| 1 |
1
살아있는 세포에서 표적 막단백질과 상기 표적 막단백질에 대한 결합 파트너 막단백질 간의 상호작용을 분석하는 방법에 있어서,분석 대상 세포를 기재 상에 위치시키고,기재와 상기 표적 막단백질 양자에 대한 결합능을 갖는 캡처 프로브를 분석 대상 세포에 처리하여 상기 표적 막단백질을 기재 상에 고정시키고, 상기 캡처 프로브의 처리 전과 후의 상기 결합 파트너 막단백질의 확산계수 분포를 얻는 것을 포함하는막단백질의 상호작용 분석 방법
|
| 2 |
2
제1항에 있어서,막단백질은 내재성 막 단백질(integral membrane protein), 표재성 막 단백질(peripheral membrane protein), 막관통 단백질(transmembrane protein), 막 당단백질(membrane glycoprotein) 및 지질 공정 막 단백질(lipid anchored membrane protein)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 막단백질의 상호작용 분석 방법
|
| 3 |
3
제1항에 있어서, 막단백질은 검출가능한 모이어티에 의해 레이블링되어 있는 것인 막단백질의 상호작용 분석 방법
|
| 4 |
4
제1항에 있어서,막단백질은 형광 단백질과의 융합 단백질이거나; 유기형광염료가 결합될 수 있는 태그와의 융합단백질이면서 상기 융합단백질의 태그에 형광물질이 레이블링되어 있거나; 형광물질이 결합되어 있고, 막 단백질에 대해 특이적으로 결합하는 프로브에 의해 레이블링되어 있는 상태인막단백질의 상호작용 분석 방법
|
| 5 |
5
제1항에 있어서,상기 캡처 프로브는 항체, 항원-결합 단편, 어피바디, 또는 앱타머인막단백질의 상호작용 분석 방법
|
| 6 |
6
제1항에 있어서, 상기 기재는 뉴트라비딘, 스트렙타비딘, 또는 아비딘이 결합되어 있는 것인 막 단백질의 상호작용 분석 방법
|
| 7 |
7
제1항에 있어서, 상기 캡처 프로브는 항체이고, 비오틴이 결합되어 있는 것인막단백질의 상호작용 분석 방법
|
| 8 |
8
제1항에 있어서, 상기 결합 파트너 막단백질의 확산계수는 단일 입자 추적(single particle tracking, SPT)을 통해 막 단백질의 세포막 내 이동 궤적을 탐지함으로써 얻는 것인막단백질의 상호작용 분석 방법
|
| 9 |
9
제8항에 있어서, 상기 확산계수는 하기 수학식 1 및 수학식 2를 이용하여 얻는 것인 막단백질의 상호작용 분석 방법
|
| 10 |
10
제1항에 있어서, 상기 결합 파트너 막단백질의 확산계수는 FRAP(Fluorescence recovery after photobleaching) 또는 FCS(Fluorescence Correlation Spectroscopy)에 의해 얻는 것인막단백질의 상호작용 분석 방법
|
| 11 |
11
제1항에 있어서, 상기 캡처 프로브의 처리에 따른 확산계수 분포의 변화로부터 표적 막단백질과 상기 표적 막단백질에 대한 결합 파트너 막단백질 간의 해리상수를 얻는 것을 추가로 포함하는 막단백질의 상호작용 분석 방법
|
| 12 |
12
제11항에 있어서, 표적 막단백질과 상기 표적 막단백질에 대한 결합 파트너 막단백질 간의 해리상수는 하기 [수학식 3], [수학식 4] 또는 [수학식 5]를 이용하여 얻는 것인막단백질의 상호작용 분석 방법
|
| 13 |
13
후보약물의 처리에 따른 살아있는 세포에서 표적 막단백질과 상기 표적 막단백질에 대한 결합 파트너 막단백질 간의 상호작용의 변화를 분석하는 것을 포함하는 표적 막단백질에 대한 후보약물의 스크리닝 방법에 있어서,분석 대상 세포를 기재 상에 위치시키고,상기 분석 대상 세포에 상기 표적 막단백질에 영향을 미칠 것으로 예상되는 후보약물을 처리하고,기재와 상기 표적 막단백질 양자에 대한 결합능을 갖는 캡처 프로브를 처리하여 상기 표적 막단백질을 기재 상에 고정시키고, 상기 캡처 프로브의 처리 전과 후의 상기 결합 파트너 막단백질의 확산계수 분포를 얻고,상기 결합 파트너 막 단백질의 확산계수 분포의 변화를 후보약물 무처리군에서의 캡처 프로브 처리 전과 후의 결합 파트너 막단백질의 확산계수 분포의 변화와 비교하여 상기 표적 막단백질과의 상호작용에 대해 영향을 미치는 후보약물을 선별하는 것을 포함하는표적 막단백질에 대한 후보약물의 스크리닝 방법
|
| 14 |
14
제13항에 있어서, 상기 후보약물은 화합물, 핵산, 당, 탄수화물, 지질, 펩티드 및 단백질로 이루어진 군으로부터 1종 이상 선택되는 것인 표적 막단백질에 대한 후보약물의 스크리닝 방법
|
| 15 |
15
후보약물의 처리에 따른 살아있는 세포에서 표적 막단백질과 상기 표적 막단백질에 대한 결합 파트너 막단백질 간의 상호작용의 변화를 분석하는 것을 포함하는 표적 막단백질에 대한 후보약물의 스크리닝 방법에 있어서,분석 대상 세포를 기재 상에 위치시키고,상기 분석 대상 세포에 상기 표적 막단백질에 영향을 미칠 것으로 예상되는 후보약물을 처리하고,기재와 상기 표적 막단백질 양자에 대한 결합능을 갖는 캡처 프로브를 처리하여 상기 표적 막단백질을 기재 상에 고정시키고, 상기 캡처 프로브의 처리 전과 후의 상기 결합 파트너 막단백질의 표적 막단백질에 대한 해리상수를 얻고,후보약물 처리에 따른 결합 파트너 막 단백질의 해리상수의 변화를 후보약물 무처리군에서의 캡처 프로브 처리 전과 후의 결합 파트너 막단백질 해리상수의 변화와 비교하여 상기 표적 막단백질과의 상호작용에 대해 영향을 미치는 후보약물을 선별하는 것을 포함하는표적 막단백질에 대한 후보약물의 스크리닝 방법
|
| 16 |
16
제15항에 있어서, 상기 후보약물은 화합물, 핵산, 당, 탄수화물, 지질, 펩티드 및 단백질로 이루어진 군으로부터 1종 이상 선택되는 것인 표적 막단백질에 대한 후보약물의 스크리닝 방법
|
