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세포를 포함하는 신경도관 제조방법(Preparing method of nerve conduits including cells)

  • 기술번호 : KST2018006243
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 세포를 포함하는 신경도관 제조방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 미세채널에 미세기공이 형성된, 세포를 포함하는 다공성 신경도관 제조방법에 관한 것이다. 본 발명에 따라 제조된 세포를 포함하는 신경도관은 신경에 대한 in vitro 및 in vivo 연구에 유용하게 사용될 수 있다.
Int. CL C12N 5/079 (2010.01.01) C12N 5/071 (2010.01.01)
CPC
출원번호/일자 1020170140473 (2017.10.26)
출원인 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2018-0050221 (2018.05.14) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020160146706   |   2016.11.04
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2017.10.26)
심사청구항수 16

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단 대한민국 충청남도 천안시 동남구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 현정근 충청남도 천안시 동남구
2 김종완 충청남도 천안시 서북구
3 손영진 *** Orchard Ct,
4 김민수 충청남도 천안시 동남구
5 안홍선 충청남도 천안시 서북구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인 다해 대한민국 서울시 서초구 서운로**, ***호(서초동, 중앙로얄오피스텔)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단 충청남도 천안시 동남구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2017.10.26 수리 (Accepted) 1-1-2017-1062004-38
2 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2018.08.28 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0583877-47
3 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2018.10.29 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2018-1065106-46
4 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2018.10.29 수리 (Accepted) 1-1-2018-1065107-92
5 등록결정서
Decision to grant
2019.02.18 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0117934-34
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
하기 단계를 포함하는, 세포를 포함하는 다공성 신경도관의 제조방법으로,a) 소수성 생체적합성 고분자를 수혼화성 유기용매에 용해시켜 신경도관용 고분자 재료를 준비하는 단계;b) 상기 신경도관용 고분자 재료를 친수성 용액에 침지시켜서 상기 고분자 재료로부터 상기 유기용매를 분리시킴으로써, 상기 소수성 고분자에 미세기공이 형성된, 미세채널 구조를 가지는 다공성 고분자로 이루어진 신경도관을 얻는 단계;c) 상기 신경도관을 챔버(chamber)에 삽입하여, 신경도관이 삽입되어 있는 장치를 제작하는 단계;d) 상기 신경도관이 삽입되어 있는 장치의 상부에 펌프를 튜브로 연결하고, 하부에 배양배지를 포함하는 배지 공급용기를 튜브로 연결하는 단계;e) 상기 배지 공급용기 내 배양배지에 세포를 투입하는 단계;f) 상기 d)의 펌프를 이용하여 e)의 배지 공급용기 내 배양배지를 신경도관이 삽입되어 있는 장치로 공급함으로써 c)의 신경도관에 세포를 시딩(seeding)하는 단계; 그리고g) 상기 d)의 펌프를 이용하여 e)의 배지 공급용기 내 배양배지를 f)의 세포가 시딩된 신경도관으로 공급하여 세포를 배양하는 단계;를 포함하고,상기 미세채널을 구조를 가지는 신경도관은 수직으로 배치되어 배양배지가 중력에 의해 신경도관의 상단에서 하단으로 흐르며,상기 b) 단계의 미세기공이 형성된, 미세채널 구조를 가지는 다공성 고분자로 이루어진 신경도관은,상부 및 하부 채널을 갖는 용기 내에 복수 개의 유리섬유를 삽입하고;상기 복수 개의 유리섬유가 삽입된 용기 내로, 소수성 생체적합성 고분자와 수혼화성 유기용매로 구성된 신경도관용 고분자 재료를 주입하고;상기 상부 채널에 진공을 인가하여 상기 유리섬유 사이로 상기 고분자 재료를 침투시키고;상기 용기로부터 상기 고분자 재료가 침투된 유리섬유를 분리시키고; 그리고상기 분리된 유리섬유를 친수성 용액에 침지시켜 상기 유리섬유를 용해하는; 단계를 포함하고,상기 신경도관용 고분자 재료는 상기 수혼화성 유기용매에 상기 소수성 생체 적합성 고분자가 10 내지 40 중량/부피%(w/v%) 농도로 용해된 것이고,상기 유리섬유를 용해하는 단계에서, 상기 소수성 생체적합성 고분자가 경화되면서 미세채널을 형성하고; 그리고 상기 수혼화성 유기용매가 상기 친수성 용액과 섞이면서 상기 소수성 고분자로부터 빠져나와 상기 소수성 고분자로 이루어진 미세채널에 미세기공이 형성되는 것인, 세포를 포함하는 다공성 신경도관의 제조방법
2 2
제1항에 있어서, 상기 다공성 신경도관은 중추신경 또는 말초신경의 재생을 위한 것인, 세포를 포함하는 다공성 신경도관의 제조방법
3 3
