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DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium), FBS, N2 보충물(supplement), 레티노산, 뇌유래신경성장인자 (brain-derived neurotrophic factor, BDNF), 신경성장인자 (nerve growth factor, NGF) 및 소닉 헤지호그 (sonic hedgehog, SHH)를 포함하는, 편도 유래 중간엽 줄기세포 또는 이로부터 분화한 전구세포로부터 운동신경세포(motor neuron)로 분화시키기 위한 분화배양액 배지 조성물
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제 1 항에 있어서, 상기 분화배양액 배지는 저농도 글루코스 DMEM, 0
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편도 유래 중간엽 줄기세포 또는 이로부터 분화한 전구세포를 제 1 항의 분화 배지 조성물에서 배양하여 운동신경세포를 유도하는 단계를 포함하는 운동신경세포로의 분화 방법
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제 3 항에 있어서, 상기 배양은 2 내지 4주간 수행하는, 분화 방법
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제 3 항에 있어서, 상기 분화 방법은 운동신경세포를 유도하는 단계 전에 편도 유래 중간엽 줄기세포를 부유 상태에서 배양하여 세포 응집체를 형성하는 단계를 추가적으로 포함하는, 분화 방법
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제 5 항에 있어서, 상기 세포 응집체를 형성하는 단계의 증식배양액 배지는 FBS, 페니실린/스트렙토마이신, β-머캅토에탄올 및 비필수아미노산을 포함하는, 분화 방법
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제 6 항에 있어서, 상기 세포 응집체를 형성하는 단계의 증식배양액 배지는 5 내지 20%(w/v) FBS, 0
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제 5 항에 있어서, 상기 세포 응집체 형성은 폴리에틸렌이민 (polyethyleneimine)이 코팅된 배양 접시에서 배양액 10 ml 당 5×106 내지 7×106개의 세포를 부유 상태에서 1 내지 7일 동안 배양하는 것인, 분화 방법
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제 5 항에 있어서, 상기 분화 방법은 세포 응집체를 1 내지 3세대까지 계대배양하여 신경전구세포 (neural precursor)로 분화하는 단계를 추가적으로 포함하는, 분화 방법
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제 1 항에 있어서, 상기 전구세포는 신경전구세포(neural precursor cell)인, 분화 방법
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제 3 항에 있어서, 상기 편도 유래 중간엽 줄기세포는 다른 조직 유래 중간엽 줄기세포와 비교하여 신경전구세포의 마커인 비멘틴(vimentin)의 발현율이 높은 것을 특징으로 하는, 분화 방법
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제 3 항에 있어서, 상기 편도 유래 중간엽 줄기세포로부터 분화한 전구세포는 다른 조직 유래 중간엽 줄기세포로부터 분화한 전구세포와 비교하여 뉴런-특이 마커(Neuron-specific marker)인 Tuj1의 발현율이 높은 것을 특징으로 하는, 분화 방법
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제 3 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항에 따른 분화 방법에 따라 제조된 운동신경세포
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제 13 항에 있어서, 상기 운동신경세포는 ISL1 (insulin gene enhancer protein), HB9 (homeobox protein), 또는 ChAT (choline acetyltransferase)의 발현이 증가하는, 운동신경세포
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제 13 항에 있어서, 상기 운동신경세포는 아세틸콜린의 분비가 증가하는, 운동신경세포
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제 13 항에 있어서, 상기 운동신경세포는 근신경접합부 (neuromuscular junction)의 형성이 가능한, 운동신경세포
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제 13 항에 있어서, 상기 운동신경세포는 1 내지 3세대까지 계대배양이 가능한, 운동신경세포
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제 13 항에 있어서, 상기 운동신경세포는 동결 후 융해하여 사용이 가능한, 운동신경세포
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제 13 항에 따른 운동신경세포를 유효성분으로 포함하는 신경질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물
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제 19 항에 있어서, 상기 신경질환은 근위축성 측삭경화증(amyotrophic lateral sclerosis, ALS), 중증 근무력증(myasthenia gravis, MG), 척수 근위축증(spinal muscular atrophy, SMA) 또는 사르코-마리-투스(Charcot-Marie-Tooth, CMT)병인, 신경질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물
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제 13 항에 따른 운동신경세포를 포함하는 세포치료제
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