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내부에 형광물질을 담지하고 있으며, 외부표면에 단백질 가수분해 효소에 대한 기질 특이성을 지닌 펩타이드 마개를 가지는 나노튜브 어레이, 이의 제조방법 및 이를 이용한 형광분석을 통한 단백질 가수분해 효소의 정량 방법

  • 기술번호 : KST2019037118
  • 담당센터 : 인천기술혁신센터
  • 전화번호 : 032-420-3580
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 내부에 형광물질을 담지하고 있으며, 외부표면에 단백질 가수분해 효소에 대한 기질 특이성을 지닌 펩타이드 마개를 가지는 나노튜브 어레이, 이의 제조방법 및 이를 이용한 형광분석을 통한 단백질 가수분해 효소의 정량 방법에 관한 것이다. 본 발명은 효소에 의해 분해가능한 펩타이드 마개를 나노튜브에 형성시킨 나노튜브 어레이를 제공한다. 본 발명의 나노튜브 어레이는 효소기질 특이성을 가지는 소수성 마개물질(펩타이드 마개)이 촘촘히 도입되어 내부에 형광물질을 잘 보관할 수 있으며, 또한, 효소와의 접촉이 있으면 소수성 마개물질이 분해됨에 따라 형광물질이 나노튜브 밖으로 방출될 수 있다. 본 발명은 효소를 2시간 이상 접촉(인큐베이션)시킨 후, 수거된 염료의 형광세기 값을 측정하면, 트립신 농도를 1 ng 범위까지 탐지할 수 있다. 본 발명은 반응 용액의 원심 분리를 거치는 과정이 없이 단백질 가수분해 효소의 정량을 구현할 수 있다.
Int. CL C12Q 1/37 (2006.01.01) C07K 5/087 (2006.01.01) C07K 5/103 (2006.01.01) B82Y 5/00 (2017.01.01) B82Y 35/00 (2017.01.01) B82Y 40/00 (2017.01.01)
CPC C12Q 1/37(2013.01) C12Q 1/37(2013.01) C12Q 1/37(2013.01) C12Q 1/37(2013.01) C12Q 1/37(2013.01) C12Q 1/37(2013.01)
출원번호/일자 1020170042900 (2017.04.03)
출원인 가천대학교 산학협력단
등록번호/일자 10-1860259-0000 (2018.05.15)
공개번호/일자
공고번호/일자 (20180627) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2017.04.03)
심사청구항수 16

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 가천대학교 산학협력단 대한민국 경기도 성남시 수정구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 손상준 대한민국 경기도 성남시 분당구
2 이우승 대한민국 서울특별시 강서구
3 전미연 대한민국 경기도 성남시 수정구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이준혁 대한민국 경기도 수원시 팔달구 중부대로 *** B동 *층(우만동, 신아빌딩)(유니크국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 가천대학교 산학협력단 대한민국 경기도 성남시 수정구
번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2017.04.03 수리 (Accepted) 1-1-2017-0323281-34
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2017.07.11 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2017.09.07 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2018-0036830-06
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2018.03.13 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0173844-91
5 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2018.04.19 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2018-0387167-50
6 등록결정서
Decision to grant
2018.05.11 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0320900-65
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번호 청구항
1 1
