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CRISPR 시스템의 기능을 향상시키는 방법으로서, 표적 DNA에 상보적인 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 가이드 RNA에서, 표적 DNA와 이에 상보적인 뉴클레오타이드 서열 간에 1개 이상의 미스매치 (mismatch)를 부여하는 단계를 포함하며, 상기 미스매치는 표적 DNA의 프로토스페이서-인접 모티프(protospacer-adjacent motif, PAM)로부터 +11 내지 +19인 PAM distal 부위에 위치하는 것인, 방법
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청구항 1에 있어서, 상기 방법은 미스매치가 없는 가이드 RNA에 비하여 특이성 또는 민감성이 증가하는 것인, 방법
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표적 DNA에 상보적인 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 가이드 RNA; 및Cas9 폴리펩타이드 또는 이를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하는, DNA 표적용 조성물에 있어서, 상기 표적 DNA에 상보적인 뉴클레오타이드 서열은 표적 DNA와 1개 이상의 미스매치(mismatch)를 포함하고, 상기 미스매치는 표적 DNA의 프로토스페이서-인접 모티프(protospacer-adjacent motif, PAM)로부터 +11 내지 +19인 PAM distal 부위에 위치하는 것인, 조성물
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청구항 4에 있어서, 상기 Cas9은 생물학적으로 불활성화된 Cas (dCas)인 것인, 조성물
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청구항 4에 있어서, 상기 Cas9 폴리펩타이드는 C-말단, N-말단 또는 C-말단 및 N-말단에, KRAB (Kruppel associated box), KOX (Kruppel-type zinc finger factor), SID (mSin interaction domain), MBD2(methyl-CpG binding domain protein 2), MBD3, DNMT1 (DNA Methyltransferase 1), DNMT3A (DNA methyltransferase 3A) 및 DNMT3B (DNA methyltransferase 3B)로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 도메인이 연결된 것인, 조성물
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청구항 7에 있어서, 상기 Cas9 폴리펩타이드는 N-말단에 KRAB 도메인이 연결된 것인, 조성물
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표적 DNA에 상보적인 뉴클레오타이드 서열이 표적 DNA와 1개 이상의 미스매치(mismatch)를 포함하고, 상기 미스매치는 표적 DNA의 프로토스페이서-인접 모티프(protospacer-adjacent motif, PAM)로부터 +11 내지 +19인 PAM distal 부위에 위치하는 것인, 단일 가닥 가이드 RNA (sgRNA)
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표적 DNA에 상보적인 뉴클레오타이드 서열에 1개 이상의 미스매치 (mismatch)를 부여하는 단계를 포함하고, 상기 미스매치는 표적 DNA의 프로토스페이서-인접 모티프(protospacer-adjacent motif, PAM)로부터 +11 내지 +19인 PAM distal 부위에 위치하는 것인, 단일 가닥 가이드 RNA (sgRNA)의 제조 방법
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표적 DNA에 상보적인 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 가이드 RNA로서, 표적 DNA에 상보적인 뉴클레오타이드 서열은 표적 DNA와 1개 이상의 미스매치(mismatch)를 포함하는 가이드 RNA; 및Cas9 폴리펩타이드 또는 이를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하고, 상기 미스매치는 표적 DNA의 프로토스페이서-인접 모티프(protospacer-adjacent motif, PAM)로부터 +11 내지 +19인 PAM distal 부위에 위치하는 것인, 유전자 교정용 조성물
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표적 DNA에 상보적인 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 가이드 RNA로서, 표적 DNA에 상보적인 뉴클레오타이드 서열은 표적 DNA와 1개 이상의 미스매치(mismatch)를 포함하는 가이드 RNA; 및Cas9 폴리펩타이드 또는 이를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하고, 상기 미스매치는 표적 DNA의 프로토스페이서-인접 모티프(protospacer-adjacent motif, PAM)로부터 +11 내지 +19인 PAM distal 부위에 위치하는 것인, 암의 예방 또는 치료용 조성물
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표적 DNA에 상보적인 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 가이드 RNA로서, 표적 DNA에 상보적인 뉴클레오타이드 서열은 표적 DNA와 1개 이상의 미스매치(mismatch)를 포함하는 가이드 RNA; 및Cas9 폴리펩타이드 또는 이를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하고, 상기 미스매치는 표적 DNA의 프로토스페이서-인접 모티프(protospacer-adjacent motif, PAM)로부터 +11 내지 +19인 PAM distal 부위에 위치하는 것인, 암의 진단용 조성물
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표적 DNA에 상보적인 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 가이드 RNA로서, 표적 DNA에 상보적인 뉴클레오타이드 서열은 표적 DNA와 1개 이상의 미스매치(mismatch)를 포함하는 가이드 RNA; 및Cas9 폴리펩타이드 또는 이를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하고, 상기 미스매치는 표적 DNA의 프로토스페이서-인접 모티프(protospacer-adjacent motif, PAM)로부터 +11 내지 +19인 PAM distal 부위에 위치하는 것인, 암의 이미징 조성물
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청구항 4의 DNA 표적용 조성물을 분리된 진핵 세포 또는 인간을 제외한 진핵 유기체에 투여하는 단계를 포함하는, DNA 표적 방법
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청구항 12의 유전자 교정용 조성물을 분리된 진핵 세포 또는 인간을 제외한 진핵 유기체에 투여하는 단계를 포함하는, 유전자 교정 방법
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