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패혈증-유발 그람 음성균 검출용 MLPA 프로브 및 그 용도

  • 기술번호 : KST2019035314
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 패혈증-유발 그람 음성균 검출용 프로브; 이를 포함하는 조성물; 키트 및 이를 이용하여 패혈증 환자혈액에서 주요 그람 음성균을 다중 검출하는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 의한 상기 그람 음성균 검출용 프로브, 조성물, 키트 및 이를 이용한 주요 그람 음성균의 검출 방법은 혼성화 시간을 최적화하여 종래 검출시간보다 검출시간을 단축되고, 그람 음성균의 특이적 서열을 예비 증폭함으로써 검출의 민감도를 상승시켜, 환자의 혈액에서 채취한 무세포 DNA 시료에서도 숙주 게놈 DNA와의 비특이적인 반응 없이 그람 음성균의 존재, 종류 및 약물 내성을 고민감도로 신속하고 정확하게 판별할 수 있다.
Int. CL C12Q 1/689 (2018.01.01) C12Q 1/6813 (2018.01.01) C12Q 1/6862 (2018.01.01)
CPC C12Q 1/689(2013.01) C12Q 1/689(2013.01) C12Q 1/689(2013.01) C12Q 1/689(2013.01) C12Q 1/689(2013.01) C12Q 1/689(2013.01) C12Q 1/689(2013.01) C12Q 1/689(2013.01)
출원번호/일자 1020180059545 (2018.05.25)
출원인 가톨릭대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2019-0134202 (2019.12.04) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 공개
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2018.05.25)
심사청구항수 17

