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패혈증 진단용 키트 및 이를 이용한 진단방법

  • 기술번호 : KST2019012358
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요약 본 발명은 패혈증 원인균 특이적 유전체의 일부와 상보적으로 결합하는 타켓포획 올리고뉴클레오티드가 결합된 제1 코어 금 나노입자 및 이와 서로 중첩되지 않고 연속적인 패혈증 원인균 특이적 유전체의 일부와 상보적인 서열을 포함하고, 일 말단에는 라만활성분자가 결합된 타켓포획 올리고뉴클레오티드가 다른 말단을 통해 결합된 제2 코어 금 나노입자를 포함하는 패혈증 진단용 키트 및 이를 이용한 패혈증 진단방법에 관한 것이다.
Int. CL G01N 33/569 (2017.01.01) G01N 33/543 (2006.01.01) G01N 33/53 (2006.01.01) G01N 21/65 (2006.01.01)
CPC
출원번호/일자 1020180076725 (2018.07.02)
출원인 한국화학연구원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2019-0003419 (2019.01.09) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020170083717   |   2017.06.30
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2018.07.02)
심사청구항수 17

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국화학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 서영덕 대한민국 서울특별시 양천구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인한얼 대한민국 서울특별시 송파구 법원로 ***, *층(문정동)

최종권리자

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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2018.07.02 수리 (Accepted) 1-1-2018-0651196-45
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2018.09.06 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2018.11.09 수리 (Accepted) 9-1-2018-0060596-52
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2019.08.20 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0598843-81
5 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2019.10.21 수리 (Accepted) 1-1-2019-1073632-17
6 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2019.11.20 수리 (Accepted) 1-1-2019-1193917-16
7 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2019.12.17 수리 (Accepted) 1-1-2019-1305552-94
8 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2020.01.20 수리 (Accepted) 1-1-2020-0064316-84
9 지정기간연장 관련 안내서
Notification for Extension of Designated Period
2020.01.23 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2020-0013697-62
10 [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Agent] Report on Agent (Representative)
2020.02.08 수리 (Accepted) 1-1-2020-0133754-65
11 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2020.02.20 수리 (Accepted) 1-1-2020-0183929-64
12 지정기간연장승인서
Acceptance of Extension of Designated Period
2020.02.24 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2020-0137355-91
