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dCas9/gRNA 복합체와 형광표지인자를 이용한 표적 유전자 검출 방법

  • 기술번호 : KST2018011578
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 불활성화된 Cas9(dCas9) 및 표적 유전자에 특이적으로 결합하는 가이드 RNA로 이루어진 복합체와 표적 유전자를 포함하는 시료를 반응시키는 제1단계; 상기 반응물을 분리하는 제2단계; 및 형광표지인자를 처리하는 제3단계를 포함하는 표적 유전자를 검출하는 방법에 관한 것이다.본 발명에 따른 표적 유전자 검출 방법은 PCR을 수행하지 않고도 높은 감도로 표적 유전자의 검출이 가능하고, 별도의 유전자 분리 단계를 거치지 않고도 신속하면서도 정확하게 표적 유전자를 검출하는데 유용하게 사용될 수 있다.
Int. CL C12Q 1/68 (2018.01.01) C12N 9/16 (2006.01.01) C12N 15/11 (2006.01.01)
CPC C12Q 1/6813(2013.01) C12Q 1/6813(2013.01) C12Q 1/6813(2013.01) C12Q 1/6813(2013.01) C12Q 1/6813(2013.01)
출원번호/일자 1020170020000 (2017.02.14)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2018-0093636 (2018.08.22) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2017.02.14)
심사청구항수 6

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 정주연 대한민국 대전광역시 유성구
2 임은경 대한민국 대전광역시 유성구
3 국경혜 대한민국 대전광역시 유성구
4 김주옥 대한민국 대전광역시 유성구
5 강태준 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인태평양 대한민국 서울특별시 중구 청계천로 **, *층(다동, 예금보험공사빌딩)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2017.02.14 수리 (Accepted) 1-1-2017-0151850-79
2 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2018.02.13 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0110371-97
3 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2018.04.13 수리 (Accepted) 1-1-2018-0369561-14
4 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2018.05.11 수리 (Accepted) 1-1-2018-0466282-89
5 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2018.06.12 수리 (Accepted) 1-1-2018-0575943-84
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2018.07.12 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2018-0687754-00
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2018.07.12 수리 (Accepted) 1-1-2018-0687753-54
8 [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Agent] Report on Agent (Representative)
2018.08.08 수리 (Accepted) 1-1-2018-0784724-38
9 거절결정서
Decision to Refuse a Patent
2018.09.05 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0606969-23
10 [법정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
2018.10.05 수리 (Accepted) 1-1-2018-0985614-28
11 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2018.10.05 수리 (Accepted) 1-1-2018-0986440-59
12 법정기간연장승인서
2018.10.08 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2018-0156398-21
13 면담 결과 기록서
2018.10.24 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2018-0129321-26
14 [명세서등 보정]보정서(재심사)
Amendment to Description, etc(Reexamination)
2018.11.01 보정승인 (Acceptance of amendment) 1-1-2018-1082907-44
15 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2018.11.01 수리 (Accepted) 1-1-2018-1082906-09
16 등록결정서
Decision to Grant Registration
2018.11.08 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0762955-10
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번호 청구항
1 1
친화성 태그(tag)를 포함하는 불활성화된 Cas9(dCas9) 및 표적 유전자에 특이적으로 결합하는 단일 사슬 가이드 RNA (sgRNA)인 가이드 RNA로 이루어진 복합체와 표적 유전자를 포함하는 시료를 반응시키는 제1단계; 상기 반응물을 분리하는 제2단계; 및이중 가닥 DNA와 특이적으로 결합할 수 있는 형광표지인자를 처리하는 제3단계를 포함하며, 상기 이중 가닥 DNA와 특이적으로 결합할 수 있는 형광표지인자는 사이버 그린 Ⅰ(SYBR green Ⅰ), 사이버 그린 Ⅱ(SYBR green Ⅱ), 사이버 골드(SYBR gold), 옥사졸 옐로우(Oxazole yellow, YOYO) 및 티아졸 오렌지(Thiazole orange)를 포함하는 군에서 선택된 것인, 표적 유전자를 검출하는 방법
2 2
삭제
3 3
삭제
4 4
제1항에 있어서, 상기 친화성 태그는 His 태그, Flag 태그, S 태그, GST(Glutathione S-transferase) 태그, MBP (Maltose binding protein) 태그, CMP (chitin binding protein) 태그, Avi 태그, 칼모듈린 (calmodulin) 태그, 폴리글루타메이트 (polyglutamate) 태그, E 태그, HA 태그, myc 태그, SBP 태그, 소프태그 1 (softag 1), 소프태그 3(softag 3), 스트랩 (strep) 태그, TC 태그, Xpress 태그, BCCP (biotin carboxyl carrier pretein) 태그, 및 GFP (green fluorescent protein) 태그를 포함하는 군에서 선택되는 것인, 표적 유전자를 검출하는 방법
5 5
제1항에 있어서, 상기 제2단계는 태그에 결합하는 자성 비드(magnetic bead)를 이용하여 수행되는 것인, 표적 유전자를 검출하는 방법
6 6
제5항에 있어서, 상기 자성 비드는 Ni-NTA 자성 비드인 것인, 표적 유전자를 검출하는 방법
7 7
삭제
8 8
표적 유전자를 포함하는 세포를 용해시키는 제1단계;상기 용해물을 친화성 태그(tag)를 포함하는 불활성화된 Cas9(dCas9) 및 표적 유전자에 특이적으로 결합하는 단일 사슬 가이드 RNA (sgRNA)인 가이드 RNA로 이루어진 복합체와 반응시키는 제2단계; 상기 반응물을 분리하는 제3단계; 및이중 가닥 DNA와 특이적으로 결합할 수 있는 형광표지인자를 처리하는 제4단계를 포함하며, 상기 이중 가닥 DNA와 특이적으로 결합할 수 있는 형광표지인자는 사이버 그린 Ⅰ(SYBR green Ⅰ), 사이버 그린 Ⅱ(SYBR green Ⅱ), 사이버 골드(SYBR gold), 옥사졸 옐로우(Oxazole yellow, YOYO) 및 티아졸 오렌지(Thiazole orange)를 포함하는 군에서 선택된 것인, 표적 유전자를 검출하는 방법
9 9
제8항에 있어서, 상기 표적 유전자를 검출하는 방법은 세포의 용해물에 대하여 정제과정을 거치지 않는 것을 특징으로 하는 것인, 표적 유전자를 검출하는 방법
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1 WO2018151339 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

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1 WO2018151339 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 미래창조과학부 한국생명공학연구원 원천기술개발사업(글로벌프론티어) 생체분자 검출신호 제어를 위한 신개념 3D 나노구조체 설계 및 활용기술 개발
2 미래창조과학부 한국생명공학연구원 원천기술개발사업(글로벌프론티어) 약물 저항성 바이오 유해물질 신속검출을 위한 바이오 컨텐츠 설계 및 활용기술 개발
3 미래창조과학부 한국생명공학연구원 주요사업(2015-2018) 나노바이오메디컬 융복합 기술개발사업