맞춤기술찾기

홈으로 가기
맞춤기술찾기
이전대상기술
프린트하기

이전대상기술

중간엽 줄기세포의 제조방법

  • 기술번호 : KST2018009690
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
상담신청 PDF 받기
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 인간 다능성 줄기세포로부터 중간엽 줄기세포를 제조하는 방법 및 상기 방법으로 제조된 중간엽 줄기세포에 관한 것이다. 본 발명에 따라 제조된 중간엽 줄기세포는 다양한 질환 또는 장애의 치료를 가능하도록 한다. 당뇨, 골관절염 및 파킨슨병 등 다양한 질환에 치료를 위하여 이식가능한 세포 및 조직 재료를 제공할 수 있다.
Int. CL C12N 5/0775 (2010.01.01) C12N 5/073 (2010.01.01) A61K 35/28 (2015.01.01)
CPC
출원번호/일자 1020170181510 (2017.12.27)
출원인 의료법인 성광의료재단, 차의과학대학교 산학협력단
등록번호/일자 10-2169122-0000 (2020.10.16)
공개번호/일자 10-2018-0078160 (2018.07.09) 문서열기
공고번호/일자 (20201023) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020160182882   |   2016.12.29
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2017.12.27)
심사청구항수 56

출원인

번호, 이름, 국적, 주소의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 인명정보 - 출원인 표입니다.
번호 이름 국적 주소
1 의료법인 성광의료재단 대한민국 서울특별시 강남구
2 차의과학대학교 산학협력단 대한민국 경기도 포천시 해룡로

발명자

번호, 이름, 국적, 주소의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 인명정보 - 발명자 표입니다.
번호 이름 국적 주소
1 이동율 서울특별시 노원구
2 전성민 서울특별시 송파구
3 이정은 서울특별시 노원구

대리인

번호, 이름, 국적, 주소의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 인명정보 - 대리인 표입니다.
번호 이름 국적 주소
1 리앤목특허법인 대한민국 서울 강남구 언주로 **길 **, *층, **층, **층, **층(도곡동, 대림아크로텔)

