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크기 배제 크로마토그래피를 이용한 세포밖 소포체의 순도 분석 방법

  • 기술번호 : KST2019003115
  • 담당센터 : 대구기술혁신센터
  • 전화번호 : 053-550-1450
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 크기 배제 크로마토그래피를 이용한 세포밖 소포체의 순도 분석 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게 본 발명은 크기 배제 크로마토그래피의 크기별 분획능과 단일 또는 2종 이상이 조합된 분광학적 분석법 (spectroscopy)을 이용하여 다양한 시료로부터 세포밖 소포체와 여러 오염 물질의 양을 동시에 정량함으로써 세포밖 소포체의 순도, 총량 및 수율을 분석하는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 세포밖 소포체 순도 분석 방법은 세포밖 소포체의 형태나 성질을 보존하면서 효율적으로 분석할 수 있다는 장점이 있다. 또한 본 발명의 세포밖 소포체 순도 분석 방법은 종래의 방법을 이용해 분리된 세포밖 소포체의 순도, 총량 및 수율을 빠른 시간 안에 동시에 결정할 수 있어, 분리된 세포밖 소포체를 이용한 질병 진단, 질병 치료, 다중 오믹스 연구 및 세포밖 소포체의 특성 연구 등에 활용이 가능하다. 또한 본 발명의 순도 분석 방법은 새로운 분리 방법을 개발하는 데도 활용이 가능하다.
Int. CL G01N 30/88 (2006.01.01) B01D 15/34 (2006.01.01) G01N 21/31 (2006.01.01)
CPC
출원번호/일자 1020180114980 (2018.09.27)
출원인 ㈜로제타엑소좀, 포항공과대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2019-0036500 (2019.04.04) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020170124848   |   2017.09.27
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2018.09.27)
심사청구항수 16

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 ㈜로제타엑소좀 대한민국 경기도 성남시 분당구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 고용송 경상북도 포항시 남구
2 이창진 대구광역시 수성구
3 박현택 경상북도 포항시 남구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 김석만 대한민국 서울시 강남구 테헤란로**길 ** *층 (역삼동, JS빌딩)(시원국제특허법률사무소)
2 이희숙 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 **길 ** *층 (역삼동, JS빌딩)(시원국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 ㈜로제타엑소좀 경기도 성남시 분당구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2018.09.27 수리 (Accepted) 1-1-2018-0954523-56
2 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment
2018.09.28 수리 (Accepted) 1-1-2018-0959440-26
3 [출원인변경]권리관계변경신고서
[Change of Applicant] Report on Change of Proprietary Status
2018.09.28 수리 (Accepted) 1-1-2018-0959578-17
4 [출원인변경]권리관계변경신고서
[Change of Applicant] Report on Change of Proprietary Status
2018.10.29 수리 (Accepted) 1-1-2018-1069805-35
5 [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Agent] Report on Agent (Representative)
2019.09.27 수리 (Accepted) 1-1-2019-0993593-24
