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지방세포 및 마크로파지 공동 배양을 이용한 글루코스 수용성 평가 방법

  • 기술번호 : KST2020002281
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 지방세포와 마크로파지의 공동 배양에 의해 형성되는 인슐린저항성을 가지는 유사지방모델을 이용한 글루코스 수용성 고속 대량 스크리닝(high throughput screening) 및 이의 활용에 관한 것으로, 본 발명은 비드(bead) 형태의 하이드로겔 스캐폴드를 이용해 지방세포와 마크로파지를 3차원으로 공동 배양하여 인슐린저항성을 가지는 유사지방모델을 형성할 수 있고, 내부에 지방조직이 형성된 하이드로겔 스캐폴드를 이용하여 당뇨병을 포함한 대사성 질환 치료 및 예방을 목적으로 하는 약물 개발에 필요한 글루코스 수용성 평가를 고속 대량 스크리닝 방법으로 수행할 수 있다.
Int. CL G01N 33/483 (2006.01.01) G01N 33/50 (2017.01.01) G01N 21/64 (2006.01.01) C12N 5/077 (2010.01.01)
CPC G01N 33/4833(2013.01) G01N 33/4833(2013.01) G01N 33/4833(2013.01) G01N 33/4833(2013.01) G01N 33/4833(2013.01) G01N 33/4833(2013.01) G01N 33/4833(2013.01)
출원번호/일자 1020180114740 (2018.09.27)
출원인 한국화학연구원
등록번호/일자 10-2087928-0000 (2020.03.05)
공개번호/일자
공고번호/일자 (20200312) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2018.09.27)
심사청구항수 6

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국화학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김기영 대전광역시 서구
2 최경진 대전광역시 유성구
3 박성범 대전광역시 유성구
4 정원훈 대전광역시 유성구
5 남혜진 대전광역시 서구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인 플러스 대한민국 대전광역시 서구 한밭대로 ***번지 (둔산동, 사학연금회관) **층

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국화학연구원 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2018.09.27 수리 (Accepted) 1-1-2018-0951941-13
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2019.03.19 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2019.06.13 수리 (Accepted) 9-1-2019-0026825-61
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2019.10.23 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0770266-37
5 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2019.12.17 수리 (Accepted) 1-1-2019-1301569-76
6 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2020.01.17 수리 (Accepted) 1-1-2020-0054099-81
7 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2020.02.21 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2020-0185555-38
8 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2020.02.21 수리 (Accepted) 1-1-2020-0185562-58
9 등록결정서
Decision to grant		 2020.03.02 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2020-0157517-59
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
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a) 지방전구세포, 마크로파지 및 알지네이트 하이드로겔을 포함한 혼합물을 3차원 세포-적하 시스템을 이용하여 하이드로겔 스캐폴드를 제조하는 단계;b) 하이드로겔 스캐폴드에 배양액을 처리하여 지방전구세포 및 마크로파지가 인슐린 저항성을 가지는 염증성 유사지방 모델을 형성하도록 증식 및 분화시키는 단계;c) 하이드로겔 스캐폴드에 혈청 결핍(serum free) 배지를 처리하는 단계;d) 하이드로겔 스캐폴드에 크랩스-링거 중탄산염 버퍼(Krebs-Ringer Bicarbonate Buffer)을 처리하는 단계;e) 하이드로겔 스캐폴드에 염증성 질환과 인슐린 저항성이 유발된 대사질환인 비만 또는 당뇨병의 대사질환 치료제 또는 대사질환 치료제 후보 물질을 처리하는 단계;f) 하이드로겔 스캐폴드에 인슐린을 처리하는 단계;g) 하이드로겔 스캐폴드에 300 내지 500 μM 농도의 2-NBDG (2-(N-(7-Nitrobenz-2-oxa-1,3-diazol-4-ul)Amino)-2-Dedoxyglucose)를 처리하는 단계; 및h) 하이드로겔 스캐폴드에 포함된 세포 내부의 2-NBDG (2-(N-(7-Nitrobenz-2-oxa-1,3-diazol-4-ul)Amino)-2-Dedoxyglucose) 함량을 측정하는 단계;를 포함하는 글루코스 수용성 평가(glucose uptake assay) 방법
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제1항에 있어서,상기 b) 단계의 염증성 유사 지방모델은 마크로파지 공동배양을 통한 지방조직세포의 인슐린 저항성이 유도된 것인 글루코스 수용성 평가 방법
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제1항에 있어서, 상기 b) 단계는 염증성 유사 지방 모델 형성은 지방조직 형성 촉진을 위해 인슐린을 포함한 배지에서 증식 및 분화되고, 분화 종료 후 상기 하이드로겔 스캐폴드에 잔류된 인슐린을 제거한 후, 글루코스 기아(starvation) 및 인슐린 자극을 수행하는 단계인 글루코스 수용성 평가 방법
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제1항에 있어서, 상기 b) 단계의 지방전구세포 및 마크로파지 배양은 세포외기질(Extra Cellular Matrix)이 존재하지 않는 조건에서 배양되는 글루코스 수용성 평가 방법
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제1항에 있어서, 세포의 DNA를 정량화하고, DNA 정량화 값을 글루코스 유사체인 2-NBDG의 정량화에 사용하는 단계를 더 포함하는 글루코스 수용성 평가 방법
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제1항에 있어서, 상기 a) 단계의 알지네이트 하이드로겔 비드는 알지네이트, 젤라틴 및 콜라겐을 함유하며, 96-웰 세포배양플레이트에 적합한 크기를 갖으며, 장기 배양에서 3차원 세포배양체 구조가 유지되는 글루코스 수용성 평가 방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 한국화학연구원 한국화학연구원 기관고유사업 선도형 유효물질 발굴 및 생체효능평가 융합기술 구축
2 국가과학기술연구회 한국화학연구원 융합연구사업 역생물공학 기법을 이용한 3차원 세포배양 기반 신약평가 기술개발