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타겟 검체의 진단용 스트립 형태의 측방유동 분석-기반의 바이오센서를 제조하는 방법으로서,a) 13 내지 40 nm의 사이즈를 갖고, 표면이 L-라이신으로 개질되어 기능화된 금 나노입자를 제조하는 단계;b) 타겟 검체로서 B형 간염 바이러스(HBV) 항원에 특이적인 제1 바인더와 상기 기능화된 금 나노입자가 접합되어 있는 접합체(conjugates)를 제조하는 단계; 및c) 일단으로부터 타단 방향으로 순차적으로 (i) 흡수성 샘플 패드, (ii) 상기 단계 b)에서 제조된 접합체를 포함하는 접합 패드, (iii) 상기 접합체의 제1 바인더와 결합된 타겟 검체와 특이적으로 결합하는 제2 바인더가 고정된 테스트 영역 및 상기 타겟 검체에는 특이적으로 결합하지 않으나 상기 제1 바인더와 결합하는 제3 바인더가 고정된 컨트롤 영역을 포함하는 다공성 멤브레인 재질의 검출 영역, 및 (iv) 흡수 패드를 포함하는 측방유동 분석-기반의 센서를 제조하는 단계;를 포함하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 단계 a)는,a1) 금 나노입자의 분산액을 제공하는 단계; 및a2) 상기 금 나노입자의 분산액에 머캅토운데칸산 또는 L-라이신을 첨가하여 상기 분산액 내 금 나노입자를 기능화하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
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제2항에 있어서, 상기 L-라이신은 용액 형태로 첨가되며, 이때 L-라이신 용액의 농도는 0
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제3항에 있어서, 상기 금 나노입자의 분산액 내 금 나노입자의 함량은 0
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제4항에 있어서, 금 나노입자의 분산액 : L-라이신 용액의 체적 비는 1 내지 20 : 1의 범위인 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 제1 바인더와 기능화된 금 나노입자와의 접합체를 제조하기 위하여, 상기 기능화된 금 나노입자의 분산액 내에 pH 5 내지 10 및 0
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제2항에 있어서, 상기 단계 a1)은,(i) 시드 금 나노입자의 수분산물을 제공하는 단계;(ii) 상기 시드 금 나노입자 수분산물에 캡핑제(capping agent) 및 금 전구체를 첨가하는 단계; 및(iii) 상기 수분산물에 함유된 시드 금 나노입자를 성장시켜 증가된 사이즈의 금 나노입자를 형성하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
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제7항에 있어서, 상기 시드 금 나노입자는 5 내지 18 nm 범위의 사이즈를 갖는 것을 특징으로 하는 방법
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제7항에 있어서, 상기 금 전구체는 HAuCl4인 것을 특징으로 하는 방법
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제7항에 있어서, 상기 캡핑제는 시트레이트(citrate), 말레이트(malate), 옥살레이트(oxalate), 아스파르테이트(aspartate) 및 글루타메이트(glutamate)로 이루어진 군으로부터 적어도 하나가 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
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제7항에 있어서, 상기 금 전구체의 첨가량은, 금 전구체 : 캡핑제의 비(몰 기준)가 0
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제2항에 있어서, 상기 단계 a1)은,액상 매질 내에서 HAuCl4를 금 전구체로 하고, 소디움 시트레이트를 환원제로 하여 pH 3
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금 나노입자를 이용한 스트립 형태의 측방유동 분석-기반의 바이오센서로서,일단으로부터 타단 방향으로 순차적으로 배치된 (i) 흡수성 샘플 패드, (ii) 타겟 검체로서 B형 간염 바이러스(HBV) 항원에 특이적으로 결합하는 제1 바인더와 금 나노입자가 접합되어 있는 접합체(conjugates)를 포함하는 접합(conjugation) 패드, (iii) 상기 접합체의 제1 바인더와 결합되는 타겟 검체를 특이적으로 결합하는 제2 바인더가 고정된 테스트 영역 및 상기 타겟 검체에는 특이적으로 결합하지 않으나 상기 제1 바인더와는 결합하는 제3 바인더가 고정된 컨트롤 영역을 포함하는 다공성 멤브레인 재질의 검출 영역, 및 (iv) 흡수 패드;를 포함하고,여기서, 상기 금 나노입자는 13 내지 40 nm의 사이즈를 갖고, 표면이 L-라이신으로 개질되어 기능화된 금 나노입자인 바이오센서
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제13항에 있어서, 상기 기능화된 금 나노입자의 개질 전 금 나노입자는 10% 미만의 표준 편차를 갖는 사이즈 분포를 갖는 것을 특징으로 하는 바이오센서
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제13항에 있어서, 상기 제1 바인더, 상기 제2 바인더 및 상기 제3 바인더는 각각 항체인 것을 특징으로 하는 바이오센서
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A) 액상의 분석용 샘플을 제공하는 단계;B) 제13항에 따른 스트립 형태의 측방유동 분석-기반의 센서를 제공하는 단계;C) 상기 샘플을 상기 측방유동 분석-기반의 센서의 샘플 패드에 로딩시키는 단계; 및D) 상기 센서의 검출 영역 내 테스트 영역으로부터 상기 접합체에 의하여 생성된 시그널을 측정하여 상기 분석용 시료 내에 B형 간염 바이러스(HBV) 항원을 정성적으로, 정량적으로, 또는 정성적 및 정량적으로 분석하는 단계;를 포함하는 B형 간염 바이러스의 진단방법
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제17항에 있어서, 상기 B형 간염 바이러스 항원은 HBsAgs을 포함하는 것을 특징으로 하는 B형 간염 바이러스의 진단방법
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제18항에 있어서, 상기 접합체는 기능화된 금 나노입자와 마우스 항-휴먼 IgG(mouse-anti human IgG)의 접합체이며, 상기 컨트롤 영역 상의 제3 바인더는 항체로서 항-마우스 IgG(anti-mouse IgG)인 것을 특징으로 하는 B형 간염 바이러스의 진단방법
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제17항에 있어서, 상기 스트립 형태의 측방유동 분석-기반의 센서의 B형 간염 바이러스(HBV) 항원에 대한 검출 한계는 1 내지 10 ng/ml 범위인 것을 특징으로 하는 B형 간염 바이러스의 진단방법
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