다수의 포어가 형성된 양극 산화알루미늄(AAO) 템플릿에 플라즈마 처리를 수행하여 포어 입구 아래에 병목부 (입구보다 폭이 좁은 영역)를 형성시키는 단계 ;상기 포어 내측 면을 코팅하여 나노튜브를 형성하는 단계 ;상기 병목부를 아민기로 개질하는 단계 ;상기 아민기에 특정 아미노산 서열을 결합시켜 아미노산 서열 마개를 상기 병목부에 형성하는 단계를 포함하는 나노튜브 어레이의 제조방법
2 2
제 1항에 있어서, 상기 플라즈마 처리 단계는 150~300 W의 고에너지 플라즈마 로 처리하는 단계인 것을 특징으로 하는 나노튜브 어레이의 제조방법
3 3
제 1항에 있어서, 상기 아민기로 개질하는 단계는 아민기를 가진 화합물이 용해된 용액을 마이크로비드에 혼합하는 단계 ;상기 화합물이 표면에 묻어 있는 상기 마이크로비드를 상기 용액에서 분리하는 단계 ;나노튜브가 형성된 양극 산화알루미늄 (AAO) 템플릿과 상기 마이크로비드를 마이크로 튜브에 삽입하는 단계 ; 및 상기 마이크로튜브를 진동시키는 해머링 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 나노튜브 어레이의 제조방법
4 4
제 3항에 있어서, 상기 마이크로비드는 상기 나노튜브의 입구 보다 사이즈가 큰 것을 특징으로 하는 나노튜브 어레이의 제조방법
5 5
제 3항에 있어서, 상기 아민기를 가진 화합물은 아미노프로필트리에톡시실란 (aminopropyltriethoxysilane (APTES)),아미노프로필트리메톡시실란(aminopropyltrimethoxysilane), 에틸렌디아민트리메톡시실란 (3-(2-Aminoethylamino)propyltrimethoxysilane), 또는 디에틸렌트리아민메톡시실란 ((3-Trimethoxysilylpropyl)diethylenetriamine)인 것을 특징으로 하는 나노튜브 어레이의 제조방법
6 6
제 1항에 있어서, 상기 아미노산 서열 마개는 소수성 아미노산으로 형성되는 것을 특징으로 하는 나노튜브 어레이의 제조방법
7 7
제 1항에 있어서, 상기 아미노산 서열 마개를 형성하는 단계는 SPPS(solid phase peptide synthesis) 법으로 3개 이상의 아미노산 서열을 형성하되, 상기 아미노산 서열에 소수성 화합물과 알킬 화합물을 부착하는 것을 특징으로 하는 나노튜브 어레이의 제조방법
8 8
복수개의 나노튜브가 배열된 어레이로서, 상기 나노튜브는 입구 부분에 내측으로 함몰되어 상기 나노튜브 본체 직경보다 작은 직경을 갖는 병목부를 구비하고, 상기 나노튜브는 상기 병목부에 형성된 아미노산 서열 마개를 포함하고, 상기 아미노산 서열 마개는 상기 병목부에 부착된 아민기 함유 화합물에 결합되어 형성된 것을 특징으로 하는 나노튜브 어레이
9 9
제 8항에 있어서, 상기 아미노산 서열 마개는 하기 화학식 1로 표시되는 것을 특징으로 하는 나노튜브 어레이
10 10
제 9항에 있어서, 상기 A가 3개 이상의 소수성 아미노산이 펩티드 결합된 것을 특징으로 하는 나노튜브 어레이
11 11
제 9항에 있어서, 상기 A가 특정 단백질 분해 효소에 기질 특이성을 가져 상기 단백질 분해 효소에만 분해되는 것을 특징으로 하는 나노튜브 어레이
12 12
제 11항에 있어서, 상기 A가 -Phe-Trp-Phe- 또는 -Gly-Phe-Leu-Gly-를 포함하는 것을 특징으로 하는 나노튜브 어레이
13 13
제 9항에 있어서, 상기 R이 탄소수 4~8개의 알킬 화합물을 포함하는 아미드 결합이 가능한 화합물인 것을 특징으로 하는 나노튜브 어레이
14 14
제 9항에 있어서, 상기 B는 담즙산, 지방산 및 콜레스테롤로 구성된 군에서 선택된 소수성 화합물인 것을 특징으로 하는 나노튜브 어레이
15 15
제 8항 내지 제 14항 중 어느 한 항의 나노튜브 어레이를 형광염료 용액에 침지시켜 형광 염료를 상기 나노튜브에 로딩하는 단계 ;상기 나노튜브의 마개부분에 미지의 효소를 포함한 용액을 소정 시간 동안 접촉시키는 단계 ; 및배출된 형광염료 또는 나노튜브를 수거하여 염료의 형광신호 신호를 측정하는 단계를 포함하되,상기 접촉단계는 미지의 상기 효소가 상기 나노튜브 마개에 기질 선택성을 가지는 경우 상기 효소에 의해 상기 나노튜브 마개를 가수분해하여 열어주는 열림단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 효소 검출방법
16 16
제 15항에 있어서, 상기 효소검출 방법은 수거된 형광염료나 나노튜브의 세기 정도에 따라 상기 효소가 상기 아미노산 서열 마개에 기질 특이성을 가지는지 여부를 판정하는 것을 특징으로 하는 효소 검출 방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
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