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금속을 이용한 세포밖 소포체의 분리 방법

  • 기술번호 : KST2019034630
  • 담당센터 : 대구기술혁신센터
  • 전화번호 : 053-550-1450
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 금속을 이용한 세포밖 소포체의 분리 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게 본 발명은 금속 친화성을 이용하여 다양한 시료로부터 세포밖 소포체를 분리하는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 세포밖 소포체 분리 방법은 고가의 장비가 필요하지 않으며, 시료량의 제한 없이 적용 가능하며, 세포밖 소포체의 형태나 성질을 보존하면서 효율적으로 분리할 수 있다는 장점이 있다. 또한 본 발명의 방법은 종래 분리 방법과 결합하여 세포밖 소포체 분리 효율을 극대화 할 수 있어, 분리된 세포밖 소포체를 이용한 질병 진단, 질병 치료, 다중 오믹스 연구 및 세포밖 소포체의 특성 연구 등에 활용이 가능하다.
Int. CL C12N 5/074 (2010.01.01) C12N 1/16 (2006.01.01) C12N 1/20 (2006.01.01) B01D 15/38 (2006.01.01)
CPC C12N 5/0696(2013.01) C12N 5/0696(2013.01) C12N 5/0696(2013.01) C12N 5/0696(2013.01) C12N 5/0696(2013.01)
출원번호/일자 1020170006430 (2017.01.13)
출원인 ㈜로제타엑소좀, 포항공과대학교 산학협력단
등록번호/일자 10-1875594-0000 (2018.07.02)
공개번호/일자
공고번호/일자 (20180706) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2017.01.13)
심사청구항수 27

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 ㈜로제타엑소좀 대한민국 경기도 성남시 분당구
2 포항공과대학교 산학협력단 대한민국 경상북도 포항시 남구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 고용송 대한민국 경상북도 포항시 남구
2 이창진 대한민국 대구광역시 수성구
3 박현택 대한민국 경상북도 포항시 남구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인이룸리온 대한민국 서울특별시 서초구 사평대로 ***, *층 (반포동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 ㈜로제타엑소좀 경기도 성남시 분당구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2017.01.13 수리 (Accepted) 1-1-2017-0046264-93
2 보정요구서
Request for Amendment
2017.01.23 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2017-0010879-67
3 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment
2017.01.25 수리 (Accepted) 1-1-2017-0087841-22
4 보정요구서
Request for Amendment
2017.01.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2017-0013175-58
5 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment
2017.02.17 수리 (Accepted) 1-1-2017-0166715-64
6 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2017.08.11 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2017.08.17 수리 (Accepted) 4-1-2017-5130954-68
8 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2017.11.06 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2017-0159847-32
9 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2017.11.07 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0775409-62
10 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2018.01.08 수리 (Accepted) 1-1-2018-0023331-16
11 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2018.02.07 수리 (Accepted) 1-1-2018-0137297-35
12 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2018.02.07 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2018-0137298-81
13 등록결정서
Decision to grant
2018.06.21 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0423057-17
