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대장균 및 앰피실린 저항성 유전자를 이용한 해독틀 이동 변이 및 종결 돌연변이가 없는 유전자의 선별 방법

  • 기술번호 : KST2019030790
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 대장균 및 앰피실린 저항성 유전자를 이용하여, 해독틀 이동 변이 및 종결 돌연변이가 없는 유전자를 선별하기 위한 플라스미드 벡터 및 이를 이용한 해독틀 이동 변이 및 종결 돌연변이가 없는 유전자를 선별하는 방법에 관한 것이다. 상기 플라스미드 벡터는 앰피실린 내성 유전자 외에 지속적으로 발현될 수 있는 항생제 내성 유전자 마커를 가지고 있어 형질전환체에 대하여 먼저 항생제 선별할 수 있고, 2 차적으로 앰피실린 내성 유전자의 발현 여부를 통해 해독틀 이동 변이 및 종결 돌연변이를 가지지 않도록 합성된 인공 유전자를 선별할 수 있다. 여기에서, 앰피실린 내성 유전자는 개시 코돈이 제거되어 합성 인공 유전자와 연결되어 발현될 수 있다.
Int. CL C12N 15/70 (2006.01.01) C12Q 1/04 (2017.01.01)
CPC C12N 15/70(2013.01) C12N 15/70(2013.01) C12N 15/70(2013.01)
출원번호/일자 1020170079027 (2017.06.22)
출원인 배재대학교 산학협력단
등록번호/일자 10-1920036-0000 (2018.11.13)
공개번호/일자
공고번호/일자 (20181119) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2017.06.22)
심사청구항수 6

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 배재대학교 산학협력단 대한민국 대전광역시 서구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 채순기 대한민국 대전광역시 유성구
2 곽준용 대한민국 충청남도 천안시 서북구
3 송광용 대한민국 대전광역시 유성구
4 이근우 대한민국 세종특별자치시 노을*로 **,

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인이룸리온 대한민국 서울특별시 서초구 사평대로 ***, *층 (반포동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 배재대학교 산학협력단 대전광역시 서구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2017.06.22 수리 (Accepted) 1-1-2017-0599249-22
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2017.10.16 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2017.12.08 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2017-0179889-18
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2017.12.15 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0881448-41
5 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2018.02.19 수리 (Accepted) 1-1-2018-0171344-81
6 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2018.03.15 수리 (Accepted) 1-1-2018-0261542-58
7 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2018.04.16 수리 (Accepted) 1-1-2018-0375612-41
8 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2018.05.15 수리 (Accepted) 1-1-2018-0476973-09
9 지정기간연장 관련 안내서
Notification for Extension of Designated Period
2018.05.16 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2018-0075390-34
10 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2018.06.15 수리 (Accepted) 1-1-2018-0587132-09
11 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2018.06.15 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2018-0587133-44
12 등록결정서
Decision to grant
2018.10.29 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0731516-64
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
(a) Tac 프로모터 및 개시 코돈이 제거된 앰피실린 내성 유전자(AmpR)가, 서열번호 1의 염기서열로 이루어진 제한 효소 위치(multiple cloning site, MCS) 및 서열번호 2의 염기서열로 이루어진 링커 서열(Linker sequence)로 연결된 유전자 카세트; 및(b) 가나마이신(kanamycin)에 대한 내성 유전자 마커와 lacI 유전자;를 포함하는 하기 도 3의 개열 지도(vector map)로 표시되는 pET-Tamp 벡터인,해독틀 이동 변이(frameshift mutation) 및 종결 돌연변이(nonsense mutation)가 없는 유전자 선별용 플라스미드 벡터[도 3]
2 2
제 1항에 있어서, 상기 (a)의 제한 효소는 BamHI, EcoRI, HindIII, SmaI 및 KpnI으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 플라스미드 벡터
3 3
삭제
4 4
제 1항에 있어서, 상기 해독틀 이동 변이 및 종결 돌연변이가 없는 유전자는 인공적으로 합성한 유전자 및 생물체 유래의 재조합 유전자 중 어느 하나 또는 둘 다인 것을 특징으로 하는, 플라스미드 벡터
5 5
삭제
6 6
삭제
7 7
i) 제 1항의 플라스미드 벡터에, 표적 유전자를 삽입하여 재조합 발현 벡터를 제조하는 단계;ii) 상기 단계 i)에서 제조한 재조합 발현 벡터로 대장균을 형질전환하는 단계;iii) 상기 단계 ii)에서 형질전환된 형질전환체를 가나마이신 포함 배지에서 배양하여 콜로니(colony) 형성을 유도하는 단계;iv) 상기 단계 iii)에서 형성된 콜로니를 앰피실린 및 IPTG(Isopropyl β- D -1-thiogalactopyranoside) 포함 배지에서 배양하여 콜로니 형성을 유도하는 단계; 및v) 상기 단계 iv)에서 형성된 콜로니의 형질전환체를 수득하는 단계;를 포함하는, 해독틀 이동 변이 및 종결 돌연변이가 없는 유전자 선별 방법
8 8
i) 제 1항의 플라스미드 벡터에, 표적 유전자를 삽입하여 재조합 발현 벡터를 제조하는 단계;ii) 상기 단계 i)에서 제조한 재조합 발현 벡터로 대장균을 형질전환하는 단계;iii) 상기 단계 ii)에서 형질전환된 형질전환체를 앰피실린 및 IPTG 포함 배지에서 배양하여 콜로니 형성을 유도하는 단계; 및iv) 상기 단계 iii)에서 형성된 콜로니의 형질전환체를 수득하는 단계;를 포함하는, 해독틀 이동 변이 및 종결 돌연변이가 없는 유전자 선별 방법
9 9
삭제
10 10
삭제
11 11
제 7항 또는 제 8항에 있어서, 상기 해독틀 이동 변이 및 종결 돌연변이가 없는 유전자는 인공적으로 합성한 유전자 및 생물체 유래의 재조합 유전자 중 어느 하나 또는 둘 다인 것을 특징으로 하는, 해독틀 이동 변이 및 종결 돌연변이가 없는 유전자 선별 방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 중소기업청 배재대학교산학협력단 산학연협력기술개발 등온성 증폭(isothermal amplification)을 적용한 유전자 합성 단계별 공정 개발 및 사업화