1 |
1
야생형 디아미네이즈 (deaminase) 및 변이 디아미네이즈를 포함하는 디아미네이즈 융합체를 코딩하는 유전자 구조체 (construct)
|
2 |
2
제1항에 있어서, 표적 특이적 뉴클레아제를 코딩하는 유전자가 추가로 연결되어 있는 유전자 구조체
|
3 |
3
제1항에 있어서, 상기 디아미네이즈는 APOBEC1 (apolipoprotein B editing complex 1), AID (activation-induced deaminase) 또는 tadA (tRNA-specific adenosine deaminase)인 것을 특징으로 하는 유전자 구조체
|
4 |
4
제1항에 있어서, 상기 디아미네이즈는 아데노신 디아미네이즈 (adenosine deaminase)인 것을 특징으로 하는 유전자 구조체
|
5 |
5
제4항에 있어서, 상기 아데노신 디아미네이즈는 tadA (tRNA-specific adenosine deaminase)인 것을 특징으로 하는 유전자 구조체
|
6 |
6
제1항에 있어서, 상기 변이 디아미네이즈는 TadA 6
|
7 |
7
제1항에 있어서, 상기 변이 디아미네이즈 코딩 유전자는 서열번호 3 내지 서열번호 6으로 구성된 군에서 선택되는 변이 아데노신 디아미네이즈인 것을 특징으로 하는 유전자 구조체
|
8 |
8
제1항에 있어서, 상기 야생형 디아미네이즈와 변이 디아미네이즈는 링커로 연결되는 것을 특징으로 하는 유전자 구조체
|
9 |
9
제2항에 있어서, 상기 표적 특이적 뉴클레아제는 RNA-가이드 뉴클레아제 및 가이드 RNA를 포함하는 것을 특징으로 하는 유전자 구조체
|
10 |
10
제9항에 있어서, 상기 RNA-가이드 뉴클레아제는 스트렙토코커스 피요젠스 (Streptococcus pyogenes) 유래 Cas9 단백질의 (1) D10, H840, 또는 D10 및 H840; (2) D1135, R1335, 및 T1337로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상; 또는 (3) 상기 (1) 및 (2)의 아미노산 잔기 모두가 야생형과 다른 아미노산으로 치환된 것을 특징으로 하는 유전자 구조체
|
11 |
11
제9항에 있어서, 상기 가이드 RNA는 CRISPR RNA (crRNA) 및 trans-activating crRNA (tracrRNA)를 포함하는 이중 RNA, 또는 단일 가이드 RNA (sgRNA)인 것을 특징으로 하는 유전자 구조체
|
12 |
12
제2항에 있어서, 상기 염기 교정에 의해 표적의 아미노산 변화 또는 mRNA 미스-스플라이싱 (mis-splicing)에 의해 식물의 표현형이 변화하는 것을 특징으로 하는 유전자 구조체
|
13 |
13
제1항 내지 제12항 중 어느 한 항의 유전자 구조체가 작동 가능하도록 연결된 식물의 염기 교정용 벡터
|
14 |
14
제13항에 있어서, 프로모터, NLS (nucleus localization protein sequence) 또는 터미네이터 (terminator)를 추가로 포함하는 벡터
|
15 |
15
야생형 디아미네이즈 및 변이 디아미네이즈를 포함하는 디아미네이즈 융합체를 코딩하는 유전자 구조체를 포함하는 벡터를 식물 원형질체에 도입하는 단계;표적 특이적 뉴클레아제를 코딩하는 유전자 구조체를 포함하는 벡터를 식물 원형질체에 도입하는 단계; 및 표적을 특이적으로 인식하는 가이드 RNA를 식물 원형질체에 처리하는 단계를 포함하는 식물의 염기 교정 방법
|
16 |
16
식물 원형질체에 제13항의 벡터를 도입하는 단계; 및표적을 특이적으로 인식하는 가이드 RNA를 식물 원형질체에 처리하는 단계를 포함하는 식물의 염기 교정 방법
|