13 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2020.03.20 수리 (Accepted) 1-1-2020-0297208-59
14 지정기간연장승인서
Acceptance of Extension of Designated Period
2020.03.24 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2020-0214194-76
15 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2020.04.29 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2020-0444401-70
16 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견서·답변서·소명서
2020.04.29 수리 (Accepted) 1-1-2020-0444400-24
17 등록결정서
Decision to grant
2020.10.22 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2020-0729534-31
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번호 청구항
1 1
패혈증 제1 원인균 특이적 유전체의 일부와 상보적으로 결합하는 제1 타켓포획 올리고뉴클레오티드가 일 말단을 통해 결합된 제1 코어 금 나노입자;패혈증 제1 원인균 특이적 유전체의 다른 일부와 상보적으로 결합하는 제2 타켓포획 올리고뉴클레오티드가 일 말단을 통해 결합된 제2 코어 금 나노입자; 및안정화제, 환원제 및 은 또는 금 이온을 포함하는 용액;을 포함하는 패혈증 진단용 키트로서,상기 제1 타켓포획 올리고뉴클레오티드 또는 제2 타켓포획 올리고뉴클레오티드 중 어느 하나는 금 나노입자에 결합하지 않은 다른 말단에 제1 라만활성분자가 결합된 것인 키트
2 2
제1항에 있어서,상기 패혈증 제1 원인균과 상이한 패혈증 제2 원인균 특이적 유전체의 일부와 상보적으로 결합하는 제3 타켓포획 올리고뉴클레오티드가 일 말단을 통해 결합된 제3 코어 금 나노입자; 및 패혈증 제2 원인균 특이적 유전체의 다른 일부와 상보적으로 결합하는 제4 타켓포획 올리고뉴클레오티드가 일 말단을 통해 결합된 제4 코어 금 나노입자를 1쌍 이상 추가로 포함하여 복수의 패혈증 원인균을 동시에 진단 가능하고, 상기 제3 타켓포획 올리고뉴클레오티드 또는 제4 타켓포획 올리고뉴클레오티드 중 어느 하나는 금 나노입자에 결합하지 않은 다른 말단에 제2 라만활성분자가 결합된 것인, 패혈증 진단용 키트
3 3
제2항에 있어서,상기 제3 코어 금 나노입자 및 제4 코어 금 나노입자는 각각 제1 코어 금 나노입자와 제2 코어 금 나노입자 중 어느 하나 및 다른 하나와 크기가 동일하거나, 모두 독립적인 것인 패혈증 진단용 키트
4 4
제1항 또는 제2항에 있어서,상기 제1 코어 금 나노입자 및 제3 코어 금 나노입자는 각각 독립적으로 10 내지 50 nm의 평균 직경을 가지며, 상기 제2 코어 금 나노입자 및 제4 코어 금 나노입자는 각각 제1 코어 금 나노입자 및 제3 코어 금 나노입자의 1 내지 2배의 평균 직경을 갖는 것인 패혈증 진단용 키트
5 5
제1항 또는 제2항에 있어서,상기 제1 타켓포획 올리고뉴클레오티드과 제2 타켓포획 올리고뉴클레오티드, 및 제3 타켓포획 올리고뉴클레오티드과 제4 타켓포획 올리고뉴클레오티드는 이들에 포함된 염기 수가 서로 동일하거나 ±5개 이내의 차이를 가지며, 제1 타켓포획 올리고뉴클레오티드 및 제2 타켓포획 올리고뉴클레오티드의 염기 수의 총 합 및 제3 타켓포획 올리고뉴클레오티드 및 제4 타켓포획 올리고뉴클레오티드의 염기 수의 총 합은 각각 독립적으로 15 내지 100인 것인 패혈증 진단용 키트
6 6
제1항 또는 제2항에 있어서,상기 제1 코어 금 나노입자 및 제3 코어 금 나노입자의 크기가 20 nm인 경우 각각 제1 타켓포획 올리고뉴클레오티드 및 제2 타켓포획 올리고뉴클레오티드의 염기 수의 총 합 및 제3 타켓포획 올리고뉴클레오티드 및 제4 타켓포획 올리고뉴클레오티드의 염기 수의 총 합이 30인 것을 기준으로, 제1 코어 금 나노입자의 크기와 제1 타켓포획 올리고뉴클레오티드 및 제2 타켓포획 올리고뉴클레오티드의 염기 수의 총 합, 및 제3 코어 금 나노입자의 크기와 제3 타켓포획 올리고뉴클레오티드 및 제4 타켓포획 올리고뉴클레오티드의 염기 수의 총 합은 서로 비례하는 것인 패혈증 진단용 키트
7 7
제1항 또는 제2항에 있어서,상기 제1 코어 금 나노입자 내지 제4 코어 금 나노입자는 표준편차 ±0
8 8
