| 1 |
1
(a) 생물학적 시료에 양이온이 포함된 용액을 첨가하는 단계;(b) 상기 생물학적 시료에 포함된 세포밖 소포체와 양이온을 반응시켜 세포밖 소포체와 양이온의 불용성 복합체를 형성하는 단계;(c) 상기 시료로부터 세포밖 소포체와 양이온 복합체를 침전시켜 분리하는 단계; 및(d) 상기 복합체로부터 양이온을 분리시켜 세포밖 소포체를 정제하는 단계를 포함하는 세포밖 소포체 분리 방법
|
| 2 |
2
제1항에 있어서,상기 생물학적 시료는 포유동물 세포 배양 배지, 박테리아 세포 배양 배지, 효모 배양 배지, 조직 추출물, 암 조직, 혈청, 혈장, 침, 눈물, 땀, 소변, 대변, 뇌척수액(CSF, cerebrospinal fluid), 복수(ascite), 양수(amniotic fluid), 정액, 유(milk), 먼지, 담수, 해수, 토양 및 발효식품으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법
|
| 3 |
3
제1항에 있어서,상기 양이온은 리튬(Li), 나트륨(Na), 칼륨(K), 루비듐(Rb), 세슘(Cs), 프랑슘(Fr), 베릴륨(Be), 마그네슘(Mg), 칼슘(Ca), 스트론튬(Sr), 바륨(Ba), 라듐(Ra), 스칸듐(Sc), 이트륨(Y), 티타늄(Ti), 지르코늄(Zr), 하프늄(Hf), 러더포듐(Rf), 바나듐(V), 니오븀(Nb), 탄탈룸(Ta), 더브늄(Db), 크롬(Cr), 몰리브덴(Mo), 텅스텐(W), 시보？？Sg), 망간(Mn), 테크네튬(Tc), 레늄(Re), 보륨(Bh), 철(Fe), 루테늄(Ru), 오스뮴(Os), 하슘(Hs), 코발트(Co), 로듐(Rh), 이리듐(Ir), 마이트너륨(Mt), 니켈(Ni), 팔라듐(Pd), 백금(Pt), 다름슈타튬(Ds), 구리(Cu), 은(Ag), 금(Au), 뢴트게늄(Rg), 아연(Zn), 카드뮴(Cd), 수은(Hg), 코페르니슘(Cn), 알루미늄(Al), 갈륨(Ga), 인듐(In), 탈륨(Tl), 주석(Sn), 납(Pb), 비스무트(Bi) 및 폴로늄(Po) 이온으로이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법
|
| 4 |
4
제1항에 있어서,상기 (c) 단계는 원심분리, 초원심분리, 여과, 한외여과, 중력, 음파처리, 밀도 구배 초원심분리, 크기 배제 크로마토그래피, 이온교환 크로마토그래피, 친화성 크로마토그래피, 폴리머 기반 침전 및 유기 용매 침전으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 방법을 이용하는 것인 세포밖 소포체 분리 방법
|
| 5 |
5
제1항에 있어서,상기 (d) 단계는 분리된 세포밖 소포체와 양이온 복합체에 킬레이트제를 첨가하는 방법; pH값을 변화시키는 방법; 및 이미다졸(imidazole), 히스티딘(histidine), 에틸렌디아민 테트라아세테이트(EDTA, ethylendiamine tetraacetate) 및 염(salts)으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 농도를 변화시키는 방법으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 방법을 포함하는 것인 세포밖 소포체 분리 방법
|
| 6 |
6
제5항에 있어서,상기 킬레이트제는 이미노디아세트산(IDA, iminodiacetic acid), 니트릴로트리아세트산(NTA, nitrilotriacetic acid), 트리스(카복시메틸)에틸렌디아민(TED, tris-(carboxymethyl)ethylenediamine), 에틸렌디아민(ethylenediamine), 에틸렌디아민 테트라아세테이트(EDTA, ethylendiamine tetraacetate), 알킬렌디아민 트리아세트산(alkylenediamine triacetic acid), 디에틸렌트리아민펜타아세트산(DTPA, diethylenetriaminepentaacetic acid), 에틸렌글리콜 비스(베타-아미노에틸에테르)-N,N,N',N'-테트라아세트산(EGTA, ethylene glycol-bis(β-aminoethyl ether)-N,N,N',N'-tetraacetic acid), 포스포세린(phosphoserine) 및 1,4,7-트리아조사이클로노난(TACN, 1,4,7-triazocyclononane)으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법
|
| 7 |
7
제1항에 있어서,상기 (a) 단계 전에 시료의 전처리 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법
|
| 8 |
8
제1항에 있어서,상기 (d) 단계 후에 정제된 세포밖 소포체의 후처리 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법
|
| 9 |
9
제1항에 있어서,상기 (a) 단계에 고분자 또는 염석 이온을 첨가하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법
|
| 10 |
10
제9항에 있어서,상기 고분자 또는 염석이온은 양이온과 동시에, 양이온 첨가 이전에, 또는 양이온 첨가 이후에 첨가되는 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법
|
| 11 |
11
제9항에 있어서,상기 고분자는 폴리에틸렌글리콜(PEG, poly ethylene glycol) 또는 폴리옥사졸린(polyoxazoline)인 것인 세포밖 소포체 분리 방법
|
| 12 |
12
제11항에 있어서,상기 폴리옥사졸린은 폴리메틸옥사졸린(PMOZ, poly(2-methyl-2-oxazoline), 폴리에틸옥사졸린(PEOZ, poly(2-ethyl-2-oxazoline) 또는 폴리프로필옥사졸린(PPOZ, poly(2-propyl-2-oxazoline)인 것인 세포밖 소포체 분리 방법
|
