1 |
1
분화 또는 미분화 세포 및 배양 배지의 혼합물에 환경유입(environmental influx)을 촉진할 수 있는 초음파, 레이저, 발광 다이오드(light-emitting diode) 또는 열 처리 중 어느 하나의 물리적 자극을 제공하고, 상기 물리적 자극을 제공받은 혼합물을 일정 시간 배양하여 리프로그래밍된 세포를 수득하는 것을 포함하며,상기 초음파 처리는 출력강도 0
|
2 |
2
제1항에 있어서,환경유입은 물리적 자극이 제공된 분화 또는 미분화 세포에서 배출되는 유전물질, 화학물질, 소분자, 엑소좀 또는 엑소좀 함유 세포 밖 소포체(extracellular vesicles); 또는 배양 배지 성분의 세포 내 유입을 포함하는, 세포의 리프로그래밍 방법
|
3 |
3
삭제
|
4 |
4
제1항에 있어서,분화 또는 미분화 세포는 체세포, 암세포, 기관 내 조직세포, 유도만능줄기세포 또는 배아줄기세포 중 어느 하나인, 세포의 리프로그래밍 방법
|
5 |
5
제1항에 있어서,리프로그래밍된 세포는 다능성(pluripotency) 세포; 또는, 간세포, 조골세포, 지방세포, 근육세포, 신경세포, 성상세포, 각질세포, 모근세포, 췌장 베타세포 또는 심근세포를 포함하는 분화 세포 중 어느 하나이고, 상기 분화 또는 미분화 세포와 리프로그래밍된 세포는 서로 상이한 세포 표현형을 갖는 것인, 세포의 리프로그래밍 방법
|
6 |
6
제5항에 있어서,다능성 세포는 OCT3/4, SOX2, NANOG, c-MYC, KLF4, TDGF1, SSEA4, TRA-1-60, PAX6, Nestin, Brachyury, SMA, GATA4, 또는 AFP 중 어느 하나의 다능성 마커 또는 3배엽 마커 유전자를 발현하는 세포인, 세포의 리프로그래밍 방법
|
7 |
7
제5항에 있어서,분화 세포는 PAX6, Nestin, Sox1, Sox2, MAP2, TuJ1, GFAP 또는 O4 중 어느 하나를 발현하는 신경세포; Desmin, Actinin, Pax3, SMA, GATA4 또는 NKX2-5 중 어느 하나를 발현하는 근육세포; AFP, HNF1a, HNF4a, CK18 또는 ALB 중 어느 하나를 발현하는 간세포; 또는 oil red O 염색이 되며, Pparc2, C/ebpa, aP2 또는 Fabp4 중 어느 하나를 발현하는 지방세포 중 어느 하나인, 세포의 리프로그래밍 방법
|
8 |
8
제1항에 있어서,배양 배지는 줄기세포 배양 배지, 다분화능 (multipotent)세포 분화유도배지, 간세포 분화유도배지, 골형성 분화유도배지, 지방세포 분화유도배지, 근육세포 분화유도배지, 성상세포 분화유도배지, 신경계세포 분화유도배지, 혈관내피세포 분화유도배지, 각질세포 분화유도배지, 췌장 베타세포 분화유도배지 또는 심근세포 분화유도배지 중 어느 하나인, 세포의 리프로그래밍 방법
|
9 |
9
제1항에 있어서,배양 배지와 분화 또는 미분화 세포를 혼합하기 전에 배양 배지에 출력강도 1W/cm2 내지 20W/cm2의 초음파를 1분 내지 20분 동안 처리하는 것을 추가로 포함하는, 세포의 리프로그래밍 방법
|
10 |
10
삭제
|
11 |
11
제1항에 있어서,배양 배지와 분화 또는 미분화 세포를 혼합하기 전에 배양 배지에 300 내지 900nm인 파장 대역의 펄스형 레이저 빔 또는 발광 다이오드를 1분 내지 20분 동안 조사하는 것을 추가로 포함하는, 세포의 리프로그래밍 방법
|
12 |
12
삭제
|
13 |
13
제1항에 있어서,배양배지와 분화 또는 미분화 세포를 혼합하기 전에 배양 배지에 40 내지 50℃의 온도 조건에서 5분 내지 20분 동안 열 처리하는 것을 추가로 포함하는, 세포의 리프로그래밍 방법
|
14 |
14
삭제
|
15 |
15
제1항에 있어서,물리적 자극이 제공된 혼합물은 부유 배양 또는 부착 배양 방식을 통해 1일 내지 20일 동안 배양되는, 세포의 리프로그래밍 방법
|
16 |
16
분화 또는 미분화 세포 및 배양 배지의 혼합물에 환경유입(environmental influx)을 촉진할 수 있는 초음파, 레이저, 발광 다이오드(light-emitting diode) 또는 열 처리 중 어느 하나의 물리적 자극을 제공하고,상기 물리적 자극을 제공받은 혼합물을 1일 내지 6일 동안 배양하고,상기의 배양물에서 분리한 엑소좀 함유 세포 밖 소포체(extracellular vesicles)와 분화 또는 미분화 세포를 혼합하여 일정 시간 동안 배양하여 리프로그래밍된 세포를 수득하는 것을 포함하며, 상기 초음파 처리는 출력강도 0
