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서열번호 2에 기재된 아미노산 서열을 갖는 폴리펩타이드와 서열번호 4에 기재된 아미노산 서열을 갖는 폴리펩타이드가 결합되어 형성된 TLR5 아고니스트(agonist) 단백질을 암호화하는 유전자에, 유비퀴틴을 암호화하는 유전자가 결합되어 있고, 상기 유비퀴틴 암호화 유전자에 정제용 태그를 암호화하는 유전자가 결합되어 형성된 융합 유전자를 포함하는 벡터를 제조하는 단계 (a);상기에서 제조한 벡터로 호스트를 형질전환시킨 후, 상기 융합 유전자를 발현시켜 융합 단백질을 생산하는 단계 (b); 상기 융합 단백질에 융합되어 있는 정제용 태그가 결합하는 컬럼에, 상기에서 생산된 융합 단백질을 결합시켜 융합 단백질을 회수하는 단계 (c); 및 상기에서 회수한 융합 단백질에 유비퀴틴 절단 효소인 USP 또는 UCH를 처리하여 유비퀴틴이 결합한 부위를 절단한 후, TLR5 아고니스트(agonist) 단백질을 회수하는 단계 (d); 를 포함하는 것을 특징으로 하는 TLR5 아고니스트 단백질의 생산방법
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제9항에 있어서,상기 TLR5 아고니스트(agonist) 단백질은, 서열번호 2에 기재된 아미노산 서열을 폴리펩타이드와 서열번호 4에 기재된 아미노산 서열을 갖는 폴리펩타이드가 서열번호 6에 기재된 링커를 매개로 하여 결합된 것을 특징으로 하는 TLR5 아고니스트 단백질의 생산방법
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제9항에 있어서, 상기 유비퀴틴을 암호화하는 유전자는, TLR5 아고니스트(agonist) 단백질을 암호화하는 유전자의 5' 말단에 결합하고, 상기 정제용 태그를 암호화하는 유전자는, 상기 유비퀴틴을 암호화하는 유전자의 5' 말단에 결합하는 것을 특징으로 하는 TLR5 아고니스트 단백질의 생산방법
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제9항에 있어서,상기 호스트는, 대장균인 것을 특징으로 하는 TLR5 아고니스트 단백질의 생산방법
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제9항에 있어서,상기 단계 (d)의 유비퀴틴 절단 효소의 처리는, 융합 단백질을 컬럼에 결합시킨 상태에서 처리하는 것을 특징으로 하는 TLR5 아고니스트 단백질의 생산방법
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제9항에 있어서,상기 단계 (d)의 유비퀴틴 절단 효소의 처리는, 융합 단백질을 컬럼으로부터 용리(elution)시킨 후, 처리하는 것을 특징으로 하는 TLR5 아고니스트 단백질의 생산방법
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제9항에 있어서,상기 융합 유전자는,서열번호 7의 핵산 서열을 갖는 것을 특징으로 하는 TLR5 아고니스트 단백질의 생산방법
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제9항에 있어서,상기 유비퀴틴은, 유비퀴틴 절단효소에 의해 절단되는 아미노산 서열을 포함하고 있는 것을 특징으로 하는 TLR5 아고니스트 단백질의 생산방법
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제9항에 있어서,상기 유비퀴틴은, 유비퀴틴의 일부분이되, 유비퀴틴 절단효소에 의해 절단되는 아미노산 서열을 포함하고 있는 것을 특징으로 하는 TLR5 아고니스트 단백질의 생산방법
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제9항에 있어서,상기 정제 태그는, 히스티딘 태그 (His-tag) 또는 라이신(lysine)이 6개 연속적으로 결합한 라이신 태그인 것을 특징으로 하는 TLR5 아고니스트 단백질의 생산방법
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제9항에 있어서,상기 단계 (c)는,생산된 융합 단백질을 언폴딩(unfolding)한 후, 컬럼에 결합시켜 재접힘(refolding)함으로써 융합 단백질을 회수하는 것을 특징으로 하는 TLR5 아고니스트 단백질의 생산방법
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제9항에 있어서,상기 단계 (c)는,생산된 융합 단백질을 언폴딩(unfolding)하고, 재접힘(refolding)한 후, 컬럼에 결합시켜 융합 단백질을 회수하는 것을 특징으로 하는 TLR5 아고니스트 단백질의 생산방법
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