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DNA 생체표지자의 초민감성 정량 분석 방법 및 장치(METHOD AND APPARATUS FOR ULTRASENSITIVE QUANTIFICATION OF DNA BIOMARKER)

  • 기술번호 : KST2018006958
  • 담당센터 : 대구기술혁신센터
  • 전화번호 : 053-550-1450
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 DNA 생체표지자의 초민감성 정량 분석 방법 및 장치에 관한 것으로서, 보다 구체적으로 본 발명은 원자간력 현미경을 이용한 표적 DNA 정량 분석 방법 및 정량 분석 키트를 제공한다. 본 발명의 DNA 정량 분석 방법은 기존의 방법으로 수행하기 어려웠던 극미량의 표적 DNA를 원자간력 현미경의 결합힘-지도화를 이용하여 표적 DNA의 증폭, 변형, 형광 표지 없이 정량 분석할 수 있다는 장점이 있다. 특히, 표적 DNA를 포집하기 위해 생성하는 프로브 DNA 스팟 크기의 최적화를 통해 10개 이하 표적 DNA 분자를 다양한 기질 위에서 정량 분석할 수 있는 방법을 도입하였다. 이러한 본 발명의 초고민감도 DNA 분석 방법을 질병의 진단 및 치료 예후 관찰 등에 적용하면 질병의 조기 진단뿐 아니라 수술 및 치료 후 경과를 정확히 모니터링 하는데 활용할 수 있을 것으로 기대된다.
Int. CL C12Q 1/68 (2018.01.01)
CPC C12Q 1/6837(2013.01) C12Q 1/6837(2013.01) C12Q 1/6837(2013.01)
출원번호/일자 1020160152895 (2016.11.16)
출원인 포항공과대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2018-0055977 (2018.05.28) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 공개
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호 1020180142621;
심사청구여부/일자 Y (2016.11.16)
심사청구항수 16