최종권리자

번호, 이름, 국적, 주소의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 인명정보 - 최종권리자 표입니다.
번호 이름 국적 주소
1 의료법인 성광의료재단 서울특별시 강남구
2 차의과학대학교 산학협력단 경기도 포천시 해룡로
번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2017.12.27 수리 (Accepted) 1-1-2017-1300586-05
2 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2018.06.19 수리 (Accepted) 4-1-2018-5112884-83
3 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2019.01.11 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0029268-47
4 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2019.03.11 수리 (Accepted) 1-1-2019-0249179-39
5 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2019.04.01 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2019-0334800-68
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2019.04.01 수리 (Accepted) 1-1-2019-0334799-09
7 거절결정서
Decision to Refuse a Patent		 2019.08.12 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0578989-79
8 [법정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
 2019.09.11 수리 (Accepted) 1-1-2019-0937741-94
9 법정기간연장승인서
 2019.09.19 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2019-0151302-33
10 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2019.10.14 수리 (Accepted) 1-1-2019-1045406-15
11 [명세서등 보정]보정서(재심사)
Amendment to Description, etc(Reexamination)		 2019.10.14 보정승인 (Acceptance of amendment) 1-1-2019-1045407-50
12 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2019.11.07 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0807191-68
13 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2020.01.07 수리 (Accepted) 1-1-2020-0017497-37
14 보정요구서
Request for Amendment		 2020.01.09 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2020-0005564-66
15 [출원서 등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment		 2020.01.13 수리 (Accepted) 1-1-2020-0035751-52
16 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2020.02.07 수리 (Accepted) 1-1-2020-0132498-03
17 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2020.03.09 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2020-0249417-25
18 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2020.03.09 수리 (Accepted) 1-1-2020-0249416-80
19 등록결정서
Decision to Grant Registration		 2020.07.24 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2020-0502852-33
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
a) 인간 다능성 줄기세포(hPSC)를 생성시키는 단계;b) 상기 인간 다능성 줄기세포를 1일 내지 14일간 배양하여 배아체(EB)로 형성시키는 단계; 및c) 상기 배아체를 배양하여 중간엽 줄기세포(MSC)로 제조하는 단계를 포함하는 중간엽 줄기세포의 제조방법으로서, 상기 c) 단계는 bFGF가 제외된 배지에서 EB를 배양한 후 TGF-β 저해제를 첨가하여 10일 내지 18일간 배양하는 단계; 고포도당 조건인 25mM의 농도의 포도당보다 낮은 저포도당 조건에서 상기 EB를 12일 내지 20일간 배양하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 제조방법
2 2
제1항에 있어서, 상기 인간 다능성 줄기세포는 핵 이식 다능성 줄기세포(NT-hPSC), 반수성체-유래 다능성 줄기세포(pn-hPSC), 역분화 만능 줄기세포(iPSC), 또는 배아줄기세포(ESC)인 것을 특징으로 하는 제조방법
3 3
제1항에 있어서, 상기 a) 단계는 동형접합 세포로부터 핵을 분리하여 핵 이식 인간 다능성 줄기세포(NT-hPSC)를 생성시키는 단계이며,a) 단계 전에 복수의 기증자(donation) 조직으로부터 동형접합(Homozygous) 여부를 스크리닝하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법
4 4
제3항에 있어서, 상기 스크리닝은 HLA(human leukocyte antigen)-A, HLA-B, HLA-DR의 유전자가 동형접합인 것을 특징으로 하는 제조방법
5 5
제1항에 있어서, 상기 a) 단계는 핵 이식 인간 다능성 줄기세포(NT-hPSC)를 생성시키는 단계이며,상기 a)단계는, 난모세포의 핵을 제거하는 단계;하나 이상의 공여체 세포의 하나 이상의 핵을 첨가하여 핵 이식된 (NT) 난모세포를 생성하는 단계;포스트-활성화 배지에서 인큐베이션하여 상기 NT 난모세포를 활성화하는 단계;상기 활성화된 NT 난모세포로부터 배반포를 생성하는 단계; 및배반포로부터 내세포괴 (ICM) 세포를 분리하는 단계로서, 상기 ICM 세포는 NT-hPSC 세포로 더 배양할 수 있는 것인 단계를 포함하는 제조방법
