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생물발광 강도가 증폭된 변이 가우시아 루시퍼라아제

  • 기술번호 : KST2018013401
  • 담당센터 : 서울서부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-6124-6930
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 부위 특이적 돌연변이를 이용하여 가우시아 프린셉스(Gaussia Princeps) 유래 루시퍼라아제의 생물발광 강도를 증폭시키도록 변형시킨 가우시아 루시퍼라아제 변이체에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 가우시아 루시퍼라아제(GLuc, Gaussia princeps Luciferase)의 아미노산 서열에서 60번째, 88번째, 89번째, 90번째 및 103번째 아미노산 중 하나 이상의 아미노산을 다른 아미노산으로 치환하여 제조한 가우시아 루시퍼라아제 단일 또는 다중 돌연변이체, 상기 변이체 서열을 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 재조합 벡터, 상기 재조합 벡터를 포함하는 형질전환체, 상기 형질전환체로부터 생물발광 강도가 향상된 변이 가우시아 루시퍼라아제를 제조하는 방법, 및 상기 변이 가우시아 루시퍼라아제를 포함하는 키트에 관한 것이다. GLuc(Gaussia luciferase)는 세포 기반 리포터 분석(cell-based reporter assay)을 위해 가장 널리 사용되는 분비성 루시퍼라아제로, 다양한 종에서 유래되는 루시퍼라아제 중에서 크기가 가장 작아 다른 단백질과 결합시 단백질 구조의 영향을 최소화함으로써 효과적인 모니터링에 사용할 수 있는 장점을 가지고 있다. 그러나, 야생형(wild-type) GLuc의 경우 발광신호 크기가 충분하지 못한 단점을 가지고 있다. 따라서, 본 발명은 가우시아 루시퍼라아제의 생물발광 신호 증폭에 있어서 중요한 역할을 하는 아미노산 잔기를 돌연변이 시킴으로써, 생물발광 신호가 향상된 변이 가우시아 루시퍼라아제를 제조할 수 있으며, 이를 세포 모니터링 및 신약 스크리닝 등에 유용하게 사용할 수 있다.
Int. CL C12N 9/02 (2006.01.01) C12Q 1/66 (2006.01.01)
CPC C12N 9/0069(2013.01) C12N 9/0069(2013.01) C12N 9/0069(2013.01)
출원번호/일자 1020170032655 (2017.03.15)
출원인 한양대학교 산학협력단
등록번호/일자 10-2018248-0000 (2019.08.29)
공개번호/일자 10-2018-0105772 (2018.10.01) 문서열기
공고번호/일자 (20190905) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2017.03.15)
심사청구항수 14