6 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2019.10.25 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0775644-54
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.11.20 수리 (Accepted) 4-1-2019-5243581-27
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.11.22 수리 (Accepted) 4-1-2019-5245997-53
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.11.25 수리 (Accepted) 4-1-2019-5247115-68
10 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2019.12.24 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2019-1337253-31
11 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2019.12.24 수리 (Accepted) 1-1-2019-1337044-06
12 등록결정서
Decision to grant
2020.02.07 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2020-0094685-00
13 [출원인변경]권리관계변경신고서
[Change of Applicant] Report on Change of Proprietary Status
2020.03.20 수리 (Accepted) 1-1-2020-0295382-38
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.05.06 수리 (Accepted) 4-1-2020-5101216-16
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
(a) 세포밖 소포체를 포함하는 시료를 크기 배제 크로마토그래피 컬럼에 주입하여 전개시키는 단계; (b) 상기 전개된 시료의 특정 파장에 대한 흡광 크로마토그램을 검출하는 단계;(c) 상기 단계 (b)의 흡광 크로마토그램으로부터 세포밖 소포체의 흡광 밴드와 불순물의 흡광 밴드를 구별하는 단계;(d) 상기 단계 (b)의 흡광 크로마토그램으로부터 세포밖 소포체의 흡광 밴드 면적 및 불순물의 흡광 밴드 면적을 계산하는 단계; 및(e) 상기 세포밖 소포체의 흡광 밴드 면적 값과 불순물의 흡광 밴드 면적 값으로부터 세포밖 소포체의 순도를 계산하는 단계를 포함하되, 상기 특정 파장은 230 nm, 260 nm 및 280 nm을 포함한 3종 이상의 파장인 세포밖 소포체의 순도 분석 방법
2 2
제1항에 있어서,상기 시료는 포유동물 세포 배양 배지, 박테리아 세포 배양 배지, 효모 배양 배지, 조직 추출물, 암 조직, 혈청, 혈장, 침, 눈물, 땀, 소변, 대변, 뇌척수액(CSF, cerebrospinal fluid), 복수(ascite), 양수(amniotic fluid), 정액, 유(milk), 먼지, 담수, 해수, 토양 및 발효식품으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체의 순도 분석 방법
3 3
삭제
4 4
제1항에 있어서,상기 특정 파장은 330 내지 450 nm 범위 중 하나 이상, 230 nm, 260 nm 및 280 nm의 4종 이상의 파장인 세포밖 소포체의 순도 분석 방법
5 5
제1항에 있어서,상기 세포밖 소포체의 흡광 밴드는 하기 조건을 만족하는 것인 세포밖 소포체의 순도 분석 방법:i) 230 nm, 260 nm, 280 nm 에서 모두 흡광도를 가지는 피크;ii) 280 nm 흡광도에 대한 260 nm 흡광도의 비율(260 nm/280 nm)의 값이 1 이상인 피크; 및iii) 330 nm 내지 450 nm 범위에서 선택되는 하나 이상의 파장에 대한 피크가 존재
6 6
제1항에 있어서,상기 불순물의 흡광 밴드는 하기 조건 중 하나 이상을 만족하지 않는 것인 세포밖 소포체의 순도 분석 방법:i) 230 nm, 260 nm, 280 nm 에서 모두 흡광도를 가지는 피크;ii) 280 nm 흡광도에 대한 260 nm 흡광도의 비율(260 nm/280 nm)의 값이 1 이상인 피크; 또는iii) 330 nm 내지 450 nm 범위에서 선택되는 하나 이상의 파장에 대한 피크가 존재