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 포항공과대학교 산학협력단 대한민국 경상북도 포항시 남구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 박준원 대한민국 서울특별시 서초구
2 이윤희 대한민국 서울특별시 강동구
3 김영규 대한민국 *** Riverside Drive
4 이동규 대한민국 부산광역시 서구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인이룸리온 대한민국 서울특별시 서초구 사평대로 ***, *층 (반포동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
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번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2016.11.16 수리 (Accepted) 1-1-2016-1120114-67
2 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment		 2016.12.21 수리 (Accepted) 1-1-2016-1255852-65
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2017.09.13 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2017.11.29 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2017-0179338-73
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2017.12.11 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0866987-31
6 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2018.02.12 수리 (Accepted) 1-1-2018-0152819-76
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2018.03.12 수리 (Accepted) 1-1-2018-0245615-17
8 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2018.03.12 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2018-0245616-63
9 거절결정서
Decision to Refuse a Patent		 2018.07.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0512301-29
10 [명세서등 보정]보정서(재심사)
Amendment to Description, etc(Reexamination)		 2018.08.30 보정승인 (Acceptance of amendment) 1-1-2018-0862681-71
11 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2018.08.30 수리 (Accepted) 1-1-2018-0862680-25
12 거절결정서
Decision to Refuse a Patent		 2018.09.18 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0643160-16
13 [법정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
 2018.10.16 수리 (Accepted) 1-1-2018-1019464-53
14 법정기간연장승인서
 2018.10.19 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2018-0162254-52
15 [분할출원]특허출원서
[Divisional Application] Patent Application		 2018.11.19 수리 (Accepted) 1-1-2018-1149509-80
16 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.11.20 수리 (Accepted) 4-1-2019-5243581-27
17 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.11.22 수리 (Accepted) 4-1-2019-5245997-53
18 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.11.25 수리 (Accepted) 4-1-2019-5247115-68
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
바디의 말단에 형성된 팁 및 상기 팁의 표면에 표적 DNA와 상보적으로 결합할 수 있는 염기서열을 포함하는 검출 DNA가 고정된 원자간력 현미경용 캔틸레버; 및 표적 DNA와 상보적으로 결합할 수 있는 염기서열을 포함하는 프로브 DNA가 고정된 인쇄 기판을 포함하는 표적 DNA 정량 분석 키트
2 2
제 1항에 있어서,상기 프로브 DNA는 기판 위에 지름 100 nm ~ 10 μm의 스팟으로 인쇄된 것을 특징으로 하는 표적 DNA 정량 분석 키트
3 3
제 1항에 있어서,상기 프로브 DNA는 3' 말단에 아민기를 포함하는 것을 특징으로 하는 표적 DNA 정량 분석 키트
4 4
제 1항에 있어서,상기 인쇄 기판은 유리, 금속, 플라스틱, 실리콘, 실리케이트, 세라믹, 반도체, 합성 유기 금속, 합성 반도체 및 합금으로 이루어진 군에서 선택되는 1 이상인 것을 특징으로 하는 표적 DNA 정량 분석 키트
5 5
제 1항에 있어서,상기 검출 DNA는 5' 말단에 아민기를 포함하는 것을 특징으로 하는 표적 DNA 정량 분석 키트
6 6
제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 있어서,상기 키트는 원자간력 현미경을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 표적 DNA 정량분석 키트
7 7
인쇄 기판을 준비하는 단계;상기 인쇄 기판에 10 ~ 900 μm2 면적, 10 ~ 900 nm 깊이의 패턴을 식각하는 단계; 및상기 식각된 패턴에 표적 DNA와 상보적으로 결합할 수 있는 염기서열을 포함하는 프로브 DNA 수용액을 떨어뜨려서 프로브 DNA 스팟을 인쇄하는 단계를 포함하는 표적 DNA 정량 분석용 인쇄 기판의 제조방법
8 8
제 7항에 있어서,상기 프로브 DNA 인쇄 단계는 기판 위에 프로브 DNA 수용액을 지름 100 nm ~ 10 μm의 스팟으로 인쇄하는 것을 특징으로 하는 표적 DNA 정량 분석용 인쇄 기판의 제조방법
9 9
제 7항에 있어서,상기 프로브 DNA는 3' 말단에 아민기를 포함하는 것을 특징으로 하는 표적 DNA 정량 분석용 인쇄 기판의 제조방법
10 10
제 7항에 있어서,상기 인쇄 기판은 유리, 금속, 플라스틱, 실리콘, 실리케이트, 세라믹, 반도체, 합성 유기 금속, 합성 반도체 및 합금으로 이루어진 군에서 선택되는 1 이상인 것을 특징으로 하는 표적 DNA 정량 분석용 인쇄 기판의 제조방법
11 11
제 7항에 있어서,상기 기판을 식각한 후에 기판 표면에 아민 작용기를 도입하는 단계 및 아민 작용기와 선택적으로 공유 결합하는 링커를 결합시키는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 표적 DNA 정량 분석용 인쇄 기판의 제조방법
12 12
(a) 표적 DNA가 포함된 시료를 상기 표적 DNA와 상보적으로 결합할 수 있는 염기서열을 포함하는 프로브 DNA 인쇄 기판에 접촉하여 DNA/DNA 이합체를 형성하는 혼성화 단계; (b) 상기 표적 DNA와 상보적으로 결합할 수 있는 염기서열을 포함하는 검출 DNA가 고정된 원자간력 현미경용 캔틸레버를 상기 DNA/DNA 이합체가 형성된 인쇄 기판에 접촉하여 개별 프로브 DNA 스팟 내 결합힘-지도화를 수행하는 단계; 및(c) 상기 결합힘-지도 상의 결합힘이 관찰되는 스팟에서 상기 프로브 DNA와 표적 DNA의 DNA/DNA 이합체의 존재를 검출하고, 공간적 분포를 분석하는 단계를 포함하는 표적 DNA 정량 분석 방법
13 13
제 12항에 있어서,상기 표적 DNA가 포함된 시료는 표적 DNA가 10 zM ~ 1 aM 농도로 포함된 것을 특징으로 하는 표적 DNA 정량 분석 방법
14 14
제 12항에 있어서,상기 프로브 DNA 인쇄 기판은 기판 표면에 표적 DNA를 지름 100 nm ~ 10 μm의 스팟으로 형성하여 고정시킨 것인 표적 DNA 정량 분석 방법
15 15
제 12항에 있어서,상기 (b) 단계의 결합힘-지도화 수행 단계는 상기 원자간력 현미경용 캔틸레버가 접촉한 위치에서 상기 검출 DNA와 표적 DNA 사이의 상호작용으로 나타나는 특이적인 힘-거리 곡선을 측정함으로써 수행되는 것을 특징으로 하는 표적 DNA 정량 분석 방법
16 16
제 12항에 있어서,상기 (c) 단계의 공간적 분포 분석은 시료 내 결합힘이 관찰되는 DNA/DNA 이합체의 개수를 카운팅하여 수행되는 것인 표적 DNA 정량 분석 방법
17 17
제 16항에 있어서,상기 DNA/DNA 이합체의 개수를 카운팅하는 방법은 동일 프로브 DNA 스팟 내에서 연속적으로 복수 개의 결합힘-지도를 얻는 단계; 상기 복수 개의 결합힘-지도를 겹쳤을 때 2 이상의 인접한 픽셀에서 특이적인 결합힘이 관찰되는 클러스터를 분리하는 단계;상기 분리된 클러스터 중 동일 픽셀에서 2회 이상 반복적으로 특이적인 결합힘이 관찰되는 클러스터를 분리하는 단계; 및 상기 복수 개의 픽셀이 겹쳐서 생기는 픽셀 클러스터 중 직경이 단일 표적 DNA 클러스터 직경 이상의 크기를 갖는 클러스터의 개수를 카운팅하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 표적 DNA 정량 분석 방법
18 18
제 12항에 있어서,상기 (c) 단계 이후에 표적 DNA의 농도를 결정하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 표적 DNA 정량 분석 방법
지정국 정보가 없습니다
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1 KR1020180125934 KR 대한민국 FAMILY
2 US20180135111 US 미국 FAMILY

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1 US2018135111 US 미국 DOCDBFAMILY
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 미래창조과학부 포항공과대학교 산학협력단 뇌과학원천기술개발 후각상피신경세포 기반 신경발달질환 진단 기술 개발 연구
2 미래창조과학부 포항공과대학교 산학협력단 첨단융합기술개발사업(생체모사형메카트로닉스융합기술개발) 나노기술을 이용한 MICRORNA 초민감 분석