14 [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Agent] Report on Agent (Representative)
2019.09.27 수리 (Accepted) 1-1-2019-0993573-11
15 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.11.20 수리 (Accepted) 4-1-2019-5243581-27
16 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.11.22 수리 (Accepted) 4-1-2019-5245997-53
17 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.11.25 수리 (Accepted) 4-1-2019-5247115-68
18 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.05.06 수리 (Accepted) 4-1-2020-5101216-16
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
(a) 고정상(Stationary phase)에 킬레이트 리간드를 고정시키는 단계;(b) 상기 킬레이트 리간드가 고정된 고정상에 금속을 첨가하여 킬레이트 리간드에 금속을 고정시키는 단계;(c) 상기 킬레이트 리간드에 고정되지 않은 금속 잔여물을 세척하는 단계;(d) 상기 세척한 고정상에 세포밖 소포체가 포함된 시료를 주입하여 킬레이트 리간드에 고정된 금속에 세포밖 소포체를 결합시키는 단계;(e) 상기 고정상에서 금속과 결합되지 않은 시료 잔여물을 세척하는 단계; 및(f) 상기 고정상에서 금속과 결합된 세포밖 소포체를 용출시키는 단계;를 포함하는 세포밖 소포체 분리 방법
2 2
제1항에 있어서,고정상(Stationary phase)은 아가로스 비드, 세파로스 비드, 마그네틱 비드, 금 나노입자, 산화철 나노입자, 나일론 멤브레인, 니트로셀룰로오스 멤브레인, PVDF 멤브레인, 종이, 플라스틱, 유리 및 금속 센서칩으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법
3 3
제1항에 있어서,상기 킬레이트 리간드는 이미노디아세트산(IDA, iminodiacetic acid), 니트릴로트리아세트산(NTA, nitrilotriacetic acid), 트리스(카복시메틸)에틸렌디아민(TED, tris-(carboxymethyl)ethylenediamine), 에틸렌디아민(ethylenediamine), 에틸렌디아민 테트라아세테이트(EDTA, ethylendiamine tetraacetate), 알킬렌디아민 트리아세트산(alkylenediamine triacetic acid), 디에틸렌트리아민펜타아세트산(DTPA, diethylenetriaminepentaacetic acid), 에틸렌글리콜 비스(베타-아미노에틸에테르)-N,N,N',N'-테트라아세트산(EGTA, ethylene glycol-bis(β-aminoethyl ether)-N,N,N',N'-tetraacetic acid), 포스포세린(phosphoserine) 및 1,4,7-트리아조사이클로노난(TACN, 1,4,7-triazocyclononane)으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법
4 4
제1항에 있어서,상기 금속은 스칸듐(Sc), 이트륨(Y), 티타늄(Ti), 지르코늄(Zr), 하프늄(Hf), 러더포듐(Rf), 바나듐(V), 니오븀(Nb), 탄탈룸(Ta), 더브늄(Db), 크롬(Cr), 몰리브덴(Mo), 텅스텐(W), 시보??(Sg), 망간(Mn), 테크네튬(Tc), 레늄(Re), 보륨(Bh), 철(Fe), 루테늄(Ru), 오스뮴(Os), 하슘(Hs), 코발트(Co), 로듐(Rh), 이리듐(Ir), 마이트너륨(Mt), 니켈(Ni), 팔라듐(Pd), 백금(Pt), 다름슈타튬(Ds), 구리(Cu), 은(Ag), 금(Au), 뢴트게늄(Rg), 아연(Zn), 카드뮴(Cd), 수은(Hg), 코페르니슘(Cn), 알루미늄(Al) 및 갈륨(Ga)으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체의 분리 방법
5 5
제1항에 있어서,상기 시료는 포유동물 세포 배양 배지, 박테리아 세포 배양 배지, 효모 배양 배지, 조직 추출물, 암 조직, 혈청, 혈장, 침, 눈물, 땀, 소변, 대변, 뇌척수액(CSF, cerebrospinal fluid), 복수(ascite), 양수(amniotic fluid), 정액, 유(milk), 먼지, 담수, 해수, 토양 및 발효식품으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법
6 6
제1항에 있어서,상기 고정상(Stationary phase)에 시료를 첨가하기 전에 시료의 전처리 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법
7 7
제6항에 있어서,상기 시료의 전처리 단계는 원심분리, 초원심분리, 여과, 한외여과, 음파처리, 밀도 구배 초원심분리, 크기 배제 크로마토그래피, 이온교환 크로마토그래피, 친화성 크로마토그래피, 폴리머 기반 침전 및 유기 용매 침전으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 방법을 이용하는 것인 세포밖 소포체 분리 방법
8 8
제1항에 있어서,상기 금속과 결합된 세포밖 소포체를 용출시키는 단계 후 용출물의 후처리 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체의 분리 방법
9 9
