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1
셀룰로오스 결합 도메인 3을 암호화하는 서열번호 1의 염기서열을 포함하는 재조합 벡터
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2
제1항에 있어서,상기 재조합벡터는 셀룰로오스 결합 도메인 3, 연결 펩타이드, 엔테로키나제 절단 부위, 및 목적 단백질 암호화 유전자가 순차적으로 연결되어 있는 것을 특징으로 하는, 재조합 벡터
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3
제2항에 있어서,상기 목적 단백질 암호화 유전자는 서열번호 3의 염기서열로 구성되는 것을 특징으로 하는, 재조합 벡터
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4
제2항에 있어서,상기 연결 펩타이드는 서열번호 5의 염기서열로 구성되는 것을 특징으로 하는, 재조합 벡터
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5
제2항에 있어서,상기 엔테로키나제 절단부위는 서열번호 6의 염기서열로 구성되는 것을 특징으로 하는, 재조합 벡터
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6
제2항에 있어서,상기 재조합 벡터는 식물 세포에서 목적 단백질을 소포체로 타켓팅할 수 있는 BiP(Binding immunoglobulin protein) 단백질을 암호화하는 유전자가 추가적으로 작동가능하게 연결된 것을 특징으로 하는, 재조합 벡터
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7
제6항에 있어서,상기 BiP 단백질을 암호화하는 유전자는 서열번호 7의 염기서열로 구성되는 것을 특징으로 하는, 재조합 벡터
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8
제2항에 있어서,상기 재조합벡터는 HDEL(His-Asp-Glu-Leu) 펩타이드를 암호화하는 염기서열이 추가적으로 작동가능하게 연결된 것을 특징으로 하는, 재조합 벡터
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9
하기 단계를 포함하는 목적 단백질의 분리정제 방법:제1항의 재조합 벡터를 이용하여 형질전환된 식물체와 단백질 추출 완충용액을 혼합하여 식물체 혼합액을 제조하는 단계(S1); 상기 S1 단계의 혼합액을 셀룰로오스(cellulose)가 채워진 컬럼에 주입하여 셀룰로오스 결합 도메인 3 및 목적 단백질이 융합된 융합단백질을 셀룰로오스에 흡착시키는 단계(S2); 및상기 S2 단계에서 상기 융합단백질이 흡착된 셀룰로오스를 원심분리하여 침전시킨 후, 엔테로키나제에 현탁시켜 현탁액을 수득하는 단계(S3)
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10
제9항에 있어서,상기 S3 단계 후, 세파로스 컬럼에 상기 현탁액을 주입하여 엔테로키나제를 제거하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 목적 단백질의 분리정제 방법
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11
제9항에 있어서,상기 단백질 추출 완충용액은 10 내지 100mM의 트리스(Tris) 완충액, 100 내지 200mM의 염화나트륨(NaCl) 용액, 0
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12
제9항에 있어서,상기 형질전환 식물체는, a) 제1항의 재조합 벡터를 균주에 도입하여 형질전환 균주를 제조하는 단계; 및b) 상기 형질전환 균주를 이용하여 식물체를 형질전환하는 단계를 포함하는 방법으로 제조되는 것을 특징으로 하는, 목적 단백질의 분리정제 방법
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13
제12항에 있어서,상기 균주는 아그로박테리움 튜머페시언스(Agrobacterium tumefaciens)인 것을 특징으로 하는, 목적 단백질의 분리정제 방법
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14
제9항에 있어서,상기 식물체는 애기장대, 대두, 담배, 가지, 고추, 감자, 토마토, 배추, 무, 양배추, 상추, 복숭아, 배, 딸기, 수박, 참외, 오이, 당근, 및 샐러리로 이루어진 군으로부터 선택되는 쌍자엽 식물; 또는 벼, 보리, 밀, 호밀, 옥수수, 사탕수수, 귀리, 및 양파로 이루어진 군으로부터 선택되는 단자엽 식물인 것을 특징으로 하는, 목적 단백질의 분리정제 방법
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15
제9항에 있어서,상기 셀룰로오스는 미세결정셀룰로오스(Microcrystalline cellulose)인 것을 특징으로 하는, 목적 단백질의 분리정제 방법
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