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알부민 결합 나노바디가 융합된 WKYMVM 펩티드의 수용성 과발현 및 정제 방법

  • 기술번호 : KST2019018481
  • 담당센터 : 부산기술혁신센터
  • 전화번호 : 051-606-6561
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 알부민 결합 나노바디가 융합된 WKYMVM 펩티드의 수용성 과발현 및 정제 방법에 관한 것으로서, 보다 구체적으로 본 발명은 수용성 향상 태그(solubility enhancing tag), 알부민 결합 나노바디 및 트립토판(Trp)-리신(Lys)-티로신(Tyr)-메티오닌(Met)-발린(Val)-메티오닌(Met)(WKYMVM) 유전자를 포함하는 재조합 발현벡터, 상기 재조합 발현벡터로 형질전환된 숙주세포, 이를 이용한 재조합 단백질의 생산방법, 상기 방법으로 생산된 재조합 단백질 및 상기 재조합 단백질을 유효성분으로 포함하는 패혈증 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다. 본 발명에 따른 재조합 단백질 생산방법에 따르면 Alb1-WKYMVM를 원핵 세포에서 생산할 수 있으며, 알부민 결합 나노바디(Alb1)와 융합된 WKYMVM 펩티드를 단일 융합 단백질 형태로 생산함으로써 생체 내 활성의 변화 없이 펩티드의 안정성을 증가시킬 수 있다. 또한 본 발명에 따른 재조합 단백질은 치료 효과 및 반감기가 향상되어 투여 횟수를 줄일 수 있기 때문에 환자의 편의성이 증대될 것으로 기대된다.
Int. CL C07K 7/06 (2006.01.01) C07K 16/18 (2006.01.01) C12N 15/67 (2006.01.01) C12N 15/70 (2006.01.01) A61K 47/68 (2017.01.01)
CPC C07K 7/06(2013.01) C07K 7/06(2013.01) C07K 7/06(2013.01) C07K 7/06(2013.01) C07K 7/06(2013.01) C07K 7/06(2013.01) C07K 7/06(2013.01) C07K 7/06(2013.01) C07K 7/06(2013.01) C07K 7/06(2013.01) C07K 7/06(2013.01)
출원번호/일자 1020180031682 (2018.03.19)
출원인 울산대학교 산학협력단, 재단법인 아산사회복지재단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2019-0109946 (2019.09.27) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2019.03.28)
심사청구항수 10

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 울산대학교 산학협력단 대한민국 울산광역시 남구
2 재단법인 아산사회복지재단 대한민국 서울특별시 송파구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 최한석 서울특별시 송파구
2 이경진 서울특별시 송파구
3 유지원 서울특별시 송파구
4 응우엔민딴 서울특별시 광진구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인이룸리온 대한민국 서울특별시 서초구 사평대로 ***, *층 (반포동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
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번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2018.03.19 수리 (Accepted) 1-1-2018-0274203-90
2 보정요구서
Request for Amendment		 2018.03.29 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2018-0048252-19
3 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment		 2018.04.30 수리 (Accepted) 1-1-2018-0426741-18
4 [심사청구]심사청구(우선심사신청)서
[Request for Examination] Request for Examination (Request for Preferential Examination)		 2019.03.28 수리 (Accepted) 1-1-2019-0317254-95
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2020.07.04 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2020-0460203-58
6 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.07.10 수리 (Accepted) 4-1-2020-5154267-54
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.07.31 수리 (Accepted) 4-1-2020-5172343-48
8 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2020.09.04 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2020-0941278-18
9 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견서·답변서·소명서
 2020.09.04 수리 (Accepted) 1-1-2020-0941277-73
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번호 청구항
1 1
재조합 단백질의 수용성 향상 태그를 코딩하는 유전자; 알부민 결합 나노바디(Albunin binding nanobody, Alb1)을 코딩하는 유전자; 및서열번호 1로 표시되는 펩티드(WKYMVM)를 코딩하는 유전자를 포함하는 재조합 발현벡터
2 2
제1항에 있어서,상기 펩티드(WKYMVM)를 코딩하는 유전자는 서열번호 2로 표시되는 핵산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 재조합 발현벡터
3 3
제1항에 있어서,상기 알부민 결합 나노바디(Alb1)는 서열번호 3으로 표시되는 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 재조합 발현벡터
4 4
제1항에 있어서,상기 수용성 향상 태그는 단백질 이황화물 이성질화효소 b'a' 도메인(protein disulfide isomerase b'a' domain; PDIb'a'), 말토스 결합 단백질(maltose binding protein; MBP) 또는 헥사히스티딘(His6)인 것을 특징으로 하는 재조합 발현벡터
5 5
제4항에 있어서,상기 PDIb'a'유전자는 서열번호 5로 표시되는 핵산 서열을 포함하고, 상기 MBP 유전자는 서열번호 6으로 표시되는 핵산 서열을 포함하며, 상기 His6 유전자는 서열번호 7로 표시되는 핵산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 재조합 발현벡터
6 6
제1항에 있어서,상기 수용성 향상 태그를 코딩하는 유전자와 알부민 결합 단백질(Alb1)을 코딩하는 유전자 사이에 담배 식각 바이러스 프로테아제 인식 위치(tobacco etch virus protease recognition site, TEVrs)를 포함하는 것을 특징으로 하는 재조합 발현벡터
7 7
제6항에 있어서,상기 담배 식각 바이러스 프로테아제 인식 위치는 서열번호 8로 표시되는 핵산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 재조합 발현벡터
8 8
제1항에 따른 재조합 발현벡터로 형질전환된 숙주세포
9 9
제8항에 있어서,상기 숙주세포는 대장균(E
10 10
제9항에 있어서,상기 대장균은 BL21(DE3) 또는 Origami 2인 것을 특징으로 하는 숙주세포
11 11
제1항에 따른 재조합 발현벡터를 숙주세포에 도입하여 형질전환체를 제조하는 단계;상기 형질전환체를 배양하여 Alb1-WKYMVM 재조합 단백질을 발현시키는 단계; 및상기 재조합 단백질로부터 수용성 향상 태그를 제거하는 단계를 포함하는 재조합 단백질(Alb1-WKYMVM)의 생산방법
12 12
제11항에 있어서,상기 수용성 향상 태그를 제거하는 단계는 재조합 단백질에 담배 식각 바이러스(TEV) 프로테아제를 처리하는 것을 특징으로 재조합 단백질(Alb1-WKYMVM)의 생산방법
13 13
제11항에 있어서,상기 수용성 향상 태그가 제거된 재조합 단백질을 정제하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 재조합 단백질(Alb1-WKYMVM)의 생산방법
14 14
제11항 내지 제13항 중 어느 한 항의 방법으로 생산된 재조합 단백질(Alb1-WKYMVM)
15 15
서열번호 1로 표시되는 펩티드의 N-말단에 알부민 결합 나노바디(Albunin binding nanobody, Alb1)가 융합된 재조합 단백질을 유효성분으로 포함하는 패혈증 예방 또는 치료용 약학적 조성물
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
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2 미래창조과학부 울산대학교 산학협력단 선도연구센터(ACE)육성사업 기초의약학분야(MRC) 세포기능장애 치료개발연구