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담즙산에 의해 발현이 유도되는 PEDV 백신 제조용 표면발현 벡터, 그에 의해 형질전환된 형질전환유산균과 이들 PEDV 백신용 표면발현벡터 및 형질전환된 재조합 유산균의 제조방법

  • 기술번호 : KST2019016539
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 미생물의 세포표면에서 발현되는 것으로, PEDV의 막단백질 유전자 중 항원결정기로 선별된 되는 아미노산 서열열을 암호화하는 염기서열을 포함하는 PEDV 백신 제조용 표면발현 벡터, 신규한 담즙산에 의해 발현이 유도되는 PEDV 백신 제조용 표면발현 벡터에 의해 M1, M2, M3 단백질이 세포표면에 발현된 형질전환유산균, 이러한 유산균을 이용한 백신에 관한 것이다. 상기 PEDV 막단백질 유전자의 염기서열은 서열번호 4로도 기재되어 있으며, 상기 PEDV 막단백질 유전자 중에서 항원성이 높은 부위인 항원결정기 M1, M2, M3의 각 아미노산 서열을 서열번호 1, 2 또는 3을 가진다. 그리고 본 발명은 상기 PEDV의 막단백질 유전자 중에서 가장 변이가 적고 항원성이 높은 영역 중 유산균 발현벡터와 융합할 각 결정항원기를 준비하는 단계, Signal sequence(SP)및 cell wall-anchoring domain(CWA) 증폭에 사용한 프라이머로, SP forward primer에 PstI 제한효소 사이트를, CWA reverse primer에는 HindⅢ 제한효소 사이트를 부착하고, 각각의 M1, M2, M3 항원결정기를 각각 SP DNA와 혼합한 후에 각각 PCR을 실시함으로써, SP와 M1, M2, M3 항원결정기가 각각 연결된 fusion gene(SP-M1, SP-M2, SP-M3)를 구축하는 단계 및 상기 SP와 M1, M2, M3 항원결정기가 각각 연결된 fusion gene(SP-M1, SP-M2, SP-M3)를 구축하여 선택된 상기 항원결정기를 유산균벡터 pBCEG29의 PstI-HindIII 사이트에 도입하여(6.5Kbp 크기의 pULP3-SPM1CWA, pULP3-SPM2CWA, pULP3-SPM3CWA) 를 각각 구축하는 단계를 포함하는 담즙산에 의해 발현이 유도되는 PEDV 백신용 표면발현벡터 제조방법과 PEDV 백신용 표면발현벡터에 의하여 형질전환된 재조합 유산균의 제조방법에 관한 것으로서, 본 발명인 담즙산에 의해 발현이 유도되는 돼지 유행성 설사 바이러스 (porcine epidemic diarrhea virus, PEDV) 백신용 벡터로 형질전환된 Lactobacillus plantarum 재조합 유산균을 이용함으로써 PEDV의 감염을 예방하고 치료함으로써 돼지의 PEDV 질병으로 인한 농가의 경제적 손실을 막을 수 있다.
Int. CL C12N 15/74 (2006.01.01) C12N 15/64 (2006.01.01) A61K 39/09 (2006.01.01) A61K 39/00 (2006.01.01)
CPC
출원번호/일자 1020190098260 (2019.08.12)
출원인 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2019-0096910 (2019.08.20) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 공개
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자 10-2017-0138051 (2017.10.24)
관련 출원번호 1020170138051
심사청구여부/일자 Y (2019.08.12)
심사청구항수 11

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단 대한민국 충청남도 천안시 동남구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 강대경 경기도 과천시 관문로 ***
2 채종표 충청남도 천안시 서북구
3 오주경 충청남도 천안시 동남구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 신명건 대한민국 서울특별시 서초구 법원로*길 **(서초동, 수빌딩 *층)(최신특허법률사무소)