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 가톨릭대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 서초구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 정연준 경기도 용인시 수지구
2 이동건 서울특별시 영등포구
3 정보람 서울특별시 동작구
4 박철민 서울특별시 강동구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인이룸리온 대한민국 서울특별시 서초구 사평대로 ***, *층 (반포동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
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번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2018.05.25 수리 (Accepted) 1-1-2018-0513810-89
2 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2019.03.20 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0206232-67
3 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2019.05.14 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2019-0491415-86
4 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2019.05.14 수리 (Accepted) 1-1-2019-0491413-95
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2019.09.25 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0692953-88
6 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2019.11.21 수리 (Accepted) 1-1-2019-1196488-34
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.11.21 수리 (Accepted) 4-1-2019-5245084-94
8 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2019.12.24 수리 (Accepted) 1-1-2019-1337474-14
9 거절결정서
Decision to Refuse a Patent
2020.02.28 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2020-0154319-01
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번호 청구항
1 1
정방향 프라이머 결합 영역, 및 표적 서열의 제1 영역에 특이적으로 혼성화하는 LHS(left hybridization sequence) 영역을 포함하는 LPO(left probe oligonucleotide); 및상기 표적 서열의 상기 제1 영역과 연속으로 연결된 제2 영역에 특이적으로 혼성화하는 RHS(right hybridization sequence) 및 역방향 프라이머 결합 영역을 포함하는 RPO(right probe oligonucleotide);로 구성되고,상기 LHS(left hybridization sequence) 및 상기 RHS(right hybridization sequence)가 서열 번호 1 및 서열번호 2인 제1 프로브, 서열번호 3 및 서열번호 4인 제2 프로브, 서열번호 5 및 서열번호 6인 제3 프로브, 서열번호 7 및 서열번호 8인 제4 프로브 및 서열번호 9 및 서열번호 10인 제5 프로브로 이루어진 그룹에서 선택되는 어느 하나인 것인 패혈증-유발 그람 음성균 검출용 프로브
2 2
제1항에 있어서,상기 그람 음성균은 대장균(Escherichia
3 3
제1항에 있어서,상기 서열 번호 1 및 서열 번호 2인 제1 프로브는 대장균(Escherichia
4 4
제1항에 있어서,상기 LHS(left hybridization sequence) 및 상기 RHS(right hybridization sequence)가 서열 번호 11 및 서열번호 12인 제6 프로브를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 패혈증-유발 그람 음성균 검출용 프로브
5 5
제4항에 있어서,상기 서열번호 11 및 서열번호 12인 제6 프로브는 ESBL-생성 균주의 유전자 CTX-M group 1의 서열 번호 18에 특이적으로 혼성 결합하는 것을 특징으로 하는, 패혈증-유발 그람 음성균 검출용 프로브
6 6
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 프로브를 포함하는, 패혈증-유발 그람 음성균 검출용 조성물
7 7
제6항의 조성물을 포함하는, 패혈증-유발 그람 음성균 검출용 키트
8 8
하기 단계를 포함하는 패혈증-유발 그람 음성균의 존재를 검출하는 방법:시료를 예비 증폭시키는 단계(S1);예비 증폭된 시료를 제1항의 패혈증-유발 그람 음성균 검출용 프로브 세트와 접촉시켜 혼성화시키는 단계(S2);상기 시료와 혼성화된 프로브를 라이게이션(ligation)하여 프로브 어셈블리(probe assembly)를 형성시키는 단계(S3);상기 형성된 프로브 어셈블리(probe assembly)를 주형으로 하여 PCR 증폭시키는 단계(S4);상기 증폭 산물을 분리 및 검출하는 단계(S5);상기 증폭 산물이 분리, 검출되는 경우 상기 시료 내에 상기 증폭된 프로브 어셈블리(probe assembly)를 구성하는 프로브가 상보적으로 결합하는 패혈증-유발 그람 음성균이 존재하는 것으로 판단하는 단계(S6)
9 9
제8항에 있어서,상기 단계(S1)의 시료를 예비 증폭시키는 단계에서는 제1 프라이머 세트 내지 제6 프라이머 세트를 이용하여 시료 내의 균주의 표적 서열의 제1 영역 및 상기 제1 영역과 연속으로 연결된 제2 영역을 증폭시키는 것을 특징으로 하는 패혈증-유발 그람 음성균의 존재를 검출하는 방법
10 10
제8항에 있어서,상기 서열번호 19 및 서열번호 20인 제1 프라이머 세트는 대장균(Escherichia
11 11
제8항에 있어서,상기 단계(S2)에서, 상기 시료의 표적 서열 제1 영역과 상기 LPO 프로브의 LHS가 혼성화되고, 상기 시료의 표적 서열 제2 영역과 상기 RPO 프로브의 RHS 가 혼성화되는 것을 특징으로 하는 패혈증-유발 그람 음성균의 존재를 검출하는 방법
12 12
제8항에 있어서,상기 단계(S2)에서 3시간 내지 20시간 동안 혼성화되는 것을 특징으로 하는 패혈증-유발 그람 음성균의 존재를 검출하는 방법
13 13
제8항에 있어서,상기 단계(S3)에서, 상기 시료의 제 1 영역과 혼성 결합된 LPO의 LHS의 말단과 상기 시료의 제2 영역과 혼성 결합된 RPO의 RHS의 말단을 라이게이션(ligation)하여 정방향 프라이머 결합 영역-LHS-RHS-역방향 프라이머 결합 영역으로 구성된 프로브 어셈블리(probe assembly)를 형성하는 것을 특징으로 하는 패혈증-유발 그람 음성균의 존재를 검출하는 방법
14 14
제8항에 있어서,상기 단계(S4)에서, 상기 프로브 어셈블리(probe assembly)를 구성하는 LPO(left probe oligonucleotide)가 포함하는 정방향 프라이머 결합 영역, 및 RPO(right probe oligonucleotide)가 포함하는 역방향 프라이머 결합 영역에 상보적으로 결합하는 프라이머 세트를 사용하여 상기 형성된 프로브 어셈블리(probe assembly)가 PCR 증폭되는 것을 특징으로 하는 패혈증-유발 그람 음성균의 존재를 검출하는 방법
15 15
제8항에 있어서,상기 단계(S5)에서, 프로브 어셈블리(probe assembly)를 주형으로 하여 증폭된 PCR 산물을 CE-SSCP(Capillary Electrophoresis-Single strand conformation polymorphism)를 이용하여 분리 및 검출하는 것을 특징으로 하는 패혈증-유발 그람 음성균의 존재를 검출하는 방법
16 16
제8항에 있어서,상기 단계(S2)에서, 제4항에 의한 패혈증-유발 그람 음성균 검출용 프로브 세트를 사용하여 복수의 그람 음성균의 존재를 한 번에 검출하는 것을 특징으로 하는 패혈증-유발 그람 음성균의 존재를 검출하는 방법
17 17
제8항 내지 제16항 중 어느 한 항의 방법을 이용한, 패혈증 치료를 위한 정보제공 방법
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DOCDB 패밀리 정보

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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 WO2019225791 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 보건복지부 가톨릭대학교 산학협력단 감염병위기대응기술개발 다제 내성균 신속 진단을 위한 라이게이션 기반 다중검출 기술 개발 및 검증