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증폭된 이중 가닥 DNA 검출방법 및 이를 이용한 장치

  • 기술번호 : KST2019020257
  • 담당센터 : 부산기술혁신센터
  • 전화번호 : 051-606-6561
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 DNA 검출 방법으로, 상기 DNA 검출 방법은, 이중 가닥 DNA를 등온 증폭하는 단계 및 증폭된 이중 가닥 DNA를 검출하는 단계가 하나의 챔버(Chamber)내에서 동시 또는 순차적으로 이루어지고, 상기 이중 가닥 DNA를 등온 증폭하는 단계는, 포워드 프라이머 및 리버스 프라이머에 의한 증폭 반응으로, 상기 포워드 프라이머의 말단은 전극에 도포된 포워드 프라이머 결합층에 친화적인 물질로 표지되어 있고, 상기 증폭된 이중 가닥 DNA를 검출하는 단계는, (a) 상기 증폭된 이중 가닥 DNA와 이중 가닥 DNA에 특이적으로 결합하는 단백질의 결합으로 결합물이 생성되는 단계; 및 (b) 상기 결합물에 부착된 산화-환원 표지자와 전자 이동 매개체(electron mediator)의 산화-환원 반응에 의해 전극으로 전자가 이동되고, 전자 이동 매개체의 전자 전달 속도 차에 의해 DNA를 검출하는 단계; 를 포함하되, 상기 검출은, 증폭된 이중 가닥 DNA의 변성(Denaturation) 단계를 별도로 요구하지 않는 것인, DNA 검출 방법 및 이를 이용하는 장치에 대한 것이다.
Int. CL C12Q 1/6844 (2018.01.01) G01N 27/327 (2006.01.01)
CPC C12Q 1/6844(2013.01) C12Q 1/6844(2013.01) C12Q 1/6844(2013.01) C12Q 1/6844(2013.01) C12Q 1/6844(2013.01) C12Q 1/6844(2013.01)
출원번호/일자 1020180042230 (2018.04.11)
출원인 부산대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2019-0118835 (2019.10.21) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2018.04.11)
심사청구항수 9

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 부산대학교 산학협력단 대한민국 부산광역시 금정구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 양해식 부산광역시 동래구
2 팡취산 부산광역시 연제구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인 무한 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, *층(역삼동,화물재단빌딩)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 부산대학교 산학협력단 대한민국 부산광역시 금정구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2018.04.11 수리 (Accepted) 1-1-2018-0360775-23
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2019.01.29 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2019.04.12 수리 (Accepted) 9-1-2019-0019228-59
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2019.06.17 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0428151-18
5 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2019.08.16 수리 (Accepted) 1-1-2019-0840584-70
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2019.08.16 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2019-0840583-24
7 등록결정서
Decision to grant
2019.12.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0935218-26
8 [명세서등 보정]보정서(심사관 직권보정)
2020.01.21 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2020-5001548-98
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
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DNA 검출 방법으로,상기 DNA 검출 방법은, 이중 가닥 DNA를 등온 증폭하는 단계 및 증폭된 이중 가닥 DNA를 검출하는 단계가 하나의 챔버(Chamber)내에서 동시 또는 순차적으로 이루어지고,상기 이중 가닥 DNA를 등온 증폭하는 단계는, 포워드 프라이머 및 리버스 프라이머에 의한 증폭 반응이고, 상기 증폭된 이중 가닥 DNA를 검출하는 단계는, (a) 상기 증폭된 이중 가닥 DNA와 이중 가닥 DNA에 특이적으로 결합하는 단백질의 결합으로 결합물이 생성되는 단계; 및(b) 상기 결합물에 부착된 산화-환원 표지자와 전자 이동 매개체(electron mediator)의 산화-환원 반응에 의해 전극으로 전자가 이동되고, 전자 이동 매개체의 전자 전달 속도 차에 의해 DNA를 검출하는 단계; 를 포함하되,상기 검출은, 증폭된 이중 가닥 DNA의 변성(Denaturation) 단계를 별도로 요구하지 않는 것인, DNA 검출 방법
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제 1항에 있어서, 상기 이중 가닥 DNA에 특이적으로 결합하는 단백질은, 징크 핑거 단백질(Zinc finger protein)인, DNA 검출방법
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제2항에 있어서,상기 징크 핑거 단백질은, Zif268, TFIIIA, GAGA 및 Ros 로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나 이상인, DNA 검출방법
4 4
제 1항에 있어서, 상기 등온 증폭 반응은, 재조합효소 중합효소 증폭(recombinase polymerase amplification, RPA), 루프 매개 증폭(loop-mediated isothermal amplification, LAMP), 헬리카제-종속 증폭(helicase-dependent amplification, HDA), 회전환 증폭(rolling circle amplification, RCA), 다중치환증폭(multiple displacement amplification, MDA), 가닥 치환 증폭(strand displacement amplification, SDA), 핵산 서열-기재 증폭(nucleic acid sequence-based amplification, NASBA) 중 어느 하나인, DNA 검출방법
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제1항에 있어서,상기 DNA 검출 방법은, 검출 중에 세척 과정을 요구하지 않는, DNA 검출방법
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제1항에 있어서, 상기 산화-환원 표지자는, 글루코스 옥시데이즈, 글리세롤-3-포스페이트 디하이드로지네이즈, 아스코베이트 옥시데이즈, 호스래디쉬 옥시데이즈, 소이빈 옥시데이즈, 라케이즈, 빌리루빈 옥시데이즈, 타이로시네이즈, 금 나노입자, 은 나노입자, 백금 나노입자, 이리듐 나노입자, 팔라듐 나노입자, 프러시안블루 나노입자 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나인, DNA 검출방법
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제1항에 있어서,상기 전자 이동 매개체는, Ru(NH3)63+, Ru(NH3)62+, Fe(CN)63-, Fe(CN)64-, Ru(NH3)5(pyridine)3+, Ru(NH3)5(pyridine)2+, 페로센, 페로센 메탄올, 페로센 카복시산, Os(bpy)2Cl23+, Ox(bpy)2Cl22+ 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나인, DNA 검출방법
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제 1항에 있어서, 상기 증폭된 이중 가닥 DNA를 검출하는 단계는, 2종 이상의 전극을 포함하고, 전극 사이의 간섭이 없이 각각의 전극을 통해 동시에 2종 이상의 증폭된 DNA를 검출하는, DNA 검출방법
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제1항에 있어서,상기 전극은, 주석산화물(Indium tin oxide, ITO) 전극, 그래핀(grapheme)이 입혀진 주석산화물 전극, 탄소나노튜브(carbon nanotube)가 입혀진 주석산화물 전극, 카본 전극, 금 전극, 은 전극, Ag/AgCl 전극, 백금 전극 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나인, DNA 검출방법
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