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소수성 상호작용을 이용한 세포밖 소포체의 분리방법

  • 기술번호 : KST2019000920
  • 담당센터 : 대구기술혁신센터
  • 전화번호 : 053-550-1450
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 세포밖 소포체의 분리 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게 본 발명은 세포밖 소포체의 소수성을 이용하여 세포밖 소포체를 분리하는 방법, 상기 방법을 이용하여 분리된 세포밖 소포체 등에 관한 것이다. 본 발명의 세포밖 소포체 분리 방법을 이용하면 혈액과 소변을 포함한 다양한 동물의 체액 또는 암조직을 포함한 다양한 조직에서 기존의 방법으로는 어려웠던 지질단백질의 오염이 제거된 세포밖 소포체를 분리할 수 있게 되어, 종래 지질단백질 오염으로 야기된 문제를 해결하고, 동물의 다양한 체액 또는 조직에서 분리한 세포밖 소포체를 이용해 특성과 기능 연구, 다중 오믹스 연구, 신규 바이오 마커의 발굴, 진단과 치료 등 다양한 연구에 파급효과가 큰 필수 기술이 될 것으로 기대된다.
Int. CL C12N 5/00 (2006.01.01) B01D 15/36 (2006.01.01)
CPC C12N 5/00(2013.01) C12N 5/00(2013.01) C12N 5/00(2013.01)
출원번호/일자 1020170094874 (2017.07.26)
출원인 ㈜로제타엑소좀, 포항공과대학교 산학협력단
등록번호/일자 10-1999818-0000 (2019.07.08)
공개번호/일자 10-2019-0012022 (2019.02.08) 문서열기
공고번호/일자 (20190712) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2017.07.26)
심사청구항수 27

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 ㈜로제타엑소좀 대한민국 경기도 성남시 분당구
2 포항공과대학교 산학협력단 대한민국 경상북도 포항시 남구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이창진 대한민국 대구광역시 수성구
2 고용송 대한민국 경북 포항시 남구
3 박현택 대한민국 울산광역시 중구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인이룸리온 대한민국 서울특별시 서초구 사평대로 ***, *층 (반포동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 ㈜로제타엑소좀 경기도 성남시 분당구
번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2017.07.26 수리 (Accepted) 1-1-2017-0721527-06
2 보정요구서
Request for Amendment		 2017.08.04 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2017-0108469-71
3 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment		 2017.08.16 수리 (Accepted) 1-1-2017-0785899-42
4 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2017.08.17 수리 (Accepted) 4-1-2017-5130954-68
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2018.10.31 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0740368-14
6 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2018.12.28 수리 (Accepted) 1-1-2018-1317067-42
7 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2019.01.31 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2019-0115014-62
8 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2019.01.31 수리 (Accepted) 1-1-2019-0115013-16
9 등록결정서
Decision to grant		 2019.07.02 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0477418-30
10 [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Agent] Report on Agent (Representative)		 2019.09.27 수리 (Accepted) 1-1-2019-0993573-11
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.11.20 수리 (Accepted) 4-1-2019-5243581-27
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.11.22 수리 (Accepted) 4-1-2019-5245997-53
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.11.25 수리 (Accepted) 4-1-2019-5247115-68
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.05.06 수리 (Accepted) 4-1-2020-5101216-16
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
(a) 고정상에 소수성 기능기(hydrophobic functional groups)를 고정시켜 소수성 상호작용 컬럼을 준비하는 단계; (b) 상기 소수성 상호작용 컬럼에 세포밖 소포체가 결합할 수 있도록 컬럼 또는 시료의 소수성을 조절하는 단계;(c) 상기 소수성 상호작용 컬럼에 세포밖 소포체가 포함된 시료를 로딩하여 상기 소수성 기능기에 세포밖 소포체를 결합시키는 단계;(d) 상기 소수성 상호작용 컬럼에서 소수성 기능기에 결합하지 않은 시료 잔여물을 세척하는 단계; 및 (e) 상기 소수성 상호작용 컬럼으로부터 소수성 기능기와 결합한 세포밖 소포체를 용출시키는 단계를 포함하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 작은 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