6 6
제5항에 있어서, 상기 난모세포의 핵을 제거하는 단계는 단백질 인산가수분해효소 저해제(protein phosphatase inhibitor)을 포함하는 배지에서 이루어지는 것을 특징으로 하는 제조방법
7 7
제6항에 있어서, 상기 단백질 인산가수분해효소 저해제는 카페인인 것을 특징으로 하는 제조방법
8 8
제5항에 있어서, 상기 하나 이상의 공여체 세포의 하나 이상의 핵을 첨가하는 단계는 직접 주입을 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법
9 9
제5항에 있어서, 상기 하나 이상의 공여체 세포의 하나 이상의 핵을 첨가하는 단계는 체세포 융합을 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법
10 10
제5항에 있어서, 상기 하나 이상의 공여체 세포의 하나 이상의 핵은 후생학적 조절인자(epigenetic modifying agents)와 접촉된 것을 특징으로 하는 제조방법
11 11
제10항에 있어서, 상기 후생학적 조절인자는 히스톤 아세틸기전달효소(HAT, histone acetyl transferase) 단백질, 히스톤 탈아세틸효소(HDAC, histone deacetylase) 단백질, 라이신 디메틸라아제(KDM) 도메인 단백질 및 단백질 메틸 전달효소(PMT, protein methyl transferase) 도메인 단백질로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는 제조방법
12 12
제10항에 있어서, 상기 후생학적 조절인자는 siRNA(small interfering RNA), 저분자, 단백질, 펩티드 또는 항체인 것을 특징으로 하는 제조방법
13 13
제10항에 있어서, 상기 후생학적 조절인자는 Oct3/4, Sox2, Klf4, c-Myc 및 Lin2로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는 제조방법
14 14
제5항에 있어서, 상기 하나 이상의 공여체 세포의 하나 이상의 핵을 첨가하여 핵 이식된 (NT) 난모세포를 생성하는 단계는 센다이바이러스, 그의 단백질 또는 추출물을 포함하는 배지에서 이루어지는 것을 특징으로 하는 제조방법
15 15
제5항에 있어서, 상기 하나 이상의 공여체 세포는 체세포 또는 생식세포를 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법
16 16
제5항에 있어서, 상기 NT 난모세포를 활성화하는 단계에서의 포스트-활성화 배지는 6-DMAP, 퓨로마이신(puromycin), 에탄올(ethanol), CHX(cycloheximide), TSA(trichostatin A), 및 CB(cytochalasin B)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법
17 17
제5항에 있어서, 상기 NT 난모세포는 후생학적 조절인자의 존재 하에서 배양된 것을 특징으로 하는 제조방법
18 18
제17항에 있어서, 상기 후생학적 조절인자는 히스톤 아세틸기전달효소(HAT, histone acetyl transferase) 단백질, 히스톤 탈아세틸효소(HDAC, histone deacetylase) 단백질, 라이신 디메틸라아제(KDM) 도메인 단백질 및 단백질 메틸 전달효소(PMT, protein methyl transferase) 도메인 단백질로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는 제조방법
19 19
제17항에 있어서, 상기 후생학적 조절인자는 siRNA(small interfering RNA), 저분자, 단백질, 펩티드 또는 항체인 것을 특징으로 하는 제조방법
20 20
제5항에 있어서, 상기 a) 단계는 자외선의 부재 하에서 수행되는 것을 특징으로 하는 제조방법
21 21
제5항에 있어서, 상기 a) 단계는 난모세포로 정자 인자(sperm factors)를 주입하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법
22 22
제1항에 있어서, 상기 a) 단계는 반수성체-유래 인간 다능성 줄기 세포(pn-hPSC)를 생성시키는 단계이며,상기 a) 단계는, 전기적 및/또는 화학적 자극을 가하여 난모세포를 활성화하는 단계;포스트-활성화 배지에서 상기 활성화된 난모세포를 인큐베이션하여 반수성체를 생성하는 단계;배양 배지에서 상기 반수성체를 인큐베이션하여 배반포를 형성하는 단계; 및 상기 배반포로부터 내세포괴 (ICM) 세포를 분리하는 단계로서, 상기 내세포괴 세포는 pn-hPSC로 더 배양할 수 있는 것인 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법
23 23
제22항에 있어서, 상기 난모세포를 활성화하는 단계에서의 화학적 자극은활성화 배지에서 인큐베이션하는 것이며, 상기 활성화 배지는 칼슘 이온운반체를 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법
24 24
제23항에 있어서, 상기 칼슘 이온운반체는 이오노마이신, A23187, 부베리신(beauvericin), X-537A, 및 아베나시올리드(avenaciolide)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법
25 25
제22항에 있어서, 상기 반수성체를 생성하는 단계에서의 포스트-활성화 배지는 상기 NT 난모세포를 활성화하는 단계에서의 활성화 배지는 6-DMAP, 퓨로마이신(puromycin), 에탄올(ethanol), CHX(cycloheximide), TSA(trichostatin A), 및 CB(cytochalasin B)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법
26 26
제22항에 있어서, 상기 반수성체를 생성하는 단계에서의 포스트-활성화 배지는 제2극체 방출을 막지 않는 화합물을 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법
27 27
제22항에 있어서, 상기 난모세포는 중기 II (MII) 단계 난모세포를 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법
28 28
제22항에 있어서, 상기 난모세포는 중기 I (MI) 단계 난모세포를 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법