7 7
제1항에 있어서,상기 세포밖 소포체의 흡광 밴드 면적(AEV)은 하기 조건을 만족하는 230 nm 피크 아래의 면적을 계산한 것인 세포밖 소포체의 순도 분석 방법:i) 230 nm, 260 nm, 280 nm 에서 모두 흡광도를 가지는 피크;ii) 280 nm 흡광도에 대한 260 nm 흡광도의 비율(260 nm/280 nm)의 값이 1 이상인 피크; 및iii) 330 nm 내지 450 nm 범위에서 선택되는 하나 이상의 파장에 대한 피크가 존재
8 8
제1항에 있어서,상기 불순물의 흡광 밴드 면적(ACONT)은 하기 조건 중 하나 이상을 만족하지 않는 230 nm 피크 아래의 면적을 계산한 것인 세포밖 소포체의 순도 분석 방법:i) 230 nm, 260 nm, 280 nm 에서 모두 흡광도를 가지는 피크;ii) 280 nm 흡광도에 대한 260 nm 흡광도의 비율(260 nm/280 nm)의 값이 1 이상인 피크; 또는iii) 330 nm 내지 450 nm 범위에서 선택되는 하나 이상의 파장에 대한 피크가 존재
9 9
제1항에 있어서,상기 세포밖 소포체의 순도는 하기 식을 이용하여 계산하는 것인 세포밖 소포체의 순도 분석 방법:위 식에서 AEV는 세포밖 소포체의 흡광 밴드 면적이고, ACONT는 불순물의 흡광 밴드 면적임
10 10
(a) 세포밖 소포체를 포함하는 시료를 크기 배제 크로마토그래피 컬럼에 주입하여 전개시키는 단계;(b) 상기 전개된 시료의 제1 파장에 대한 흡광 크로마토그램을 검출하는 단계;(c) 상기 전개된 시료의 상기 제1 파장과 상이한 제2 파장에 대한 흡광 크로마토그램을 검출하는 단계; 및(d) 상기 각각의 흡광 크로마토그램으로부터 세포밖 소포체의 흡광 밴드 면적 또는 불순물의 흡광 밴드 면적을 계산하는 단계를 포함하되, 상기 제1파장 및 제2파장은 230 nm, 260 nm 및 280 nm을 포함한 3종 이상의 파장인 세포밖 소포체의 분석 방법
11 11
삭제
12 12
삭제
13 13
제10항에 있어서,상기 제1 파장은 330 내지 450 nm 범위 중 하나, 230 nm, 260 nm 및 280 nm의 4종류의 파장이며,상기 제2 파장은 200 nm ~ 800 nm 범위에서 선택되는 하나 이상의 값인 세포밖 소포체의 분석 방법
14 14
제10항에 있어서,상기 세포밖 소포체의 분석은 상기 각 파장에 대한 세포밖 소포체의 흡광 밴드 면적의 비율을 분석하는 단계를 포함하는 것인 세포밖 소포체의 분석 방법
15 15
제10항에 있어서,상기 세포밖 소포체의 분석은 상기 각 파장에 대한 불순물의 흡광 밴드 면적의 비율을 분석하는 단계를 포함하는 것인 세포밖 소포체의 분석 방법
16 16
(a) 세포밖 소포체를 포함하는 시료를 크기 배제 크로마토그래피 컬럼에 주입하여 전개시키는 단계; (b) 상기 전개된 시료의 특정 파장에 대한 흡광 크로마토그램을 검출하는 단계;(c) 상기 단계 (b)의 흡광 크로마토그램으로부터 세포밖 소포체의 흡광 밴드 면적을 계산하는 단계; 및(d) 상기 세포밖 소포체의 흡광 밴드 면적으로부터 세포밖 소포체의 총량을 계산하는 단계를 포함하되, 상기 특정 파장은 230 nm, 260 nm 및 280 nm을 포함한 3종 이상의 파장인 세포밖 소포체의 정량 분석 방법
17 17
삭제
18 18
제16항에 있어서,상기 특정 파장은 330 내지 450 nm 범위 중 하나 이상, 230 nm, 260 nm 및 280 nm의 4종 이상의 파장인 세포밖 소포체의 정량 분석 방법
19 19
제16항에 있어서,상기 세포밖 소포체의 흡광 밴드 면적(AEV)은 하기 조건을 만족하는 230 nm 피크 아래의 면적을 계산한 것인 세포밖 소포체의 정량 분석 방법:i) 230 nm, 260 nm, 280 nm 에서 모두 흡광도를 가지는 피크;ii) 280 nm 흡광도에 대한 260 nm 흡광도의 비율(260 nm/280 nm)의 값이 1 이상인 피크; 및iii) 330 nm 내지 450 nm 범위에서 선택되는 하나 이상의 파장에 대한 피크가 존재
20 20
제16항에 있어서,상기 세포밖 소포체의 총량은 하기 식을 이용하여 계산하는 단계를 포함하는 세포밖 소포체의 정량 분석 방법:위 식에서 AEV는 세포밖 소포체의 흡광 밴드 면적이며, a, b는 상수임
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