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유전영동기술을 이용한 금속이온 검출방법

  • 기술번호 : KST2018012729
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 새로운 분광학 기술을 이용한 금속이온의 탐지와 넓은 범위의 금속이온 농도를 간단하고 정확하게 대량 측정 가능한 방법에 관한 것으로써, 보다 구체적으로 폴리뉴클레오타이드가 코팅된 기판 및 마이크로스피어를 이용해, 금속이온 농도가 증가함에 따라, 금속이온-매개 폴리뉴클레오타이드 간 상호결합력이 증가함을 이용하여, DEP힘을 가해 파열 힘(unbinding force)을 측정하고 통계적 분석방법으로 정량화함으로써 높은 민감도를 가지고 넓은 농도 범위에서 간단한 방법으로 금속이온의 존재 및 주어진 시간에 대량 측정이 가능한 방법에 관한 것이다.
Int. CL G01N 27/447 (2006.01.01) G01N 33/20 (2019.01.01) B01L 3/00 (2006.01.01)
CPC G01N 27/44726(2013.01) G01N 27/44726(2013.01) G01N 27/44726(2013.01) G01N 27/44726(2013.01) G01N 27/44726(2013.01) G01N 27/44726(2013.01)
출원번호/일자 1020170028884 (2017.03.07)
출원인 연세대학교 원주산학협력단, 고려대학교 세종산학협력단
등록번호/일자 10-1945757-0000 (2019.01.30)
공개번호/일자 10-2018-0102363 (2018.09.17) 문서열기
공고번호/일자 (20190417) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2017.03.07)
심사청구항수 16

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 연세대학교 원주산학협력단 대한민국 강원도 원주시
2 고려대학교 세종산학협력단 대한민국 세종특별자치시