제8항에 있어서,상기 용출물의 후처리 단계는 원심분리, 초원심분리, 여과, 한외여과, 음파처리, 밀도 구배 초원심분리, 크기 배제 크로마토그래피, 이온교환 크로마토그래피, 친화성 크로마토그래피, 폴리머 기반 침전 및 유기 용매 침전으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 방법을 이용하는 것인 세포밖 소포체 분리 방법
10 10
삭제
11 11
(a) 고정상(Stationary phase)에 킬레이트 리간드를 고정시키는 단계;(b) 세포밖 소포체가 포함된 시료에 금속을 혼합하여 세포밖 소포체와 금속을 결합시키는 단계;(c) 상기 킬레이트 리간드가 고정된 고정상에 상기 금속과 시료 혼합물을 첨가하여 킬레이트 리간드에 세포밖 소포체와 결합된 금속을 고정시키는 단계;(d) 상기 고정상에 결합되지 않은 잔여물을 세척하는 단계; 및(e) 상기 고정상에서 금속과 결합된 세포밖 소포체를 용출시키는 단계;를 포함하는 세포밖 소포체 분리 방법
12 12
제11항에 있어서,고정상(Stationary phase)은 아가로스 비드, 세파로스 비드, 마그네틱 비드, 금 나노입자, 산화철 나노입자, 나일론 멤브레인, 니트로셀룰로오스 멤브레인, PVDF 멤브레인, 종이, 플라스틱, 유리 및 금속 센서칩으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법
13 13
제11항에 있어서,상기 킬레이트 리간드는 이미노디아세트산(IDA, iminodiacetic acid), 니트릴로트리아세트산(NTA, nitrilotriacetic acid), 트리스(카복시메틸)에틸렌디아민(TED, tris-(carboxymethyl)ethylenediamine), 에틸렌디아민(ethylenediamine), 에틸렌디아민 테트라아세테이트(EDTA, ethylendiamine tetraacetate), 알킬렌디아민 트리아세트산(alkylenediamine triacetic acid), 디에틸렌트리아민펜타아세트산(DTPA, diethylenetriaminepentaacetic acid), 에틸렌글리콜 비스(베타-아미노에틸에테르)-N,N,N',N'-테트라아세트산(EGTA, ethylene glycol-bis(β-aminoethyl ether)-N,N,N',N'-tetraacetic acid), 포스포세린(phosphoserine) 및 1,4,7-트리아조사이클로노난(TACN, 1,4,7-triazocyclononane)으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법
14 14
제11항에 있어서,상기 금속은 스칸듐(Sc), 이트륨(Y), 티타늄(Ti), 지르코늄(Zr), 하프늄(Hf), 러더포듐(Rf), 바나듐(V), 니오븀(Nb), 탄탈룸(Ta), 더브늄(Db), 크롬(Cr), 몰리브덴(Mo), 텅스텐(W), 시보??(Sg), 망간(Mn), 테크네튬(Tc), 레늄(Re), 보륨(Bh), 철(Fe), 루테늄(Ru), 오스뮴(Os), 하슘(Hs), 코발트(Co), 로듐(Rh), 이리듐(Ir), 마이트너륨(Mt), 니켈(Ni), 팔라듐(Pd), 백금(Pt), 다름슈타튬(Ds), 구리(Cu), 은(Ag), 금(Au), 뢴트게늄(Rg), 아연(Zn), 카드뮴(Cd), 수은(Hg), 코페르니슘(Cn), 알루미늄(Al) 및 갈륨(Ga)으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체의 분리 방법
15 15
제11항에 있어서,상기 시료는 포유동물 세포 배양 배지, 박테리아 세포 배양 배지, 효모 배양 배지, 조직 추출물, 암 조직, 혈청, 혈장, 침, 눈물, 땀, 소변, 대변, 뇌척수액(CSF, cerebrospinal fluid), 복수(ascite), 양수(amniotic fluid), 정액, 유(milk), 먼지, 담수, 해수, 토양 및 발효식품으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법
16 16
제11항에 있어서,상기 고정상(Stationary phase)에 시료를 첨가하기 전에 시료의 전처리 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법
17 17
제16항에 있어서,상기 시료의 전처리 단계는 원심분리, 초원심분리, 여과, 한외여과, 음파처리, 밀도 구배 초원심분리, 크기 배제 크로마토그래피, 이온교환 크로마토그래피, 친화성 크로마토그래피, 폴리머 기반 침전 및 유기 용매 침전으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 방법을 이용하는 것인 세포밖 소포체 분리 방법
18 18
제11항에 있어서,상기 금속과 결합된 세포밖 소포체를 용출시키는 단계 후 용출물의 후처리 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체의 분리 방법
19 19
제18항에 있어서,상기 용출물의 후처리 단계는 원심분리, 초원심분리, 여과, 한외여과, 음파처리, 밀도 구배 초원심분리, 크기 배제 크로마토그래피, 이온교환 크로마토그래피, 친화성 크로마토그래피, 폴리머 기반 침전 및 유기 용매 침전으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 방법을 이용하는 것인 세포밖 소포체 분리 방법
20 20
삭제
21 21
(a) 고정상(Stationary phase)에 킬레이트 리간드를 고정시키는 단계;(b) 상기 킬레이트 리간드가 고정된 고정상에 세포밖 소포체가 포함된 시료와 금속을 첨가하는 단계;(c) 상기 킬레이트 리간드에 금속을 고정시키고, 상기 금속에 세포밖 소포체를 결합시키는 단계;(d) 상기 고정상에 결합되지 않은 잔여물을 세척하는 단계; 및(e) 상기 고정상에서 금속과 결합된 세포밖 소포체를 용출시키는 단계;를 포함하는 세포밖 소포체 분리 방법