제1항 또는 제2항에 있어서,상기 패혈증 제1 원인균 및 제2 원인균은 각각 독립적으로 대장균(Escherichia coli), 폐렴막대균(Klepsiella pneumoniae), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 연쇄상구균(Streptococcus pyogenes), 엔테로코쿠스 파이칼리스균(Enterococcus faecalis), 및 녹농균(Pseudomonas aeruginosa)으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 패혈증 진단용 키트
9 9
제1항 또는 제2항에 있어서,제1 코어 금 나노입자, 제2 코어 금 나노입자, 제3 코어 금 나노입자 및 제4 코어 금 나노입자는 각각 독립적으로 20 내지 100 nm의 직경을 갖는 완전 구형 입자인 것인 패혈증 진단용 키트
10 10
제1항 또는 제2항에 있어서,상기 제1 타켓포획 올리고뉴클레오티드 및 제2 타켓포획 올리고뉴클레오티드 중 어느 하나는 5' 말단을 통해, 각각의 다른 하나는 3' 말단을 통해 각각 제1 코어 금 나노입자 및 제2 코어 금 나노입자에 결합되고, 제3 타켓포획 올리고뉴클레오티드 및 제4 타켓포획 올리고뉴클레오티드 중 어느 하나는 5' 말단을 통해, 다른 하나는 3' 말단을 통해 각각 제3 코어 금 나노입자 및 제4 코어 금 나노입자에 결합된 것인 패혈증 진단용 키트
11 11
제1항 또는 제2항에 있어서,상기 제1 타켓포획 올리고뉴클레오티드 및 제2 타켓포획 올리고뉴클레오티드는 모두 패혈증 제1 원인균 특이적 유전체의 일부와 상보적인 5 내지 20개의 뉴클레오티드 서열을, 제3 타켓포획 올리고뉴클레오티드 및 제4 타켓포획 올리고뉴클레오티드는 모두 패혈증 제2 원인균 특이적 유전체의 일부와 상보적인 5 내지 20개의 뉴클레오티드 서열을 각각 포함하며, 이들 서열은 서로 중첩되지 않고, 제1 타켓포획 올리고뉴클레오티드 및 제2 타켓포획 올리고뉴클레오티드, 및 제3 타켓포획 올리고뉴클레오티드 및 제4 타켓포획 올리고뉴클레오티드는 각각 0 내지 3개 뉴클레오티드 간격으로 이웃하여 위치한 것인 패혈증 진단용 키트
12 12
제1항 또는 제2항에 있어서,상기 제1 또는 제2 라만활성분자는 서로 상이한 파장에서 라만 신호를 나타내는 유기 형광 분자인 것인 패혈증 진단용 키트
13 13
제1항 또는 제2항에 있어서,상기 제1 라만활성분자 및 제2 라만활성분자는 낮은 형광 신호를 나타내는 것인 패혈증 진단용 키트
14 14
패혈증 발병이 의심되는 개체로부터 수집한 검체로부터 분리한 유전체를 포함하는 시료를 준비하는 제1단계;상기 제1단계로부터 준비한 시료를 패혈증 원인균 특이적 유전체의 일부와 상보적으로 결합하는 제1 타켓포획 올리고뉴클레오티드가 일 말단을 통해 결합된 제1 코어 금 나노입자 및 패혈증 원인균 특이적 유전체의 다른 일부와 상보적으로 결합하는 제2 타켓포획 올리고뉴클레오티드가 일 말단을 통해 결합된 제2 코어 금 나노입자와 반응시키는 제2단계(이때, 상기 제1 타켓포획 올리고뉴클레오티드 또는 제2 타켓포획 올리고뉴클레오티드 중 어느 하나는 금 나노입자에 결합하지 않은 다른 말단에 라만활성분자가 결합된 것임);상기 제2단계의 생성물을 안정화제, 환원제 및 은 또는 금 이온을 포함하는 용액과 반응시켜 제1 코어 금 나노입자 및 제2 코어 금 나노입자 상에 동시에 은 또는 금으로 된 제1 쉘 및 제2 쉘을 각각 형성하는 제3단계; 및상기 제3단계로부터 수득한 생성물의 라만활성분자의 라만 신호를 측정하는 제4단계를 포함하는 패혈증 진단을 위한 정보 제공 방법
15 15
제14항에 있어서,상기 패혈증 원인균은 대장균(Escherichia coli), 폐렴막대균(Klepsiella pneumoniae), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 연쇄상구균(Streptococcus pyogenes), 엔테로코쿠스 파이칼리스균(Enterococcus faecalis), 및 녹농균(Pseudomonas aeruginosa)으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 정보 제공 방법
16 16
제14항에 있어서,제4단계로부터 측정한 라만활성분자의 라만 신호가 동일한 크기의 금 코어-은 또는 금-쉘 나노입자에 표지된 동일한 라만활성분자로부터 측정한 라만 신호에 비해 현저히 증가된 경우, 제1 타켓포획 올리고뉴클레오티드 및 제2 타켓포획 올리고뉴클레오티드과 상보적인 서열을 유전체에 포함하는 패혈증 원인균에 감염된 것으로 판단하는 것인 정보 제공 방법
17 17
제14항에 있어서,상기 제3단계는 제1 쉘과 제2 쉘 사이의 가장 짧은 거리가 0
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