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하기 단계를 포함하는, 인간 만능줄기세포로부터 중간엽 줄기세포로의 분화 유도 생산율을 증가시키는 방법:a) 이종 지지체(xeno feeder) 없이 인간 만능줄기세포를 bFGF (basic fibroblast growth factor) 가 첨가되지 않은 배지에서 36 시간 내지 48 시간 부유배양하여 세포구체(cell aggregate)를 형성시키는 단계;b) 상기 36 시간 내지 48 시간 배양으로 형성된 세포구체를 bFGF 및 FBS (fetal bovine serum)가 첨가되지 않은 배지에서 배양하여 중간엽 줄기세포로 분화를 유도하는 단계; 및c) 상기 중간엽 줄기세포의 동일성을 유지하면서 증식 배양시키는 단계로,상기 중간엽 줄기세포는 지방세포, 골세포, 연골세포, 근육세포, 신경세포, 및 심근세포를 포함하는 세포로 분화할 수 있는 다능성(pluripotency)을 보유한 중간엽 줄기세포이고, 상기 중간엽 줄기세포는 CD73+, CD44+, CD34- 및 CD45- 인 것을 특징으로 하는, 방법
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제1항에 있어서,상기 b) 단계는 6일 이내에 중간엽 줄기세포로 분화를 유도하는 것을 특징으로 하는, 방법
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제1항에 있어서,상기 c) 단계의 중간엽 줄기세포는 FBS가 첨가되지 않은 배지에서 배양되는 것을 특징으로 하는, 방법
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제1항에 있어서, 상기 a) 단계의 배지는 DMEM(Dulbecco’s modified Eagle’s medium), 아스코르브산, 탄산수소나트륨, 셀레늄, 트랜스페린 및 인슐린으로 이루어진 첨가물을 포함하는 배지인 것을 특징으로 하는, 방법
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제1항에 있어서, a) 단계의 인간 만능줄기세포는 이종 지지체(xeno feeder) 없이 비토넥틴(vitonectin)을 코팅한 배양접시에서 배아줄기세포 배지를 사용해 미분화 상태로 유지되던 인간 만능 줄기세포를 분리한 것을 특징으로 하는, 방법
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제5항에 있어서, 상기 배아줄기세포 배지는 DMEM(Dulbecco’s modified Eagle’s medium), 아스코르브산, 탄산수소나트륨, 셀레늄, 트랜스페린, 인슐린, TGFβ1 및 FGF로 이루어진 첨가물을 포함하는 배지인 것을 특징으로 하는, 방법
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하기를 포함하는, 인간 만능줄기세포로부터 중간엽 줄기세포로의 분화 유도 생산율 증가용 배지 세트:a) 인간 만능줄기세포를 부유배양하여 세포구체(cell aggregate)를 형성하기 위한 bFGF (basic fibroblast growth factor) 가 첨가되지 않은 이종 지지체(xeno feeder) 없는 배지;b) 세포구체를 중간엽 줄기세포로 분화유도하기 위한 bFGF 및 FBS (fetal bovine serum)가 첨가되지 않은 배지; 및c) 상기 중간엽 줄기세포의 동일성을 유지하면서 증식 배양하기 위한 배지, 단, 상기 중간엽 줄기세포는 지방세포, 골세포, 연골세포, 근육세포, 신경세포, 및 심근세포를 포함하는 세포로 분화할 수 있는 다능성(pluripotency)을 보유한 중간엽 줄기세포이고, 상기 중간엽 줄기세포는 CD73+, CD44+, CD34- 및 CD45- 인 것을 특징으로 함
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