22 22
제21항에 있어서,고정상(Stationary phase)은 아가로스 비드, 세파로스 비드, 마그네틱 비드, 금 나노입자, 산화철 나노입자, 나일론 멤브레인, 니트로셀룰로오스 멤브레인, PVDF 멤브레인, 종이, 플라스틱, 유리 및 금속 센서칩으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법
23 23
제21항에 있어서,상기 킬레이트 리간드는 이미노디아세트산(IDA, iminodiacetic acid), 니트릴로트리아세트산(NTA, nitrilotriacetic acid), 트리스(카복시메틸)에틸렌디아민(TED, tris-(carboxymethyl)ethylenediamine), 에틸렌디아민(ethylenediamine), 에틸렌디아민 테트라아세테이트(EDTA, ethylendiamine tetraacetate), 알킬렌디아민 트리아세트산(alkylenediamine triacetic acid), 디에틸렌트리아민펜타아세트산(DTPA, diethylenetriaminepentaacetic acid), 에틸렌글리콜 비스(베타-아미노에틸에테르)-N,N,N',N'-테트라아세트산(EGTA, ethylene glycol-bis(β-aminoethyl ether)-N,N,N',N'-tetraacetic acid), 포스포세린(phosphoserine) 및 1,4,7-트리아조사이클로노난(TACN, 1,4,7-triazocyclononane)으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법
24 24
제21항에 있어서,상기 금속은 스칸듐(Sc), 이트륨(Y), 티타늄(Ti), 지르코늄(Zr), 하프늄(Hf), 러더포듐(Rf), 바나듐(V), 니오븀(Nb), 탄탈룸(Ta), 더브늄(Db), 크롬(Cr), 몰리브덴(Mo), 텅스텐(W), 시보??(Sg), 망간(Mn), 테크네튬(Tc), 레늄(Re), 보륨(Bh), 철(Fe), 루테늄(Ru), 오스뮴(Os), 하슘(Hs), 코발트(Co), 로듐(Rh), 이리듐(Ir), 마이트너륨(Mt), 니켈(Ni), 팔라듐(Pd), 백금(Pt), 다름슈타튬(Ds), 구리(Cu), 은(Ag), 금(Au), 뢴트게늄(Rg), 아연(Zn), 카드뮴(Cd), 수은(Hg), 코페르니슘(Cn), 알루미늄(Al) 및 갈륨(Ga)으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체의 분리 방법
25 25
제21항에 있어서,상기 시료는 포유동물 세포 배양 배지, 박테리아 세포 배양 배지, 효모 배양 배지, 조직 추출물, 암 조직, 혈청, 혈장, 침, 눈물, 땀, 소변, 대변, 뇌척수액(CSF, cerebrospinal fluid), 복수(ascite), 양수(amniotic fluid), 정액, 유(milk), 먼지, 담수, 해수, 토양 및 발효식품으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법
26 26
제21항에 있어서,상기 고정상(Stationary phase)에 시료를 첨가하기 전에 시료의 전처리 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법
27 27
제26항에 있어서,상기 시료의 전처리 단계는 원심분리, 초원심분리, 여과, 한외여과, 음파처리, 밀도 구배 초원심분리, 크기 배제 크로마토그래피, 이온교환 크로마토그래피, 친화성 크로마토그래피, 폴리머 기반 침전 및 유기 용매 침전으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 방법을 이용하는 것인 세포밖 소포체 분리 방법
28 28
제21항에 있어서,상기 금속과 결합된 세포밖 소포체를 용출시키는 단계 후 용출물의 후처리 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체의 분리 방법
29 29
제28항에 있어서,상기 용출물의 후처리 단계는 원심분리, 초원심분리, 여과, 한외여과, 음파처리, 밀도 구배 초원심분리, 크기 배제 크로마토그래피, 이온교환 크로마토그래피, 친화성 크로마토그래피, 폴리머 기반 침전 및 유기 용매 침전으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 방법을 이용하는 것인 세포밖 소포체 분리 방법
30 30
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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 EP03569695 EP 유럽특허청(EPO) FAMILY
2 JP32505061 JP 일본 FAMILY
3 US20200122058 US 미국 FAMILY
4 WO2018131966 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

DOCDB 패밀리 정보

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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 EP3569695 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
2 JP2020505061 JP 일본 DOCDBFAMILY
3 US2020122058 US 미국 DOCDBFAMILY
4 WO2018131966 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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