON1) 유전자 및 서열번호 6의 염기 서열로 이루어진 인간 IgG-Fc(immunoglobuline G-Fc) 유전자가 결합하여 이루어진 PON1-hFc 유전자를 포함하는 재조합 발현벡터를 제조하는 단계;(b) 상기 제조된 재조합 발현벡터를 초파리 S2 세포주에 형질전환하는 단계;(c) 상기 (b) 단계에서 형질전환된 초파리 S2 세포주를 배양하는 단계;(d) 상기 (c) 단계에서 배양된 초파리 S2 세포주에 황산구리(CuSO4)를 첨가하여 배양하는 단계; 및(e) 상기 (d) 단계의 배양액으로부터 발현된 목적 단백질인 PON1-hFc 융합 단백질를 분리 및 정제하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 PON1-hFc 융합 단백질의 생산방법
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제6항에 있어서,상기 재조합 발현벡터는 서열번호 1로 표시되는 염기 서열로 이루어진 pMTa-hygro-PON1-hFc 벡터인 것을 특징으로 하는 PON1-hFc 융합 단백질의 생산방법
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제6항에 있어서,상기 (e) 단계는 상기 PON1-hFc 융합 단백질을 컬럼 크로마토그래피를 통해 분리 및 정제하는 것을 특징으로 하는 PON1-hFc 융합 단백질의 생산방법
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