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시티딘 디아미나제, 표적 특이적 RNA-가이드 뉴클레아제, 및 가이드 RNA를 포함하는 리보핵산단백질을 포함하는 포유 동물 배아 세포의 염기 교정용 조성물을 인간을 제외한 포유 동물의 배아 세포에 재조합 벡터를 사용하지 않고 전기천공에 의하여 직접 주입하는 단계를 포함하는, 인간을 제외한 포유 동물 배아 세포의 염기 교정 방법
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제1항에 있어서, 상기 염기 교정은 표적 부위에 종료코돈을 생성시키는 것인, 인간을 제외한 포유 동물 배아 세포의 염기 교정 방법
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제1항에 있어서, 상기 표적 특이적 RNA-가이드 뉴클레아제는 Cas9 단백질 또는 Cpf1 단백질인, 인간을 제외한 포유 동물 배아 세포의 염기 교정 방법
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제1항에 있어서, 상기 RNA-가이드 뉴클레아제는 Cas9 니카아제, 촉매활성 결핍 Cas9 단백질, 또는 야생형과 상이한 PAM 서열을 인식하는 Cas9 단백질인, 인간을 제외한 포유 동물 배아 세포의 염기 교정 방법
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제4항에 있어서, 상기 표적 특이적 RNA-가이드 뉴클레아제는 스트렙토코커스 피요젠스 (Streptococcus pyogenes) 유래의 Cas9 단백질의 (1) D10, H840, 또는 D10 및 H840이 야생형과 다른 아미노산으로 치환되거나;(2) D1135, R1335, 및 T1337로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상이 야생형과 다른 아미노산으로 치환되거나; 또는(3) D10 및 H840로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상 및 D1135, R1335, 및 T1337로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상이 야생형과 다른 아미노산으로 치환된 것인, 인간을 제외한 포유 동물 배아 세포의 염기 교정 방법
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제1항에 있어서, 상기 가이드 RNA는 CRISPR RNA (crRNA) 및 trans-activating crRNA (tracrRNA)를 포함하는 이중 RNA, 또는 단일 가이드 RNA (sgRNA)인, 인간을 제외한 포유 동물 배아 세포의 염기 교정 방법
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제1항에 있어서, 상기 시티딘 디아미나제는 APOBEC (apolipoprotein B mRNA editing enzyme, catalytic polypeptide-like), AID (activation-induced cytidine deaminase), tadA (tRNA-specific adenosine deaminase) 또는 이들이 조합인, 인간을 제외한 포유 동물 배아 세포의 염기 교정 방법
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제1항 내지 제7항 중 어느 항에 있어서, 상기 포유 동물 배아 세포의 염기 교정용 조성물은 시티딘 디아미나제 코딩 mRNA, 표적 특이적 RNA-가이드 뉴클레아제 코딩 mRNA, 및 가이드 RNA의 혼합물을 포함하는 것인, 인간을 제외한 포유 동물 배아 세포의 염기 교정 방법
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제1항 내지 제7항 중 어느 항에 있어서, 상기 포유 동물 배아 세포의 염기 교정용 조성물은 시티딘 디아미나제, 표적 특이적 RNA-가이드 뉴클레아제, 및 가이드 RNA가 복합체를 형성하는 리보핵산단백질을 포함하는 것인, 인간을 제외한 포유 동물 배아 세포의 염기 교정 방법
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제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 우라실 DNA 글리코실라제 억제제 (uracil DNA glycosylase inhibitor: UGI) 또는 이의 코딩 유전자, 핵위치화서열 (NLS) 또는 이의 코딩 유전자, 또는 이들 모두를 추가로 포함하는, 인간을 제외한 포유 동물 배아 세포의 염기 교정 방법
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시티딘 디아미나제, 표적 특이적 RNA-가이드 뉴클레아제, 및 가이드 RNA를 포함하는 리보핵산단백질을 포함하는 포유 동물 배아 세포의 염기 교정용 조성물이 인간을 제외한 포유 동물의 배아 세포에 재조합 벡터를 사용하지 않고 전기천공에 의하여 직접 주입된, 인간을 제외한 포유 동물의 분리된 유전자 변형 배아 세포
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제16항에 있어서, 상기 염기 교정용 조성물은 우라실 DNA 글리코실라제 억제제 (uracil DNA glycosylase inhibitor: UGI) 또는 이의 코딩 유전자, 핵위치화서열 (NLS) 또는 이의 코딩 유전자, 또는 이들 모두를 추가로 포함하는 것인, 인간을 제외한 포유 동물의 분리된 유전자 변형 배아 세포
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제16항에 있어서, 상기 염기 교정은 표적 부위에 종료코돈을 생성시키는 것인, 인간을 제외한 포유 동물의 분리된 유전자 변형 배아 세포
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제16항의 인간을 제외한 포유 동물의 분리된 유전자 변형 배아 세포를 인간을 제외한 포유 동물 위탁모 난관에 이식하여 발생시킨, 인간을 제외한 유전자 변형 포유 동물
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제16항의 인간을 제외한 포유 동물의 분리된 유전자 변형 배아 세포를 인간을 제외한 포유 동물 위탁모 난관에 이식하는 단계를 포함하는, 인간을 제외한 유전자 변형 포유 동물의 제조 방법
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