2 2
제1항에 있어서,상기 (b) 단계는 상기 소수성 상호작용 컬럼을 염석 이온을 포함하는 용액으로 세척하는 단계인 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 작은 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
3 3
삭제
4 4
삭제
5 5
제1항에 있어서,상기 (b) 단계는 세포밖 소포체가 포함된 시료에 염석 이온을 포함하는 용액을 첨가하여, 시료에 포함된 염석 이온의 농도 또는 종류를 변화시키는 단계인 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 작은 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
6 6
제1항에 있어서,상기 (d) 단계는 염석 이온의 종류 또는 농도를 조절하여 세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 작은 물질을 제거하는 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 작은 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
7 7
제2항, 제5항 또는 제6항에 있어서,상기 염석 이온의 농도는 0 M ~ 10 M인 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 작은 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
8 8
제2항, 제5항 또는 제6항에 있어서,상기 염석 이온은 황산염, 인산염, 수산화물, 불소화물, 포름산염, 초산염, 염화물, 브롬화물, 질산염, 요오드화물, 티오시안산염, 구연산염 및 주석산염으로 이루어진 군에서 하나 이상 선택되는 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 작은 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
9 9
제1항에 있어서,상기 고정상은 아가로스 비드, 세파로스 비드, 세파덱스 비드, 실리카 비드, 마그네틱 비드, 금 나노입자, 은 나노입자, 산화철 나노입자, 나일론 멤브레인, 니트로셀룰로오스 멤브레인, PVDF 멤브레인, 종이, 플라스틱, 유리 및 금속 센서칩으로 이루어진 군에서 하나 이상 선택되는 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 작은 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
10 10
제1항에 있어서,상기 소수성 기능기는 부틸기, 시아노부틸기, 옥틸기, 페닐기 및 다이페닐기로 이루어진 군에서 하나 이상 선택되는 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 작은 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
11 11
제1항에 있어서, 상기 시료는 포유동물 세포 배양 배지, 박테리아 세포 배양 배지, 효모 배양 배지, 조직 추출물, 암 조직, 혈청, 혈장, 침, 눈물, 콧물, 땀, 소변, 대변, 뇌척수액, 복수, 양수, 기관지 세척액, 흉수, 정액, 유(乳, breast milk), 먼지, 담수, 해수, 토양 및 발효식품으로 이루어진 군에서 하나 이상 선택되는 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 작은 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
12 12
제1항에 있어서,상기 세포밖 소포체의 분리방법은 상기 (c) 단계의 세포밖 소포체가 포함된 시료를 상기 소수성 상호작용 컬럼에 로딩하기 전에 전처리하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 작은 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
13 13
제12항에 있어서,상기 시료의 전처리 단계는 원심분리법, 초원심분리법, 여과법, 한외여과법, 투석법, 탈염 컬럼 크로마토그래피법, 음파처리법, 밀도 구배법, 크기 배제법, 이온교환 크로마토그래피법, 친화성 크로마토그래피법, 침전법 및 수용액 이상계법으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 방법인 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 작은 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
14 14
제1항에 있어서,상기 세포밖 소포체의 분리방법은 상기 (e) 단계에서 용출된 시료 중 세포밖 소포체를 후처리하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 작은 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
15 15
제14항에 있어서,상기 세포밖 소포체의 후처리 단계는 원심분리법, 초원심분리법, 여과법, 한외여과법, 투석법, 탈염 컬럼 크로마토그래피법, 음파처리법, 밀도 구배법, 크기 배제법, 이온교환 크로마토그래피법, 친화성 크로마토그래피법, 침전법 및 수용액 이상계법으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 방법인 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 작은 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
16 16
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17 17
