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박쥐 유래 코로나바이러스 중 박쥐 사스-유사 코로나바이러스 RsSHC014, 박쥐 코로나바이러스 273/2005, 박쥐 코로나바이러스 JTMC15, 박쥐 사스 코로나바이러스 Rf1/2004, 박쥐 코로나바이러스 Rp/Shaanxi2011, 박쥐 사스 코로나바이러스 Rp3/2004, 박쥐 사스 코로나바이러스 HKU3-1, 박쥐 사스 유사 코로나바이러스 Jiyuan-331, 사스 코로나바이러스 ExoN1, 사스 코로나바이러스 MA15, 사스 코로나바이러스 Sino1-11, 사스 관련 코로나바이러스 Tor2/FP1-10895 및 사스 코로나바이러스 Urbani를 검출하기 위한 프라이머 및 프로브의 조합으로서, 서열번호 1의 정방향 프라이머 및 서열번호 2의 역방향 프라이머 쌍과, 서열번호 3의 프로브와의 제1조합과, 박쥐 유래 코로나바이러스 중 박쥐 코로나바이러스 A613/2005, 박쥐 코로나바이러스 A620/2005, 박쥐 코로나바이러스 A701/2005, 박쥐 코로나바이러스 A897/2005 및 박쥐 코로나바이러스 HKU6-1을 검출하기 위한 프라이머 및 프로브의 조합으로서, 서열번호 4의 정방향 프라이머 및 서열번호 6의 역방향 프라이머 쌍과, 서열번호 7의 프로브와의 제2조합과, 박쥐 유래 코로나바이러스 중 박쥐 코로나바이러스 A632/2005 및 박쥐 코로나바이러스 A633/2005를 검출하기 위한 프라이머 및 프로브의 조합으로서, 서열번호 5의 정방향 프라이머 및 서열번호 6의 역방향 프라이머 쌍과, 서열번호 7의 프로브와의 제3조합과, 박쥐 유래 코로나바이러스 중 베타코로나바이러스 SC2013 및 박쥐 코로나바이러스 16BO133을 검출하기 위한 프라이머 및 프로브의 조합으로서, 서열번호 8의 정방향 프라이머 및 서열번호 9의 역방향 프라이머 쌍과, 서열번호 10의 프로브와의 제4조합과, 박쥐 유래 코로나바이러스 중 HCoV-EMC를 검출하기 위한 프라이머 및 프로브의 조합으로서, 서열번호 11의 정방향 프라이머 및 서열번호 12의 역방향 프라이머 쌍과, 서열번호 13의 프로브와의 제5조합과, 박쥐 유래 코로나바이러스 중 박쥐 코로나바이러스 B15-40, 박쥐 코로나바이러스 B15-41 및 박쥐 코로나바이러스 1A AFCD62를 검출하기 위한 프라이머 및 프로브의 조합으로서, 서열번호 14의 정방향 프라이머 및 서열번호 16의 역방향 프라이머 쌍과, 서열번호 17의 프로브와의 제6조합과, 박쥐 유래 코로나바이러스 중 박쥐 코로나바이러스 1B AFCD307을 검출하기 위한 프라이머 및 프로브의 조합으로서, 서열번호 15의 정방향 프라이머 및 서열번호 16의 역방향 프라이머 쌍과, 서열번호 17의 프로브와의 제7조합을 포함하고,상기 27개의 박쥐 유래 코로나바이러스 각각의 유무를 동시에 모두 검사하는, 리얼타임 PCR을 이용한 박쥐 유래 코로나바이러스 검사 키트
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제1항에 있어서,중합효소, dNTPs, PCR 완충용액 및 PCR 증폭산물의 표지물질을 더 포함하는, 리얼타임 PCR을 이용한 박쥐 유래 코로나바이러스 검사 키트
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제2항에 있어서,상기 표지물질은, 서열번호 3의 프로브의 한쪽 말단과, 서열번호 7의 프로브의 한쪽 말단과, 서열번호 10의 프로브의 한쪽 말단과, 서열번호 13의 프로브의 한쪽 말단과, 서열번호 17의 프로브의 한쪽 말단에 표지되는 것을 특징으로 하는, 리얼타임 PCR을 이용한 박쥐 유래 코로나바이러스 검사 키트
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제3항에 있어서,상기 표지물질은 형광물질이고, 상기 표지물질로부터의 형광의 세기를 측정하여 박쥐 유래 코로나바이러스 RNA 유전자의 증폭량을 산출하는 것을 특징으로 하는, 리얼타임 PCR을 이용한 박쥐 유래 코로나바이러스 검사 키트
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유전자 샘플을 준비하는 단계와, 청구항 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 기재된 리얼타임 PCR을 이용한 박쥐 유래 코로나바이러스 검사 키트를 이용하여, 상기 유전자 샘플을 리얼타임(real-time) PCR로 증폭하는 단계와, 리얼타임 PCR 결과에 기초하여 박쥐 유래 코로나바이러스를 검출하는 단계를 포함하는, 리얼타임 PCR을 이용한 박쥐 유래 코로나바이러스 검사 방법