최종권리자

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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [분할출원]특허출원서
[Divisional Application] Patent Application
2019.08.12 수리 (Accepted) 1-1-2019-0824983-19
2 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2019.10.17 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0752198-19
3 거절결정서
Decision to Refuse a Patent
2019.12.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0940217-09
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번호 청구항
1 1
돼지 유행성 설사 바이러스 (porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)의 막단백질 유전자 중에서 선별된 서열번호 1, 서열번호 2, 또는 서열번호 3으로 이루어지는 아미노산 서열을 갖는 PEDV의 항원 결정기
2 2
PEDV의 막단백질 유전자 중에서 선별된 서열번호 1로 이루어지는 아미노산 서열, 서열번호 2로 이루어지는 아미노산 서열 및 서열번호 3로 이루어지는 아미노산 서열로 이루어지는 군에서 선택된 하나 이상의 돼지 유행성 설사 바이러스 (porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)의 항원 결정기를 발현하는, PEDV 백신 제조용 표면발현 벡터
3 3
제2항에 있어서, 상기 PEDV 백신 제조용 표면발현 벡터는, 담즙산에 의해 발현이 유도되는 유산균용 벡터 pBCEG29를 이용하는 것을 특징으로 하는, PEDV 백신 제조용 표면발현 벡터
4 4
제3항에 있어서, 상기 PEDV 백신 제조용 표면발현 벡터는 pULP3-SPM1CWA, pULP3-SPM2CWA, 또는 pULP3-SPM3CWA인 PEDV 백신 제조용 표면발현 벡터
5 5
돼지 유행성 설사 바이러스 (porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)의 막단백질 유전자 중에서 선별된 서열번호 1로 이루어지는 아미노산 서열, 서열번호 2로 이루어지는 아미노산 서열 및 서열번호 3로 이루어지는 아미노산 서열로 이루어지는 군에서 선택된 하나 이상의 PEDV의 항원결정기(M1, M2, M3)를 준비하는 단계;Signal sequence(SP)및 cell wall-anchoring domain(CWA) 증폭에 사용한 프라이머로, SP forward primer에 PstI 제한효소 사이트를, CWA reverse primer에는 HindⅢ 제한효소 사이트를 부착하고, 각각의 M1, M2, M3 항원결정기를 각각 SP DNA와 혼합한 후에 각각 PCR을 실시함으로써, SP와 M1, M2, M3 항원결정기가 각각 연결된 fusion gene인 SP-M1, SP-M2 및 SP-M3를 구축하는 단계; 및상기 SP와 M1, M2, M3 항원결정기가 각각 연결된 fusion gene인 SP-M1, SP-M2 및 SP-M3를 구축하여 선택된 상기 항원결정기를 유산균벡터 pBCEG29의 PstI-HindIII 사이트에 도입하여 각 항원결정기를 암호화하는 염기서열을 포함하는 표면발현벡터를 구축하는 단계;를 포함하는 담즙산에 의해 발현이 유도되는 PEDV 백신용 표면발현벡터 제조방법
6 6
제5항에 있어서, 상기 PEDV 백신용 표면발현벡터는 6
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제2항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 PEDV 백신 제조용 표면발현 벡터에 의해 형질전환되며, 서열번호 1로 이루어지는 아미노산 서열, 서열번호 2로 이루어지는 아미노산 서열 및 서열번호 3로 이루어지는 아미노산 서열로 이루어지는 군에서 선택된 하나 이상의 돼지 유행성 설사 바이러스 (porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)의 항원 결정기를 세포 표면에서 발현하는, 형질전환 유산균
8 8
제7항에 있어서, 상기 유산균은 Lactobacillus plantarum인 형질전환 유산균
9 9
제8항에 있어서, 상기 유산균은 형질전환된 Lactobacillus plantarum SK156(KACC 81063BP)인 것을 특징으로 하는 형질전환 유산균
10 10
제2항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 PEDV 백신 제조용 표면발현 벡터에 의해 형질전환되며, 서열번호 1로 이루어지는 아미노산 서열, 서열번호 2로 이루어지는 아미노산 서열 및 서열번호 3로 이루어지는 아미노산 서열로 이루어지는 군에서 선택된 하나 이상의 돼지 유행성 설사 바이러스 (porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)의 항원 결정기를 세포 표면에서 발현하는 형질전환 유산균을 유효성분으로 함유하는 PEDV 치료용 백신
11 11
제10항에 있어서, 상기 백신은 경구용인 것을 특징으로 하는 PEDV 치료용 백신
지정국 정보가 없습니다
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1 KR1020190045443 KR 대한민국 FAMILY

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