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한양대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 성동구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김영필 대한민국 서울특별시 강동구
2 비나야쿠마르 인도 서울특별시 성동구
3 이진오 대한민국 서울특별시 송파구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인다나 대한민국 서울특별시 강남구 역삼로 *길 **, 신관 *층~*층, **층(역삼동, 광성빌딩)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한양대학교 산학협력단 서울특별시 성동구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2017.03.15 수리 (Accepted) 1-1-2017-0257870-34
2 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2018.03.29 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0219873-72
3 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2018.05.24 수리 (Accepted) 1-1-2018-0510667-20
4 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2018.05.24 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2018-0510668-76
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2018.09.18 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0640074-73
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2018.11.12 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2018-1117791-44
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2018.11.12 수리 (Accepted) 1-1-2018-1117790-09
8 거절결정서
Decision to Refuse a Patent
2019.03.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0220871-40
9 [명세서등 보정]보정서(재심사)
Amendment to Description, etc(Reexamination)
2019.04.24 보정승인 (Acceptance of amendment) 1-1-2019-0421833-83
10 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2019.04.24 수리 (Accepted) 1-1-2019-0421832-37
11 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2019.05.14 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0344121-01
12 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2019.07.11 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2019-0711471-27
13 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2019.07.11 수리 (Accepted) 1-1-2019-0711470-82
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.08.05 수리 (Accepted) 4-1-2019-5155816-75
15 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.08.06 수리 (Accepted) 4-1-2019-5156285-09
16 등록결정서
Decision to Grant Registration
2019.08.22 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0606480-44
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
서열번호 1의 가우시아 루시퍼라아제(GLuc, Gaussia princeps Luciferase) 아미노산 서열에서 88번째 아미노산인 리신(Lysine, K)이 글루타민 (Glutamine, Q)으로 치환된 변이를 포함하는, 가우시아 루시퍼라아제 변이체
2 2
제1항에 있어서, 상기 변이체는 서열번호 1의 가우시아 루시퍼라아제 아미노산 서열에서 60번째 아미노산인 메티오닌(Methionine, M)이 류신(Leucine, L)으로 치환, 89번째 아미노산인 페닐알라닌(Phenylalanine, F)이 타이로신(Tyrosine, Y)으로 치환, 90번째 아미노산인 이소류신(Isoleucine, I)이 류신(Leucine, L)으로 치환, 및 103번째 아미노산인 세린(Serine, S)이 트레오닌(Threonine, T)으로 치환된 변이 중 하나 이상의 변이를 추가로 포함하는 것인, 가우시아 루시퍼라아제 변이체
3 3
제1항에 있어서, 상기 가우시아 루시퍼라아제 변이체는 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 것인, 가우시아 루시퍼라아제 변이체
4 4
제2항에 있어서, 상기 변이체는 서열번호 1의 아미노산 서열에서a) 60번째 아미노산인 메티오닌(Methionine, M)이 류신(Leucine, L)으로, 88번째 아미노산인 리신(Lysine, K)이 글루타민(Glutamine, Q)으로 치환;b) 88번째 아미노산인 리신(Lysine, K)이 글루타민(Glutamine, Q)으로, 90번째 아미노산인 이소류신(Isoleucine, I)이 류신(Leucine, L)으로 치환;c) 60번째 아미노산인 메티오닌(Methionine, M)이 류신(Leucine, L)으로, 88번째 아미노산인 리신(Lysine, K)이 글루타민(Glutamine, Q)으로, 90번째 아미노산인 이소류신(Isoleucine, I)이 류신(Leucine, L)으로 치환;d) 88번째 아미노산인 리신(Lysine, K)이 글루타민(Glutamine, Q)으로, 90번째 아미노산인 이소류신(Isoleucine, I)이 류신(Leucine, L)으로, 103번째 아미노산인 세린(Serine, S)이 트레오닌(Threonine, T)으로 치환;e) 60번째 아미노산인 메티오닌(Methionine, M)이 류신(Leucine, L)으로, 88번째 아미노산인 리신(Lysine, K)이 글루타민(Glutamine, Q)으로, 90번째 아미노산인 이소류신(Isoleucine, I)이 류신(Leucine, L)으로, 103번째 아미노산인 세린(Serine, S)이 트레오닌(Threonine, T)으로 치환; 또는f) 60번째 아미노산인 메티오닌(Methionine, M)이 류신(Leucine, L)으로, 88번째 아미노산인 리신(Lysine, K)이 글루타민(Glutamine, Q)으로, 89번째 아미노산인 페닐알라닌(Phenylalanine, F)이 타이로신(Tyrosine, Y)으로, 90번째 아미노산인 이소류신(Isoleucine, I)이 류신(Leucine, L)으로, 103번째 아미노산인 세린(Serine, S)이 트레오닌(Threonine, T)으로 치환된 아미노산 서열로 이루어진 것인 가우시아 루시퍼라아제 변이체
5 5
삭제
6 6
제4항에 있어서, 상기 가우시아 루시퍼라아제 변이체는 서열번호 7, 9, 10, 11, 12 또는 13의 아미노산 서열로 이루어진 것인 가우시아 루시퍼라아제 변이체
7 7
제1항의 가우시아 루시퍼라아제 변이체 서열을 코딩하는 폴리뉴클레오티드
8 8
제7항에 있어서, 상기 폴리뉴클레오티드는 서열번호 16, 20, 22 내지 26의 염기서열 중 어느 하나의 염기서열로 이루어진 것인 폴리뉴클레오티드
9 9
제7항의 폴리뉴클레오티드가 작동 가능하게 연결된 재조합 벡터
10 10
제9항의 재조합 벡터가 도입된 형질전환체
11 11
제10항의 형질전환체를 배양하고, 이의 배양물 또는 배양 상층액으로부터 가우시아 루시퍼라아제를 회수하는 단계를 포함하는, 생물발광 강도가 증진되도록 변이된 가우시아 루시퍼라아제 제조방법
12 12
제11항에 따른 변이된 가우시아 루시퍼라아제를 포함하는 키트
13 13
제12항에 있어서, 루시페린이 추가로 포함되는 것인 키트
14 14
제13항에 있어서, 상기 루시페린은 코엘렌테라진 또는 h-코엘렌테라진인 것인 키트
15 15
제1항의 가우시아 루시퍼라아제 변이체 및 루시페린을 접촉시키는 단계를 포함하는, 생물발광 신호 측정방법
지정국 정보가 없습니다
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1 WO2018169317 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

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1 WO2018169317 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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1 미래창조과학부 (재)한국연구재단 이공분야 기초연구사업 / 중견연구자지원사업 / 중견연구(총연구비3억초과~5억이하) 공명에너지 전이 나노프로브를 이용한 세포 외 분비 단백질의 실시간 분석 및 기능 연구