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제5항에 있어서, 증폭 전, 박쥐 유래 코로나바이러스 RNA 유전자의 카피수를 알고 있는 양성 표준자를, 상기 리얼타임 PCR을 이용한 박쥐 유래 코로나바이러스 검사 키트와 박쥐 유래 코로나바이러스 RNA 유전자와 관련하여 유전자 증폭량을 나타내는 표지물질을 이용하여 리얼타임(real-time) PCR로 증폭하는 단계와, 상기 양성 표준자의 전체 PCR 증폭 기간에 대한 상기 표지물질의 형광세기의 변화를 측정하고, 일정한 형광세기에 도달하는 PCR 반응회수(Cp값 또는 Ct값)를 분석하는 단계와,상기 표지물질의 형광세기의 변화를 측정하여 얻어진 표준곡선으로부터 상기 양성 표준자의 카피수와, Cp값 또는 Ct값을 대응시키는 단계와, 상기 유전자 샘플 내에 존재하는 박쥐 유래 코로나바이러스 RNA 유전자의 전체 PCR 증폭 기간에 대한 상기 표지물질의 형광세기의 변화를 측정하고, 일정한 형광세기에 도달하는 PCR 반응회수(Cp값 또는 Ct값)를 분석하는 단계와, 상기 유전자 샘플 내에 존재하는 박쥐 유래 코로나바이러스 RNA 유전자를 PCR 증폭하여 얻은 Cp값 또는 Ct값을 상기 양성 표준자의 카피수에 대응시켜, 상기 유전자 샘플 내의 박쥐 유래 코로나바이러스 RNA 유전자를 정량적으로 측정하는 단계를 더 포함하는, 리얼타임 PCR을 이용한 박쥐 유래 코로나바이러스 검사 방법
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제6항에 있어서, 상기 표지물질은, 서열번호 3의 프로브의 한쪽 말단과, 서열번호 7의 프로브의 한쪽 말단과, 서열번호 10의 프로브의 한쪽 말단과, 서열번호 13의 프로브의 한쪽 말단과, 서열번호 17의 프로브의 한쪽 말단에 표지되는 것을 특징으로 하는, 리얼타임 PCR을 이용한 박쥐 유래 코로나바이러스 검사 방법
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제7항에 있어서,상기 표지물질은 형광물질이고, 상기 표지물질로부터의 형광의 세기를 측정하여 박쥐 유래 코로나바이러스 RNA 유전자의 증폭량을 산출하는 것을 특징으로 하는, 리얼타임 PCR을 이용한 박쥐 유래 코로나바이러스 검사 방법
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리얼타임 PCR을 이용한 박쥐 유래 코로나바이러스 검사 방법에서 사용되는 리얼타임 PCR용 프라이머 세트로서,박쥐 유래 코로나바이러스 중 박쥐 사스-유사 코로나바이러스 RsSHC014, 박쥐 코로나바이러스 273/2005, 박쥐 코로나바이러스 JTMC15, 박쥐 사스 코로나바이러스 Rf1/2004, 박쥐 코로나바이러스 Rp/Shaanxi2011, 박쥐 사스 코로나바이러스 Rp3/2004, 박쥐 사스 코로나바이러스 HKU3-1, 박쥐 사스 유사 코로나바이러스 Jiyuan-331, 사스 코로나바이러스 ExoN1, 사스 코로나바이러스 MA15, 사스 코로나바이러스 Sino1-11, 사스 관련 코로나바이러스 Tor2/FP1-10895 및 사스 코로나바이러스 Urbani를 검출하는데 사용되는 서열번호 1의 정방향 프라이머 및 서열번호 2의 역방향 프라이머의 쌍과, 박쥐 유래 코로나바이러스 중 박쥐 코로나바이러스 A613/2005, 박쥐 코로나바이러스 A620/2005, 박쥐 코로나바이러스 A701/2005, 박쥐 코로나바이러스 A897/2005 및 박쥐 코로나바이러스 HKU6-1을 검출하는데 사용되는 서열번호 4의 정방향 프라이머 및 서열번호 6의 역방향 프라이머의 쌍과, 박쥐 유래 코로나바이러스 중 박쥐 코로나바이러스 A632/2005 및 박쥐 코로나바이러스 A633/2005를 검출하는데 사용되는 서열번호 5의 정방향 프라이머 및 서열번호 6의 역방향 프라이머의 쌍과, 박쥐 유래 코로나바이러스 중 베타코로나바이러스 SC2013 및 박쥐 코로나바이러스 16BO133을 검출하는데 사용되는 서열번호 8의 정방향 프라이머 및 서열번호 9의 역방향 프라이머의 쌍과, 박쥐 유래 코로나바이러스 중 HCoV-EMC를 검출하는데 사용되는 서열번호 11의 정방향 프라이머 및 서열번호 12의 역방향 프라이머의 쌍과, 박쥐 유래 코로나바이러스 중 박쥐 코로나바이러스 B15-40, 박쥐 코로나바이러스 B15-41 및 박쥐 코로나바이러스 1A AFCD62를 검출하는데 사용되는 서열번호 14의 정방향 프라이머 및 서열번호 16의 역방향 프라이머의 쌍과, 박쥐 유래 코로나바이러스 중 박쥐 코로나바이러스 1B AFCD307을 검출하는데 사용되는 서열번호 15의 정방향 프라이머 및 서열번호 16의 역방향 프라이머의 쌍을 포함하고,상기 27개의 박쥐 유래 코로나바이러스 각각의 유무를 동시에 모두 검사하는데 사용되는, 리얼타임 PCR용 프라이머 세트
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