29 29
제22항에 있어서, 상기 난모세포는 단일 전핵(pronuclear) 난모세포를 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법
30 30
제22항에 있어서, 상기 pn-hPSC는 이형접합(heterozygous)인 것을 특징으로 하는 제조방법
31 31
제22항에 있어서, 상기 pn-hPSC는 동형접합(homozygous)인 것을 특징으로 하는 제조방법
32 32
제22항에 있어서, 상기 pn-hPSC는 집단의 1% 이상과 면역적합성 인간 백혈구 항원 (HLA) 일배체형(haplotype)을 갖는 다능성 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법
33 33
제32항에 있어서, 상기 HLA 일배체형은 HLA-A, HLA-B, 및 HLA-DR를 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법
34 34
제22항에 있어서, 상기 a)단계는 난모세포로 정자 인자를 주입하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법
35 35
제22항에 있어서, 상기 난모세포는 CARM 1 및/또는 Esrrb의 존재 하에서 인큐베이션되는 것을 특징으로 하는 제조방법
36 36
제1항에 있어서, 상기 b) 단계는 hPSC를 현탁 배양하는 것을 특징으로 하는 제조방법
37 37
삭제
38 38
제36항에 있어서, 상기 b) 단계는 hPSC를 넉아웃 혈청 대체제(KSR, knockout-serum replacement)가 첨가된 DMEM/F12 (Dulbecco's Modified Eagle Medium: Nutrient Mixture F-12) 배지에서 배양하여 EB로 형성시키는 것을 특징으로 하는 제조방법
39 39
제36항에 있어서, 상기 b) 단계는 hPSC를 2개 이상의 군(clump)으로 분리한 후 배양하는 것을 특징으로 하는 제조방법
40 40
삭제
41 41
삭제
42 42
삭제
43 43
제1항에 있어서, 상기 저포도당 조건의 배지에서 EB를 부착 배양하는 것을 특징으로 하는 제조방법
44 44
제1항에 있어서, 상기 c)단계는,EB를 TGF-β 저해제 및 KSR이 보충된 DMEM/F12 배지에서 배양하는 단계; 및 혈청 및 항생제가 첨가된 저포도당 조건의 DMEM/F12 배지에서 상기 EB를 배양하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법
45 45
제1항에 있어서, 상기 c)단계는,TGF-β 저해제가 첨가된 배지 및/또는 저포도당 조건의 배지에서 상기 EB를 배양하는 단계; 및상기 배지에서 배양된 EB의 결과물(outgrowth)을 MSC 증식 배지에서 배양하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법
46 46
제1항에 있어서, 상기 c)단계는,EB를 TGF-β 저해제가 첨가된 배지에서 배양하는 단계;저포도당 조건의 배지에서 상기 EB를 배양하는 단계; 및상기 배지에서 배양된 EB의 결과물을 MSC 증식 배지에서 배양하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법
47 47
제45항 또는 제46항에 있어서, 상기 MSC 증식 배지는 혈청, 항생제, 비필수 아미노산(NEAA) 및 β-머갑토에탄올(mercaptoethanol)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상이 첨가된 DMEM 배지인 것을 특징으로 하는 제조방법
48 48
제45항 또는 제46항에 있어서, 상기 EB의 결과물을 단일 세포로 분리하여 부착 배양 한 후 MSC 증식 배지에서 배양하는 것을 특징으로 하는 제조방법
49 49
제1항에 있어서, 상기 MSC의 80% 이상이 마커 CD29, CD44 및 CD90에 대하여 양성이며, 20% 이상이 마커 CD105에 대하여 양성인 것을 특징으로 하는 제조방법
50 50
제1항에 있어서, 상기 MSC의 80% 이상이 마커 CD29, CD44, CD90 및 CD105에 대하여 양성인 것을 특징으로 하는 제조방법
51 51
제1항에 있어서, 상기 MSC의 5% 미만이 마커 TRA1-60, SSEA4, CD34 및 CD45에 대하여 음성인 것을 특징으로 하는 제조방법
52 52
제1항에 있어서, 상기 MSC의 3% 미만이 마커 TRA1-60, SSEA4, CD34 및 CD45에 대하여 음성인 것을 특징으로 하는 제조방법
53 53
제1항에 있어서, 상기 MSC는 세포 배양에서 적어도 5회의 계대(passage)를 진행할 수 있는 복제능을 가지는 것을 특징으로 하는 제조방법
54 54
제1항에 있어서, 상기 MSC는 세포 배양에서 적어도 10회의 계대를 진행할 수 있는 복제능을 가지는 것을 특징으로 하는 제조방법
55 55
제1항에 있어서, 상기 MSC는 세포 배양에서 적어도 15회의 계대를 진행할 수 있는 복제능을 가지는 것을 특징으로 하는 제조방법
56 56
제1항에 있어서, 상기 MSC의 배가시간(doubling time)은 35 내지 48시간인 것을 특징으로 하는 제조방법
57 57
제1항에 있어서, 상기 MSC의 배가시간은 41 내지 45시간인 것을 특징으로 하는 제조방법
58 58
제1항에 있어서, 상기 MSC는 조혈모세포, 근육세포, 심근세포, 간 세포, 연골세포, 상피 세포, 비뇨기관 세포, 신장세포, 혈관세포, 망막세포 및 뉴런 세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 분화능을 갖는 것을 특징으로 하는 제조방법
59 59
삭제
60 60
삭제
61 61
삭제
62 62
제1항에 있어서, d) 상기 제조된 중간엽 줄기세포(MSC)로부터 단일 세포를 분리하는 단계; 및 e) 상기 분리된 단일 세포를 배양하여 단일세포 유래 MSC를 제조하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 제조 방법
63 63
제62항에 있어서, 상기 d) 단계의 중간엽 줄기세포는 P(Passage) 1 내지 P9의 세포인 것을 특징으로 하는 제조 방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
순번, 연구부처, 주관기관, 연구사업, 연구과제의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 국가R&D 연구정보 정보 표입니다.
순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 미래창조과학부 차의과학대학교 세포재생기술개발사업 체세포복제기술 기반 차세대 세포 전환기술 개발