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글리코겐 신타제 키나제 3β(Glycogen Synthase Kinase 3: GSK-3) 저해제, 염기성 섬유아세포 성장인자(base Fibroblast Growth Factor: bFGF), 및 레티노산(Retinoic Acid: RA)을 포함하는 배지에서 줄기세포를 배양하여 중간중배엽(Intermediate Mesoderm: IM)으로의 분화를 유도하는 단계; 및bFGF, 섬유아세포 성장인자(Fibroblast Growth Factor 9: FGF9), 프로스타글란딘 D2(Prostaglandin D2: PDG2), 여포자극호르몬(Follicle-Stimulating Hormone: FSH), 및 교세포유래신경영양인자(Glial cell Derived Neurotrophic Factor: GDNF)를 포함하는 배지에서 상기 유도된 IM을 배양하여 세르톨리유사세포(Sertoli-Like Cell: SLC)로의 분화를 유도하는 단계를 포함하는 줄기세포에서 SLC를 제조하는 방법
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청구항 1에 있어서, 상기 IM으로의 분화를 유도하는 단계는 (a) GSK-3 저해제를 포함하는 배지에서 줄기세포를 배양하는 단계; 및 (b) 상기 배지에 bFGF 및 RA를 첨가하고 추가적으로 배양하는 단계를 포함하는 것인 방법
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청구항 2에 있어서, 상기 (a) 단계의 배양기간은 1일 내지 3일이고, 상기 (b) 단계의 배양기간은 2일 내지 5일인 방법
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청구항 2에 있어서, 상기 (a) 단계의 배지는 L-글루타민, 항생제, 또는 이들의 조합을 더 포함하는 것인 방법
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청구항 1에 있어서, 상기 SLC로의 분화를 유도하는 단계의 배양기간은 5일 내지 7일인 방법
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청구항 1에 있어서, 상기 GSK-3 저해제의 농도는 1 μM 내지 10 μM, bFGF의 농도는 50 ng/ml 내지 200 ng/ml, RA의 농도는 0
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청구항 1에 있어서, 상기 줄기세포는 배아 줄기세포(embryonic stem cell: ESC), 성체 줄기세포(adult stem cell), 또는 유도 만능 줄기세포(induced pluripotent stem cell: iPSC)인 것인 방법
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청구항 7에 있어서, 상기 배아 줄기세포는 마우스 배아 줄기세포인 것인 방법
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청구항 1에 있어서, 상기 배지는 DMEM(Dulbecco's modified Eagle medium), Keratinocyte-SFM(Keratinocyte serum free medium), 및 RPMI 1640 배지(Roswell Park Memorial Institute 1640 medium)로 구성된 군으로부터 선택된 1종 이상인 것인 방법
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청구항 1에 있어서, 상기 SLC로의 분화를 유도하는 단계에서 배지가 인슐린-트랜스페린-셀레늄(Insulin-Transferrin-Selenium: ITS)을 더 포함하는 것인 방법
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청구항 1에 있어서, 유도된 SLC를 분리 또는 정제하는 단계를 더 포함하는 것인 방법
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GSK-3 저해제, bFGF, 및 RA를 포함하는 줄기세포의 IM으로의 분화 유도용 조성물; 및 bFGF, FGF9, PDG2, FSH, 및 GDNF를 포함하는 IM의 SLC로의 분화 유도용 조성물을 포함하는 줄기세포의 SLC로의 분화용 조성물
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청구항 1의 방법에 의해 제조된 SLC
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청구항 13에 있어서, Wt1, Sox9, Sf1, Gata4, Fshr, Scf, 또는 이들의 조합을 발현하는 것인 SLC
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청구항 1의 방법에 의해 제조된 SLC를 포함하는 자가면역질환 치료용 세포치료제
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청구항 15에 있어서, 상기 자가면역질환이 류마티스 관절염, 골 관절염, 베체트병, 자가면역 혈구감소증, 자가면역 심근염, 아토피피부염, 천식, 일차성간경변, 피부근염, 굿파이처 증후군, 자가면역 뇌수막염, 쇼그렌 증후군, 전신 홍반성 루프스, 애디슨병, 원형 탈모증, 강직성 척수염, 자가면역성 간염, 자가면역성 이하선염, 크론병, 당뇨성 질환, 이영양성 수포성 표피박리증, 부고환염, 사구체 신염, 그레이브스병, 길랑바레 증후군, 하시모토병, 용혈성 빈혈, 전신성 홍반성 낭창, 다발성 경화증, 중증 근무력증, 심상천포창, 건선, 유육종증, 피부 경화증, 척추관절증, 악성빈혈, 공피증, 미토콘드리아 관련 증후군 및 염증성 장질환으로 구성된 군으로부터 선택된 1종 이상인 것인 세포치료제
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