제 1항에 있어서, 상기 a) 단계의 소수성 생체적합성 고분자는, 폴리락트산(polylactic acid, PLA), 폴리-L/D-락타이드(poly-L/D-lactide, PLDA), 폴리-L-락트산(poly-L-Lactic Acid, PLLA), 폴리글리콜산(polyglycolic acid, PGA), 폴리디옥산온(polydioxanone), 폴리하이드록시부틸레이트(polyhydroxybutyrate, PHB), 폴리하이드록시알카노에이트(polyhydroxyalkanoate, PHA) 폴리락트산-글리콜산 공중합체(poly(lactic-co-glycolic acid), PLGA), 폴리카프로락톤(polycaprolactone, PCL), 이들의 공중합체 및 이들의 혼합물로 이루어지는 군으로부터 선택되고;상기 a) 단계의 수혼화성 유기용매(water miscible solvent)는, 에탄올(ethanol), 이소프로필 알코올(isopropyl alcohol), N-메틸-2-피롤리돈(N-Methyl-2-pyrrolidone), 2-피롤리돈(2-pyrrolidone), 글리세롤(glycerol), 프로필렌 글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜(polyethylene glycol), 테트라글리콜(tetraglycol), 글리세롤 포르말(glycerol formal), 에틸 아세테이트(ethyl acetate), 에틸 락테이트(ethyl lactate), 디에틸 카보네이트(diethyl carbonate), 프로필렌 카보네이트(proplyene carbonate), 아세톤(acetone), 메틸 에틸 케톤(methyl ethyl ketone), 디메틸 설폭사이드(dimethyl sulfoxide), 디메틸 설폰(dimethylsulfone), 테트라하이드로푸란(tetrahydrofurane), 테트라하이드로퍼푸릴 알코올(tetrahydrofurfuryl alcohol), 석시닉 애씨드 디에틸 에스테르(succinic acid diethyl ester), 트리에틸 시트레이드(triethyl citrate), 디부틸 세바케이트(dibutyl sebacate), 디메틸 아세트아미드(dimethyl acetamide), 락틱 애씨드 부틸 에스테르(lactic acid butyl ester), 프로필렌 글리콜 디아세테이트(propylene glycol diacetate), 디에틸렌 글리콜 모노 에틸 에테르(diethylene glycol mono ethyl ether) 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인, 세포를 포함하는 다공성 신경도관의 제조방법
4 4
제 1항에 있어서,상기 a) 단계의 신경도관용 고분자 재료는 상기 수혼화성 유기용매에 상기 소수성 생체적합성 고분자가 10 내지 40 중량/부피%(w/v%) 농도로 용해된 것인, 세포를 포함하는 다공성 신경도관의 제조방법
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삭제
6 6
제 1항에 있어서, 상기 하부 채널은 상부 채널보다 작은 직경을 가지며, 상기 용기는 불연속적인 각도로 경사지는 것인, 세포를 포함하는 다공성 신경도관의 제조방법
7 7
제 1항에 있어서, 상기 신경도관용 고분자 재료는 상온에서 용액 상태인, 세포를 포함하는 다공성 신경도관의 제조방법
8 8
제 1항에 있어서, 상기 세포를 포함하는 다공성 신경도관의 제조방법은, 상기 유리섬유를 용해하는 단계 이후에 다음 단계를 더 포함함: 상기 유리섬유를 용해한 후 형성된 신경도관을 액체질소로 냉각시키고; 그리고 상기 냉각된 신경도관을 절단하여 성형하는 단계
9 9
제 1항에 있어서, 상기 용기는 상기 신경도관용 고분자 재료의 침투가 육안으로 확인될 수 있는 투명 재질로 이루어진 것인, 세포를 포함하는 다공성 신경도관의 제조방법
10 10
제 1항에 있어서, 상기 진공의 인가는 복수 회 반복하여 진행되는 것인, 세포를 포함하는 다공성 신경도관의 제조방법
11 11
제 1항에 있어서, 상기 e) 단계의 세포는 신경세포인, 세포를 포함하는 다공성 신경도관의 제조방법
12 12
제 11항에 있어서, 상기 신경세포는 슈반세포(schwann cell), 성상세포(astrocyte), 희소돌기아교세포(oligodendrocyte)로 이루어지는 그룹으로부터 선택되는 어느 하나 이상인, 세포를 포함하는 다공성 신경도관의 제조방법
13 13
제 1항에 있어서, 상기 f) 또는 g) 단계의 배양배지의 유속은 30 내지 60 μl/min인, 세포를 포함하는 다공성 신경도관의 제조방법
14 14
제 1항에 있어서, 상기 신경도관이 삽입되어 있는 장치에 세포를 시딩하여 배양함으로써 세포가 신경도관 내부의 미세채널 내부에서 성장하는 것인, 세포를 포함하는 다공성 신경도관의 제조방법
15 15
제 1항에 따른 방법에 의하여 제조된, 미세기공이 형성된 미세채널 구조를 가지는, 세포를 포함하는 다공성 신경도관
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제 15항에 있어서, 상기 신경도관은 유리섬유가 용기의 축방향으로 삽입됨에 따라 신경도관의 축 방향으로 미세채널이 형성된 것인, 세포를 포함하는 다공성 신경도관
17 17
제 15항에 있어서, 상기 신경도관은, 수혼화성 유기용매 및 소수성 생체적합성 고분자로 구성된 신경도관용 고분자 재료가 친수성 용액과 반응하여 상기 소수성 생체적합성 고분자가 경화되면서 미세채널을 형성하고; 그리고 상기 수혼화성 유기용매가 상기 친수성 용액과 섞이면서 상기 소수성 생체적합성 고분자로부터 빠져나와 상기 소수성 고분자로 이루어진 미세채널에 미세기공이 형성되는 것인, 세포를 포함하는 다공성 신경도관
18 18
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2 미래창조과학부 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단 중견연구자지원 대동물 척수손상모델을 이용한 줄기세포 융합치료
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4 교육부 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단 이공학개인기초연구지원 수용성 인산 유리 섬유를 이용한 10 마이크로미터급 미세 다중채널을 갖는 3 차원 생분해 나노 다공성 신경도관의 개발 및 신경손상 모델에의 적용
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