|
17 |
17
삭제
|
18 |
18
제16항에 있어서,분화 또는 미분화 세포는 체세포, 암세포, 기관 내 조직세포, 유도만능줄기세포 또는 배아줄기세포 중 어느 하나인, 세포의 리프로그래밍 방법
|
19 |
19
제16항에 있어서,배양 배지는 줄기세포 배양 배지, 다분화능(multipotent)세포 분화유도배지, 간세포 분화유도배지, 골형성 분화유도배지, 지방세포 분화유도배지, 근육세포 분화유도배지, 성상세포 분화유도배지, 신경계세포 분화유도배지, 혈관내피세포 분화유도배지, 각질세포 분화유도배지, 췌장 베타세포 분화유도배지 또는 심근세포 분화유도배지 중 어느 하나인, 세포의 리프로그래밍 방법
|
20 |
20
제16항에 있어서,배양 배지와 분화 또는 미분화 세포를 혼합하기 전에 배양 배지에 출력강도 1W/cm2 내지 20W/cm2의 초음파를 1분 내지 20분 동안 처리하는 것을 추가로 포함하는, 세포의 리프로그래밍 방법
|
21 |
21
삭제
|
22 |
22
제16항에 있어서,배양 배지와 분화 또는 미분화 세포를 혼합하기 전에 배양 배지에 300 내지 900nm인 파장 대역의 펄스형 레이저 빔 또는 발광 다이오드를 1분 내지 20분 동안 조사하는 것을 추가로 포함하는, 세포의 리프로그래밍 방법
|
23 |
23
삭제
|
24 |
24
제16항에 있어서,배양배지와 분화 또는 미분화 세포를 혼합하기 전에 배양 배지에 40 내지 50℃의 온도 조건에서 5분 내지 20분 동안 열 처리하는 것을 추가로 포함하는, 세포의 리프로그래밍 방법
|
25 |
25
삭제
|
26 |
26
제16항에 있어서,물리적 자극이 제공된 혼합물은 부유 배양 또는 부착 배양 방식을 통해 배양되는, 세포의 리프로그래밍 방법
|
27 |
27
제16항에 있어서, 엑소좀 함유 세포 밖 소포체는 배양물을 원심분리하여 회수하는, 세포의 리프로그래밍 방법
|
28 |
28
제16항에 있어서, 엑소좀 함유 세포 밖 소포체는 OCT3/4, SOX2, NANOG, c-MYC, KLF4, TDGF1, SSEA4, TRA-1-60, PAX6, Nestin, Brachyury, SMA, GATA4, 또는 AFP 중 어느 하나의 다능성 마커 또는 3배엽 마커;PAX6, Nestin, Sox1, Sox2, MAP2, TuJ1, GFAP 또는 O4 중 어느 하나의 신경세포 마커;Desmin, Actinin, Pax3, SMA, GATA4 또는 NKX2-5 중 어느 하나의 근육세포 마커;AFP, HNF1a, HNF4a, CK18 또는 ALB 중 어느 하나의 간세포 마커; 또는oil red O 염색이 되며, Pparc2, C/ebpa, aP2 또는 Fabp4 중 어느 하나의 지방세포 마커를 발현하는 것인, 세포의 리프로그래밍 방법
|
29 |
29
제16항에 있어서,엑소좀 함유 세포 밖 소포체와 분화 또는 미분화 세포는 부유 배양 또는 부착 배양 방식을 통해 1일 내지 20일 동안 배양되는, 세포의 리프로그래밍 방법
|
30 |
30
제16항에 있어서,리프로그래밍된 세포는 다능성(pluripotency) 세포; 또는, 간세포, 조골세포, 지방세포, 근육세포, 신경세포, 성상세포, 각질세포, 모근세포, 췌장 베타세포 또는 심근세포를 포함하는 분화 세포 중 어느 하나이고, 상기 분화 또는 미분화 세포와 리프로그래밍된 세포는 서로 상이한 세포 표현형을 갖는 것인, 세포의 리프로그래밍 방법
|
31 |
31
제30항에 있어서,다능성 세포는 OCT3/4, SOX2, NANOG, c-MYC, KLF4, TDGF1, SSEA4, TRA-1-60, PAX6, Nestin, Brachyury, SMA, GATA4, 또는 AFP 중 어느 하나의 다능성 마커 또는 3배엽 마커 유전자를 발현하는 세포인, 세포의 리프로그래밍 방법
|
32 |
32
제30항에 있어서,분화 세포는 PAX6, Sox1, Sox2, Nestin, MAP2, TuJ1, GFAP 또는 O4 중 어느 하나를 발현하는 신경세포; Desmin, Pax3, Actinin, SMA, GATA4 또는 NKX2-5 중 어느 하나를 발현하는 근육세포; AFP, HNF1a, HNF4a, CK18 또는 ALB 중 어느 하나를 발현하는 간세포; 또는 oil red O 염색이 되며, Pparc2, C/ebpa, aP2 또는 Fabp4 중 어느 하나를 발현하는 지방세포 중 어느 하나인, 세포의 리프로그래밍 방법
|