(a) 고정상에 소수성 기능기(hydrophobic functional groups)를 고정시켜 소수성 상호작용 컬럼을 준비하는 단계;(b) 상기 소수성 상호작용 컬럼에 세포밖 소포체가 결합하지 않도록 컬럼 또는 시료의 소수성을 조절하는 단계;(c) 상기 소수성 상호작용 컬럼에 세포밖 소포체가 포함된 시료를 로딩하는 단계; 및(d) 상기 소수성 상호작용 컬럼에 결합하지 않은 세포밖 소포체를 포함하는 시료를 수획하는 단계를 포함하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 큰 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
18 18
제17항에 있어서,상기 (b) 단계는 상기 소수성 상호작용 컬럼을 염석 이온을 포함하는 용액으로 세척하는 단계인 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 큰 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
19 19
제18항에 있어서,상기 염석 이온의 농도는 0 M ~ 10 M인 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 큰 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
20 20
제17항에 있어서,상기 (b) 단계는 세포밖 소포체가 포함된 시료에 염석 이온을 포함한 용액 또는 염석 이온을 포함하지 않은 용액을 첨가하여, 시료에 포함된 염석 이온의 농도 또는 종류를 변화시키는 단계인 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 큰 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
21 21
제20항에 있어서,상기 염석 이온의 농도는 0 M ~ 10 M인 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 큰 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
22 22
제18항 또는 제20항에 있어서,상기 염석 이온은 황산염, 인산염, 수산화물, 불소화물, 포름산염, 초산염, 염화물, 브롬화물, 질산염, 요오드화물, 티오시안산염, 구연산염 및 주석산염으로 이루어진 군에서 하나 이상 선택되는 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 큰 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
23 23
제17항에 있어서,상기 고정상은 아가로스 비드, 세파로스 비드, 세파덱스 비드, 실리카 비드, 마그네틱 비드, 금 나노입자, 은 나노입자, 산화철 나노입자, 나일론 멤브레인, 니트로셀룰로오스 멤브레인, PVDF 멤브레인, 종이, 플라스틱, 유리 및 금속 센서칩으로 이루어진 군에서 하나 이상 선택되는 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 큰 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
24 24
제17항에 있어서,상기 소수성 기능기는 부틸기, 시아노뷰틸기, 옥틸기, 페닐기 및 다이페닐기로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 큰 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
25 25
제17항에 있어서, 상기 시료는 포유동물 세포 배양 배지, 박테리아 세포 배양 배지, 효모 배양 배지, 조직 추출물, 암 조직, 혈청, 혈장, 침, 눈물, 콧물, 땀, 소변, 대변, 뇌척수액, 복수, 양수, 기관지 세척액, 흉수, 정액, 유(乳, breast milk), 먼지, 담수, 해수, 토양 및 발효식품으로 이루어진 군에서 하나 이상 선택되는 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 큰 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
26 26
제17항에 있어서,상기 세포밖 소포체의 분리방법은 상기 (c) 단계의 세포밖 소포체가 포함된 시료를 상기 소수성 상호작용 컬럼에 로딩하기 전에 전처리하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 큰 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
27 27
제26항에 있어서,상기 시료의 전처리 단계는 원심분리법, 초원심분리법, 여과법, 한외여과법, 투석법, 탈염 컬럼 크로마토그래피법, 음파처리법, 밀도 구배법, 크기 배제법, 이온교환 크로마토그래피법, 친화성 크로마토그래피법, 침전법 및 수용액 이상계법으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 방법인 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 큰 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
28 28
제17항에 있어서,상기 세포밖 소포체의 분리방법은 상기 (c) 단계의 수획된 시료 중 세포밖 소포체를 후처리하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 큰 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
29 29
제28항에 있어서,상기 세포밖 소포체의 후처리 단계는 원심분리법, 초원심분리법, 여과법, 한외여과법, 투석법, 탈염 컬럼 크로마토그래피법, 음파처리법, 밀도 구배법, 크기 배제법, 이온교환 크로마토그래피법, 친화성 크로마토그래피법, 침전법 및 수용액 이상계법으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 방법인 것을 특징으로 하는세포밖 소포체보다 소수성 상호작용의 세기가 큰 물질로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법
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4 WO2019022538 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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