1 |
1
돼지로부터 분리된 미성숙 난자를 체외성숙배양에서 성숙을 유도하고, 이후 성숙된 난자를 정자로 체외 수정시켜 수정란을 제조하는 단계; 및상기 수정란을 멜라토닌이 포함된 배지에서 배양하는 단계; 를 포함하고,상기 수정란을 멜라토닌이 포함된 배지에서 배양하는 단계는, 수정란을 체외 수정용 기본 배지에서 24시간 동안 1차 배양하는 단계; 및상기 1차 배양된 배양물에서 4세포기 배아를 회수하여, 멜라토닌을 포함하는 배아 배양용 배지에서 2차 배양하는 단계;로 이루어지고,상기 기본 배지는 무기염류, 탄소원, 아미노산, 소 혈청 알부민, 보조인자 및 항생제로 이루어지고, 상기 무기염류는 NaCl, KCl, 및 NaHCO3로 이루어지고, 상기 탄소원은 글루코오스, 나트륨, 피루베이트 및 젖산칼슘염로 이루어지고, 보조인자로는 미량원소, 완충액으로 이루어지고,상기 멜라토닌을 포함하는 배아 배양용 배지는 상기 기본 배지에 멜라토닌이 10-6M (1uM) ~ 10-3M (1mM)로 함유하는 착상률 향상을 위한 배지이고,상기 2차 배양된 배아는 미토콘드리아 생합성을 촉진함으로써, 미토콘드리아의 ATP 생성 기능, 세포 유지기능을 향상되는 것을 특징으로 하는, 착상률이 증가된 돼지 배아 생산 방법
|