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이상우 대한민국 강원도 원주시
2 박진성 대한민국 서울특별시 성북구
3 이규도 대한민국 경기도 화성시
4 최승엽 대한민국 강원도 원주시
5 손명구 대한민국 강원도 원주시
6 박인수 대한민국 강원도 원주시
7 김웅 대한민국 광주광역시 북구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인미주 대한민국 서울특별시 서초구 바우뫼로 **(우면동, 선일빌딩 *층)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 연세대학교 원주산학협력단 강원도 원주시
2 고려대학교 세종산학협력단 세종특별자치시
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2017.03.07 수리 (Accepted) 1-1-2017-0227285-97
2 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2017.06.23 수리 (Accepted) 4-1-2017-5098886-10
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2018.01.11 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2018.01.20 수리 (Accepted) 4-1-2018-5011666-45
5 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2018.03.12 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2018-0038829-06
6 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2018.03.14 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0180093-73
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2018.05.14 수리 (Accepted) 4-1-2018-5085255-51
8 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2018.05.14 수리 (Accepted) 1-1-2018-0470601-01
9 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2018.06.14 수리 (Accepted) 1-1-2018-0579191-49
10 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2018.07.13 수리 (Accepted) 1-1-2018-0691653-36
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2018.07.20 수리 (Accepted) 4-1-2018-5138839-36
12 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2018.08.14 수리 (Accepted) 1-1-2018-0806138-09
13 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2018.08.14 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2018-0806140-91
14 등록결정서
Decision to grant
2018.12.25 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0885191-30
15 [명세서등 보정]보정서(심사관 직권보정)
2019.04.05 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2019-5010820-00
16 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.08.20 수리 (Accepted) 4-1-2019-5165251-68
17 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.11.01 수리 (Accepted) 4-1-2019-5228968-96
18 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.03.30 수리 (Accepted) 4-1-2020-5073634-85
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
(a) 전극이 형성된 기판의 일면 이상을 시토신-염기가 15 내지 32개로 구성된 폴리-시토신 DNA로 기능화시키는 단계;(b) 단계(a)의 기판과 시토신-염기가 15 내지 32개로 구성된 폴리-시토신 DNA로 기능화된 비즈를 챔버(chamber)에 넣는 단계;(c) 챔버에 금속을 포함 또는 미포함하는 피검용액을 넣고 기판에 전압을 인가하는 단계;(d) 비즈의 움직임을 측정하여 영상신호 정보를 수득하는 단계;(e) 단계(d)에서 수득한 영상신호 정보로부터 그레이스케일 값을 구하는 단계;(f) 단계 (e)에서 얻은 그레이스케일 값을 이용하여 파열 순간을 검출하는 단계; 및(g) 파열지점의 전압(unbinding voltage)을 측정하고 변환과정을 거쳐 파열 힘(FU; unbinding force)을 구하는 단계를 포함하는, 은이온 검출 방법
2 2
제1항에 있어서, 상기 단계(a)의 기판은 미세유체 칩(microfluidic chip)인 것을 특징으로 하는, 은이온 검출방법
3 3
제2항에 있어서,미세유체 칩은 절연기판을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는, 은이온 검출방법
4 4
제3항에 있어서, 절연기판은 이산화규소(SiO2, 실리카)가 증착된 실리콘인 것을 특징으로 하는, 은이온 검출방법
5 5
제1항에 있어서,상기 단계(b)의 챔버는 폴리디메틸실록산(polydimethylsiloxane, PDMS)로 제조되는 것을 특징으로 하는, 은이온 검출방법
6 6
삭제
7 7
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8 8
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9 9
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10 10
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11 11
삭제
12 12
제1항에 있어서, 상기 단계 (f)는 전압을 인가함으로써 발생하는 비즈의 부양 변위(levitation displacement)와 그레이스케일 값 강도의 변화를 매칭하고, 기준치를 넘어서 변동(fluctuation)이 발생하는 순간을 파열 순간으로 정의함을 특징으로 하는, 은이온 검출방법
13 13
제12항에 있어서, 상기 기준치는
14 14
제1항에 있어서, 상기 단계 (g)의 변환과정은 하기 [식 2]를 이용하여 수행되고,[식 2]변환과정을 거쳐 파열 힘(FU : unbinding force)을 구하며,상기 식에서, εm은 매질의 유전율(permittivity)이며, Re는 파열 전압(unbinding force)이고, εp*은 복합체 소분자 유전율(complex particle permittivity)이며, εm*은 복합체 배지 유전율(complex medium permittivity)이고, r은 마이크로스피어 지름(microsphere radius)이며, Erms는 유한요소 시뮬레이션(finite element simulation, COMSOL Multiphysics 3
15 15
제1항에 있어서, 상기 (g)단계의 평균 파열힘(003c#FU003e#) 값과 은이온 농도가 비례하는 것을 특징으로 하는, 은이온 검출방법
16 16
(a) 전극이 형성된 기판의 일면 이상을 시토신-염기가 15 내지 32개로 구성된 폴리-시토신 DNA로 기능화시키는 단계;(b) 단계(a)의 기판과 시토신-염기가 15 내지 32개로 구성된 폴리-시토신 DNA로 기능화된 비즈를 챔버(chamber)에 넣는 단계;(c) 챔버에 금속을 포함 또는 미포함하는 피검용액을 넣고 기판에 전압을 인가하는 단계;(d) 비즈의 움직임을 측정하여 영상신호 정보를 수득하는 단계;(e) 단계(d)에서 수득한 영상신호 정보로부터 그레이스케일 값을 구하는 단계;(f) 단계 (e)에서 얻은 그레이스케일 값을 이용하여 파열 순간을 검출하는 단계; (g) 파열지점의 전압(unbinding voltage)을 측정하고 변환과정을 거쳐 파열 힘(FU; unbinding force)을 구하는 단계; 및(h) 단계 (g)에서 구한 파열힘 값과 포아송 통계분석방법(Poisson statistics)을 이용한 분자간 결합력 측정 방법
17 17
제16항에 있어서, 상기 단계 (h)의 포아송 통계분석방법은 하기 003c#식 2003e#를 이용하여 수행되고, [식 2]m = nF, σ= nF2F = σ2 / m상기 식에서 F는 분자간 결합력이고,m 은 파열 힘(FU)의 평균이며,σ2 은 편차(variance)임을 특징으로 하는 분자간 결합력 측정 방법
18 18
시토신-염기가 15 내지 32개로 구성된 폴리-시토신 DNA로 기능화된 기판 및 시토신-염기가 15 내지 32개로 구성된 폴리-시토신 DNA로 기능화된 비즈(beads)가 들어 있는 챔버;상기 챔버 밑에 위치하되, 전극부를 구비하며, 상기 전극부에 전압을 인가하여 전기장을 형성하는 전계생성부;상기 챔버 위 또는 일측에 위치되어, 상기 챔버 내를 촬상하는 카메라; 상기 카메라로부터 수신된 영상신호로부터 그레이스케일 값을 측정하고, 그레이스케일 값을 이용해 파열 순간을 검출하는 측정부; 및상기 측정부에서 측정한 파열 지점의 전압(unbinding voltage)을 측정하고 변환과정을 거쳐 파열 힘(FU; unbinding force)을 구하는 분석부를 포함하는, 은이온 측정장치
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제18항에 있어서, 상기 측정부는 전압을 인가함으로써 발생하는 비즈의 부양 변위(leviation displacement)와 그레이스케일 값 강도의 변화를 매칭하고, 기준치를 넘어서 변동(fluctuation)이 발생하는 순간을 파열순간으로 정의함을 특징으로 하는, 은이온 측정장치
26 26
제25항에 있어서, 상기 기준치는하기 [식 1]의 가우스 분포를 따르는 그레이스케일 값의 변동(fluctuation)을 측정하되, 변동 레벨(fluctuation level)은 μ± 2σ로 나타내어지고,[식 1]상기 식에서, χ는 그레이스케일 값이고,μ는 그레이스케일 값의 평균이며, σ는 그레이스케일 값의 표준 편차인 것을 특징으로 하는, 은이온 측정장치
27 27
제18항에 있어서, 변환과정은 하기 [식 2]를 이용하여 수행되고,[식 2]변환과정을 거쳐 파열 힘(FU : unbinding force)을 구하며,상기 식에서, εm 은 배지의 유전율(medium permittivity)이며, Re는 파열 전압(unbinding force)이고, εp*은 복합체 소분자 유전율(complex particle permittivity)이며, εm*은 복합체 배지 유전율(complex medium permittivity)이고, r은 마이크로스피어 지름(microsphere radius)이며, E는 유한요소 시뮬레이션(finite element simulation, COMSOL Multiphysics 3
28 28
제18항에 있어서, 상기 분석부는 평균 파열힘(003c#FU003e#) 값과 은이온 농도가 비례하는 것을 이용해 은이온을 검출하는 것을 특징으로 하는, 은이온 측정장치
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2 미래창조과학부 연세대학교(원주캠퍼스) 신진연구자지원 다기능 유전영동 힘 분광 측정기법을 이용한 효소 동력학 기초연구
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4 미래창조과학부 고려대학교 바이오.의료기술개발 혈중 암 유전체 마커 고감도 다중 검출 기술 개발
5 미래창조과학부 고려대학교세종캠퍼스 개인연구지원 질병유발 환경 나노 독성 물질의 고감도 검출 기법 개발