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A) 액상의 분석용 샘플을 제공하는 단계;B) 타겟 검체의 진단용 스트립 형태의 측면 흐름분석-기반의 센서를 제공하는 단계, 상기 타겟 검체는 B형 간염 바이러스(HBV) 항원임;C) 상기 분석용 샘플을 측면 흐름분석-기반의 센서의 샘플 패드에 로딩하는 단계; 및D) 상기 센서의 검출 영역 내 테스트 영역으로부터 접합체에 의하여 생성된 시그널을 측정하여 상기 분석용 샘플 내 타겟 검체로서 B형 간염 바이러스(HBV) 항원을 정성적 및/또는 정량적으로 분석하는 단계;를 포함하는 B형 간염 바이러스의 검출방법으로서,상기 단계 B)는, a) 시드 성장법에 의하여 40 내지 50 nm의 사이즈를 갖는 금 나노입자를 제조하는 단계, 상기 금 나노입자는 10% 미만의 표준 편차를 갖는 사이즈 분포를 가짐;b) 타겟 검체에 특이적인 제1 바인더와 상기 단계 a)에서 제조된 금 나노입자가 접합되어 있는 접합체를 제조하는 단계, 상기 제1 바인더는 항체임; 및c) 일단으로부터 타단 방향으로 순차적으로 (i) 흡수성 샘플 패드, (ii) 상기 단계 b)에서 제조된 접합체를 포함하는 접합 패드, (iii) 상기 접합체의 제1 바인더와 결합된 타겟 검체와 특이적으로 결합하는 제2 바인더인 항체가 고정된 테스트 영역, 및 상기 타겟 검체에는 특이적으로 결합하지 않으나 상기 제1 바인더와 결합하는 제3 바인더인 2차 항체가 고정된 컨트롤 영역을 포함하는 다공성 멤브레인 재질의 검출 영역, 및 (iv) 흡수 패드를 포함하는 측면 흐름 분석-기반의 센서를 제조하는 단계;를 포함하며, 그리고상기 단계 b)는 상기 금 나노입자의 수분산물에 제1 바인더를 첨가하는 방식으로 수행되며, 이때 상기 수분산물의 pH는 8
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제1항에 있어서, 상기 단계 a)는,a1) 시드 금 나노입자의 수분산물을 제공하는 단계;a2) 상기 시드 금 나노입자의 수분산물에 캡핑제(capping agent) 및 금 전구체를 첨가하는 단계; 및a3) 상기 수분산물에 함유된 시드 금 나노입자를 성장시켜 증가된 사이즈의 금 나노입자를 형성하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
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제2항에 있어서, 상기 단계 a3)는 적어도 2회 반복되는 것을 특징으로 하는 방법
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제2항에 있어서, 상기 단계 a3)는 80 내지 97℃의 온도에서 수행되는 것을 특징으로 하는 방법
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제2항에 있어서, 상기 시드 금 나노입자는 10 내지 18 nm 범위의 사이즈를 갖는 것을 특징으로 하는 방법
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제2항에 있어서, 상기 단계 a1)은,캡핑제를 함유하는 수용액을 제공하는 단계, 및상기 수용액을 승온시킨 후에 금 전구체를 첨가하여 반응시킴으로써 시드 금 나노입자의 수분산물을 형성하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
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제2항 또는 제6항에 있어서, 상기 금 전구체는 HAuCl4, AuCl, AuCl2, AuCl3, Na2Au2Cl8, NaAuCl2, 및 이의 수화물로 이루어진 군으로부터 적어도 하나가 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
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제7항에 있어서, 상기 금 전구체는 HAuCl4인 것을 특징으로 하는 방법
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제2항 또는 제6항에 있어서, 상기 캡핑제는 시트레이트(citrate), 말레이트(malate), 옥살레이트(oxalate), 아스파르테이트(aspartate) 및 글루타메이트(glutamate)로 이루어진 군으로부터 적어도 하나가 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
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제9항에 있어서, 상기 캡핑제는 소디움 시트레이트인 것을 특징으로 하는 방법
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제2항 또는 제6항에 있어서, 상기 금 전구체의 첨가 량은, 금 전구체 : 캡핑제의 비(몰 기준)가 12 내지 0
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제1항에 있어서, 상기 B형 간염 바이러스 항원은 HBsAgs을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
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제18항에 있어서, 상기 접합체는 금 나노입자와 마우스 항-휴먼 IgG(mouse-anti human IgG)의 접합체이며, 상기 컨트롤 영역 상의 제3 바인더는 항체로서 항-마우스 IgG(anti-mouse IgG)인 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 스트립 형태의 측면 흐름분석-기반의 센서의 B형 간염 바이러스(HBV) 항원에 대한 검출 한계는 1 ng/ml인 것을 특징으로 하는 방법
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